一种检测钉螺体内感染血吸虫的核酸的反应体系制造技术

技术编号:15740087 阅读:112 留言:0更新日期:2017-07-02 05:38
本发明专利技术提供了一种检测钉螺体内感染血吸虫的核酸的反应体系及检测方法。具体地,本发明专利技术提供了一种比例优化的LAMP扩增显色剂,以及包含所述显色剂的反应体系和试剂盒,本发明专利技术还提供了一种利用所述显色剂的LAMP检测方法。实验表明通过调整显色剂中钙黄绿素和Mn

A detection of schistosome infection from the nail nucleic acid reaction system

The present invention provides a system for the detection of nucleic acid reaction from the nail schistosome infection and detection methods. Specifically, the invention provides an optimized proportion of LAMP amplification of chromogenic agent and a chromogenic reagent reaction system and kit, the invention also provides a chromogenic agent using the LAMP detection method. Experiments showed that calcein and Mn were regulated by adjusting the chromogenic agents

【技术实现步骤摘要】
一种检测钉螺体内感染血吸虫的核酸的反应体系
本专利技术涉及检测领域,具体地,涉及一种检测钉螺体内感染血吸虫的核酸的反应体系。
技术介绍
血吸虫病一直是一种严重危害人民身体健康和阻碍我国和全球许多国家社会经济发展的重要寄生虫病。经过多年持续努力,全国血吸虫病疫情得到了有效遏制。当前全国血吸虫病呈现低度流行态势,但传播媒介(钉螺)及渔船民等仍然较多,血吸虫病传播风险依然存在,2013年以来在血吸虫病传播阻断地区相继发现了血吸虫感染阳性钉螺,以及江西省、湖南省等地发生数例急性血吸虫病感染案例,加强血吸虫病传播风险监测应对显得十分迫切。然而现有的实验方法不能满足低感染态势下的预警监测,如钉螺压碎法结合镜检在低感染情况下容易漏检;哨鼠感染法实验监测疫水环境耗时长,需35天以上,检测滞后,不能预警。发展敏感、实用的感染性钉螺检测试剂显得非常必要和重要。近年来,基于PCR技术的分子生物学方法如经典PCR、real-timePCR方法等在钉螺感染血吸虫检测中表现了其敏感性高、特异性强的优点,但由于这些方法需要昂贵的试验设备、操作比较繁琐,未能在血吸虫病防治现场大规模推广。因此,本领域迫切需要开发方便本文档来自技高网...
一种检测钉螺体内感染血吸虫的核酸的反应体系

【技术保护点】
一种LAMP扩增显色剂,其特征在于,所述的显色剂包含(a)钙黄绿素(Calcein)、(b)Mn

【技术特征摘要】
1.一种LAMP扩增显色剂,其特征在于,所述的显色剂包含(a)钙黄绿素(Calcein)、(b)Mn2+、和(c)任选的相溶溶剂;并且所述钙黄绿素和Mn2+的摩尔浓度比为1:(10-15),较佳地为1:12。2.如权利要求1所述的显色剂,其特征在于,所述的钙黄绿素的摩尔浓度为1.0-1.5mmol/L,较佳地为1.25mmol/L。3.如权利要求1所述的显色剂,其特征在于,所述的Mn2+的摩尔浓度为10-20mmol/L,较佳地为15mmol/L。4.一种LAMP反应体系,其特征在于,所述的反应体系包含(A)权利要求1所述显色剂、(B)用于LAMP扩增的引物和酶、和(C)缓冲体系。5.如权利要求4所述的反应体系,其特征在于,所述的反应体系中所述显色剂的含量为3%-5%,较佳地为4%,按反应体系的总体积计。6.如权利要求4所述的反应体系,其特征在于,所述的用于LAMP扩增的引物包含选自下组的引物:第一引物对:F3:GCTTTGTCCTTCGGGCATTA(SEQIDNO.:1)...

【专利技术属性】
技术研发人员:周晓农秦志强李石柱许静冯婷
申请(专利权)人:中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所
类型:发明
国别省市:上海,31

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