一种含麦角甾醇的钙片及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种含麦角甾醇的钙片及其制备方法。本发明专利技术通过用优化培养基对酿酒酵母进行好氧发酵培养，提高酿酒酵母对麦角甾醇的表达量；然后将酵母发酵液进行固液分离，得到的上清液冷冻干燥，得到物质I；得到的菌体用生理盐水稀释后通过脉冲电场作用，固液分离，得到的上清液冷冻干燥，得到物质II；将物质I和物质II合并，得到物质A；将物质A、阿拉乳钙、全脂奶粉、麦芽糊精和甘蔗提取物混合均匀，得到混合料；再用水溶解混合料，喷雾干燥，制粒，干燥，整粒、压片，得到含麦角甾醇的钙片。本发明专利技术提供的含麦角甾醇的钙片不仅有利于钙的吸收，而且能有效增强人体免疫力。

【技术实现步骤摘要】
一种含麦角甾醇的钙片及其制备方法
本专利技术属于保健食品
，特别涉及一种含麦角甾醇的钙片及其制备方法。
技术介绍
麦角甾醇又称麦角固醇，是脂溶性维生素D2的前体，当受到紫外线照射时可转化为维生素D2，麦角甾醇可部分代替维生素D2的作用，促进钙吸收。麦角甾醇可以增强人体抵抗疾病的能力具有明显的抑菌、抗肿瘤旧功效。麦角甾醇也可以作为重要的医药化工原科，用于生产“可的松”、“激素黄体酮”等甾醇类药物。钙质对各年龄组的人群都具有重要营养作用，是人体内最重要的矿物质之一。根据卫生部研究资料表明，我国有40％的儿童和60％的中老年缺钙，但市面现有的补钙产品大多价格昂贵，口味较差，且补钙效果和产品吸收率也有待验证。目前，人们仍然期望获得一种更为天然、口感更好、更有利于钙吸收的钙片。
技术实现思路
本专利技术的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种含麦角甾醇的钙片的制备方法。本专利技术的另一目的在于提供通过上述制备方法得到的含麦角甾醇的钙片。本专利技术的目的通过下述技术方案实现：一种含麦角甾醇的钙片的制备方法，包含以下步骤：(1)酿酒酵母的培养：用优化培养基对酿酒酵母进行好氧发酵培养，得到酿酒酵母菌液；优化培养基的组成如下：1％(w/v)酵母膏、2％(w/v)蛋白胨、2％(w/v)葡萄糖、10％(v/v)乙醇，1～3％(w/v)NaCl、0～0.01mol/mlMg2+、0～0.01mol/mlCa2+、0～0.01mol/mlFe3+、0～0.01mol/mlNH4+、0～0.01mol/mlAl3+、0～0.01mol/mlK+；(2)含麦角甾醇的提取：①将步骤(1)获得的酿酒酵母菌液进行固液分离，分别得到发酵上清和菌体；②发酵上清冷冻干燥，得到固体物质I；③将菌体用无菌去离子清洗后，再用生理盐水稀释菌体，得到的菌体悬浮液通过脉冲电场破碎细胞，进行固液分离，取上清；将上清进行冷冻干燥，得到固体物质II；④将固体物质I和固体物质II合并，得到固体物质A；(3)含麦角甾醇的钙片的制备：将固体物质A50质量份、阿拉乳钙50质量份、全脂奶粉80质量份、麦芽糊精50质量份和甘蔗提取物20质量份混合均匀，得到混合料；再用水溶解混合料，喷雾干燥，制粒，干燥，整粒、压片，得到含麦角甾醇的钙片。步骤(1)中所述的酿酒酵母优选为酿酒酵母GIM2.182。步骤(1)中所述的好氧发酵培养的条件优选为于25～30℃、100～200rpm条件下振荡培养。步骤(1)中所述的优化培养基的组成优选如下：1％(w/v)酵母膏、2％(w/v)蛋白胨、2％(w/v)葡萄糖、10％(v/v)乙醇，2％(w/v)NaCl、0.01mol/mlMg2+。步骤(2)①和③中所述的固液分离的方式优选为离心。所述的离心的条件优选为3000r/min离心15min。步骤(2)②和③中所述的冷冻干燥的条件优选为0.2mbar、-50℃。步骤(2)③中所述的生理盐水的体积用量优选为相当于菌体体积的9倍。步骤(2)③中所述的脉冲电场的条件优选为13μs脉宽，40kV/cm电场强度，15个脉冲电场。步骤(3)中所述的水的体积用量优选为相当于混合料体积的10倍。所述的水优选为纯水。步骤(3)中所述的喷雾干燥的温度优选为65℃。步骤(3)中所述的制粒得到颗粒优选为16目的湿颗粒。步骤(3)中所述的干燥的条件优选为温度为70℃、蒸汽压为1.5MPa，干燥至水分降至5％以内。步骤(3)中所述的整粒得到颗粒优选为通过14目筛的颗粒。步骤(3)中所述的压片的条件优选为压力20kn、压片直径6mm、压片深度8mm、片剂厚度3mm、转盘转数20r/min。一种含麦角甾醇的钙片，通过上述制备方法得到。本专利技术相对于现有技术具有如下的优点及效果：(1)本专利技术在钙片中加入甘蔗提取物，甘蔗提取物中氨基酸和各种矿物质，结合酵母提取物，可以改善钙片风味口感，同时提高人体免疫力。(2)本专利技术在钙片中加入麦角甾醇，部分代替维生素D2的作用，可以促进钙的吸收，同时还能抑菌，抗肿瘤。(3)本品原料筛选过程中，具有合法性和安全性，同时具有更佳的口感。(4)本专利技术将脉冲电场作用于酵母细胞，提高酵母细胞膜通透性，可显著提高细胞内麦角甾醇、蛋白质和氨基酸释放量，增加钙离子在细胞中的浓度。附图说明图1是使用不同碳源发酵酿酒酵母08-h后菌体中麦角甾醇含量的检测结果图。图2是使用不同浓度的NaCl发酵酿酒酵母08-h后菌体中麦角甾醇含量的检测结果图。图3是使用不同金属离子发酵酿酒酵母08-h后菌体中麦角甾醇含量的检测结果图。具体实施方式下面结合实施例及附图对本专利技术作进一步详细的描述，但本专利技术的实施方式不限于此。实施例1原始菌种中麦角甾醇的含量(1)菌种购买酿酒酵母08-h菌种购于广东省微生物菌种保藏中心，编号GIM2.182。、(2)菌种培养将4℃保藏菌种在斜面培养基(组成成分为：1.5％(w/v)酵母膏，0.5％(w/v)蛋白胨，1％(w/v)葡萄糖，2％(w/v)琼脂)上活化后，接种于装有8mL液态种子培养基(为YPD培养基，组成成分为：1％(w/v)酵母膏，2％(w/v)蛋白胨，2％(w/v)葡萄糖)的试管中，28℃下120rpm培养12h，得到一级液态菌种。取1mL一级液态菌种接种于装有50mL种子培养基的250mL三角瓶中，在28℃下以150rpm恒温振荡培养20h，制得二级液态菌种。(3)发酵液处理和麦角甾醇提取将20mL菌液(即二级液态菌种)于4000rpm，10min离心洗涤2次，收集细胞，加入醇-碱溶液(8gKOH溶解于32mL浓度为60％(v/v)乙醇溶液得到)，85～90℃皂化4h，冷却至室温，25mL正庚烷萃取，收集上清液，液相检测。(4)麦角甾醇检测-高效液相色谱色谱柱：BrownValidatedC18(250×6mm)；流动相为水：甲醇(体积比)＝2：98；流速为1.5ml/min；检测波长为282nm。(5)菌种的筛选和麦角甾醇初期含量的测定利用YPD培养基，考察了广东省菌种保藏中心的酿酒酵母08-h中麦角甾醇的含量，菌种添加量为2％(v/v)，于28℃下以150rpm恒温振荡培养20h，对发酵液进行处理(具体条件同步骤(3))，采用高效液相色谱对麦角甾醇含量进行检测(具体条件同步骤(4))，结果显示，酵母中麦角甾醇含量达到细胞干重的1.73％，今后工作都将以酿酒酵母08-h作为实验菌种。(6)碳源对麦角甾醇含量的影响利用YPD培养基，葡萄糖、蔗糖、糖蜜、果糖、麦芽糖分别作为碳源(YPD培养基中本身含2％葡萄糖，其他碳源相应取代同样量的葡萄糖得到不同碳源的培养基)，酿酒酵母08-h菌种添加量为2％(v/v)，于28℃下以150rpm恒温振荡培养20h，对发酵液进行处理(具体条件同步骤(3))，采用高效液相色谱对麦角甾醇含量进行检测(具体条件同步骤(4))，结果如图1显示，同样消耗等量基质，在葡萄糖为碳源的培养基中麦角甾醇含量最高，达到1.67％。(7)盐胁迫对麦角甾醇含量的影响Na+胁迫时，由各种信号传导途径将胁迫信号逐级放大，并最终启动Na+胁迫的各种应答蛋白的表达，对麦角甾醇含量会有一定影响。本实验中以葡萄糖为碳源，YPD培养基培养酿酒酵母08-h菌种，在该培养基中分别添加不同浓本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种含麦角甾醇的钙片的制备方法，其特征在于包含以下步骤：(1)酿酒酵母的培养：用优化培养基对酿酒酵母进行好氧发酵培养，得到酿酒酵母菌液；优化培养基的组成如下：1％(w/v)酵母膏、2％(w/v)蛋白胨、2％(w/v)葡萄糖、10％(v/v)乙醇，1～3％(w/v)NaCl、0～0.01mol/ml Mg

【技术特征摘要】
1.一种含麦角甾醇的钙片的制备方法，其特征在于包含以下步骤：(1)酿酒酵母的培养：用优化培养基对酿酒酵母进行好氧发酵培养，得到酿酒酵母菌液；优化培养基的组成如下：1％(w/v)酵母膏、2％(w/v)蛋白胨、2％(w/v)葡萄糖、10％(v/v)乙醇，1～3％(w/v)NaCl、0～0.01mol/mlMg2+、0～0.01mol/mlCa2+、0～0.01mol/mlFe3+、0～0.01mol/mlNH4+、0～0.01mol/mlAl3+、0～0.01mol/mlK+；(2)含麦角甾醇的提取：①将步骤(1)获得的酿酒酵母菌液进行固液分离，分别得到发酵上清和菌体；②发酵上清冷冻干燥，得到固体物质I；③将菌体用无菌去离子清洗后，再用生理盐水稀释菌体，得到的菌体悬浮液通过脉冲电场破碎细胞，进行固液分离，取上清；将上清进行冷冻干燥，得到固体物质II；④将固体物质I和固体物质II合并，得到固体物质A；(3)含麦角甾醇的钙片的制备：将固体物质A50质量份、阿拉乳钙50质量份、全脂奶粉80质量份、麦芽糊精50质量份和甘蔗提取物20质量份混合均匀，得到混合料；再用水溶解混合料，喷雾干燥，制粒，干燥，整粒、压片，得到含麦角甾醇的钙片。2.根据权利要求1所述的含麦角甾醇的钙片的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述的酿酒酵母优选为酿酒酵母GIM2.182。3.根据权利要求1所述的含麦角甾醇的钙片的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述的好氧发酵培养的条件为于25～30℃、100～200rpm条件下振荡培...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁磊，班雯婷，陈瑞荣，王庆福，黄清铧，陈盈盈，李奇伟，安玉兴，
申请(专利权)人：广东省生物工程研究所广州甘蔗糖业研究所，
类型：发明
国别省市：广东,44