ANKRD1作为舌鳞癌的诊治靶标制造技术

本发明专利技术公开了ANKRD1作为舌鳞癌的诊治靶标。据此可将ANKRD1用于开发诊断舌鳞癌的产品、开发治疗舌鳞癌的药物。本发明专利技术的研究成果为临床医师制定个性化治疗方案提供理论基础、并且能够为舌鳞癌药物的开发提供新的药物靶点。

ANKRD1 as a target for diagnosis and treatment of squamous cell carcinoma of tongue

The invention discloses ANKRD1 as a target for the diagnosis and treatment of squamous cell carcinoma of tongue. Accordingly, ANKRD1 can be used for developing the diagnosis of squamous cell carcinoma of tongue and developing a medicine for treating squamous cell carcinoma of the tongue. The research results of the invention provide the theoretical basis for the clinician to formulate a personalized treatment scheme, and can provide a new target for the development of the tongue squamous cell carcinoma medicine.

【技术实现步骤摘要】
ANKRD1作为舌鳞癌的诊治靶标
本专利技术涉及生物
，具体地涉及ANKRD1基因在舌鳞癌的诊断、治疗中的用途。
技术介绍
舌癌是口腔颌面部常见的恶性肿瘤之一，以鳞癌最为常见，居口腔癌之首。舌癌多发生于舌的中三分之一侧缘，恶性程度较高，局部浸润性强，常累及舌肌，使舌运动受限，影响讲话、进食以及吞咽功能。尽管在治疗方面取得了较大的进展，但是舌癌病人的存活率在过去近几十年内并没有明显的提高。目前研究表明，吸烟、饮酒等化学因素、人乳头(状)瘤病毒(humanpapillomavirus，HPV)以及遗传因素改变与舌癌的发生发展密切相关。虽然研究者们已陆续发现近几十个瘤基因或抑瘤基因参与了舌癌的发生和发展，但到目前为止，舌癌发病的分子机制还未能明确，可能还存在其它肿瘤相关基因参与了舌癌的发病过程。因此，如果能寻找到舌癌特异性相关基因，这将有助于阐明舌癌发病的分子机制，也将为舌癌的诊断、治疗和预后提供分子靶标。
技术实现思路
本专利技术的目的之一在于提供一种通过检测ANKRD1基因或蛋白表达差异来诊断舌鳞癌的方法。本专利技术的目的之二在于提供一种通过检测ANKRD1基因或蛋白表达差异来预测舌鳞癌预后的方法。本专利技术的目的之三在于提供一种通过抑制ANKRD1基因或ANKRD1蛋白来治疗舌鳞癌的方法。本专利技术的目的之四在于提供一种用于筛选治疗舌鳞癌的药物的方法。本专利技术的目的之五在于提供一种用于治疗舌鳞癌的药物。为了实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：本专利技术提供了检测ANKRD1基因或ANKRD1蛋白的产品在制备舌鳞癌诊断工具中的用途。本专利技术还提供了检测ANKRD1基因或ANKRD1蛋白的产品在制备预测舌鳞癌预后工具中的用途。进一步，所述检测ANKRD1基因或ANKRD1蛋白的产品包括检测ANKRD1基因或ANKRD1蛋白的表达水平的产品。所述产品包括能够结合ANKRD1基因的核酸或者能够结合ANKRD1蛋白的物质(例如抗体)。所述核酸能够检测ANKRD1基因的表达水平；所述物质能够检测ANKRD1蛋白的表达水平。本专利技术的检测ANKRD1基因的产品可基于使用核酸分子的已知方法来发挥其功能：如PCR、如Southern杂交、Northern杂交、点杂交、荧光原位杂交(FISH)、DNA微阵列、ASO法、高通量测序平台等。使用该产品可以定性地、定量地、或半定量地实施分析。包含在上述产品中的核酸可以通过化学合成来获得，或通过从生物材料制备含有期望核酸的基因，然后使用设计用于扩增期望核酸的引物扩增它来获得。进一步，所述PCR方法为已知方法，例如，ARMS(AmplificationRefractoryMutationSystem，扩增不应突变系统)法、RT-PCR(逆转录酶-PCR)法、嵌套PCR法等等。扩增的核酸可以通过使用点印迹杂交法、表面等离子共振法(SPR法)、PCR-RFLP法、原位RT-PCR法、PCR-SSO(序列特异性寡核苷酸)法、PCR-SSP法、AMPFLP(可扩增片段长度多态性)法、MVR-PCR法、和PCR-SSCP(单链构象多态性)法来检测。上面所述的核酸包括扩增ANKRD1基因的引物，产品中包括的引物可以通过通过化学合成来制备，通过使用本领域技术人员知道的方法参考已知信息来适当地设计，并通过化学合成来制备。在本专利技术的具体实施方案中，所述核酸为QPCR实验中使用的扩增引物，所述引物的序列如SEQIDNO.1(正向序列)和SEQIDNO.2(反向序列)所示。上面所述的核酸还可包括探针，所述探针可以通过化学合成来制备，通过使用本领域技术人员知道的方法参考已知信息来恰当设计，并通过化学合成来制备，或者可以通过从生物材料制备含有期望核酸序列的基因，并使用设计用于扩增期望核酸序列的引物扩增它来制备。本专利技术的检测ANKRD1蛋白的产品可基于使用抗体的已知方法来发挥其功能：例如，可以包括ELISA、放射免疫测定法、免疫组织化学法、Western印迹等。本专利技术的检测ANKRD1蛋白的产品包括特异性结合ANKRD1蛋白的抗体或其片段。可以使用任何结构、尺寸、免疫球蛋白类别、起源等的抗体或其片段，只要它结合靶蛋白质即可。本专利技术的检测产品中包括的抗体或其片段可以是单克隆的或多克隆的。抗体片段指保留抗体对抗原的结合活性的抗体一部分(部分片段)或含有抗体一部分的肽。抗体片段可以包括F(ab′)2、Fab′、Fab、单链Fv(scFv)、二硫化物键合的Fv(dsFv)或其聚合物、二聚化V区(双抗体)、或含有CDR的肽。本专利技术的检测ANKRD1蛋白的产品可以包括编码抗体或编码抗体片段的氨基酸序列的分离的核酸，包含该核酸的载体，和携带该载体的细胞。抗体可以通过本领域技术人员公知的方法来获得。例如，制备保留整个或部分靶蛋白质的多肽或整合编码它们的多核苷酸的哺乳动物细胞表达载体作为抗原。使用抗原免疫动物后，从经过免疫的动物获得免疫细胞并融合骨髓瘤细胞以获得杂交瘤。然后从杂交瘤培养物收集抗体。最后可以通过使用被用作抗原的ANKRD1蛋白或其部分对获得的抗体实施抗原特异性纯化来获得针对ANKRD1蛋白的单克隆抗体。可以如下制备多克隆抗体：用与上文相同的抗原免疫动物，从经过免疫的动物收集血液样品，从血液中分离出血清，然后使用上述抗原对血清实施抗原特异性纯化。可以通过用酶处理获得的抗体或通过使用获得的抗体的序列信息来获得抗体片段。标记物与抗体或其片段的结合可以通过本领域普遍知道的方法来实施。例如，可以如下荧光标记蛋白质或肽：用磷酸盐缓冲液清洗蛋白质或肽，添加用DMSO、缓冲剂、等准备的染料，然后混合溶液，再于室温放置10分钟。另外，标记可使用商品化的标记试剂盒，诸如生物素标记试剂盒，如生物素标记试剂盒-NH2、生物素标记试剂盒-SH(DojindoLaboratories)；碱性磷酸酶标记试剂盒诸如碱性磷酸酶标记试剂盒-NH2、碱性磷酸酶标记试剂盒-SH(DojindoLaboratories)；过氧化物酶标记试剂盒诸如过氧化物酶标记试剂盒-NH2、过氧化物酶标记试剂盒-NH2(DojindoLaboratories)；藻胆蛋白标记试剂盒诸如藻胆蛋白标记试剂盒-NH2、藻胆蛋白标记试剂盒-SH、B-藻红蛋白标记试剂盒-NH2，B-藻红蛋白标记试剂盒-SH、R-藻红蛋白标记试剂盒-NH2、R-藻红蛋白标记试剂盒SH(DojindoLaboratories)；荧光标记试剂盒诸如荧光素标记试剂盒-NH2、HiLyteFluor(TM)555标记试剂盒-NH2、HiLyteFluor(TM)647标记试剂盒-NH2(DojindoLaboratories)；及DyLight547和DyLight647(TechnoChemicalCorp.)、Zenon(TM)、AlexaFluor(TM)抗体标记试剂盒、Qdot(TM)抗体标记试剂盒(InvitrogenCorporation)和EZ-标记物蛋白质标记试剂盒(FunakoshiCorporation)。为了正确标记，可以使用适宜的仪器来检测经过标记的抗体或其片段。作为依照本专利技术的检测产品的样品，可以使用例如自活检受试者获得的组织样品或流体。样品不受特别限制，只要它适于本专利技术的测定；例如，它可以本文档来自技高网...

【技术保护点】
检测ANKRD1基因或ANKRD1蛋白的产品在制备诊断舌鳞癌或预测舌鳞癌预后的工具中的应用。

【技术特征摘要】
1.检测ANKRD1基因或ANKRD1蛋白的产品在制备诊断舌鳞癌或预测舌鳞癌预后的工具中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述检测ANKRD1基因或ANKRD1蛋白的产品包括检测ANKRD1基因或ANKRD1蛋白的表达水平的产品。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述产品包括能够结合ANKRD1基因的核酸或者能够结合ANKRD1蛋白的物质；所述核酸能够检测ANKRD1基因的表达水平；所述物质能够检测ANKRD1蛋白的表达水平。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述核酸是实时定量PCR中使用的特异扩增ANKRD1基因的引物如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示。5.一种诊断舌鳞癌或预测舌鳞癌预后的工具，其特征在于，所述工具包括能够检测ANKRD1基...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖枫，杜海威，
申请(专利权)人：北京泱深生物信息技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11