本发明专利技术涉及油脂中反式脂肪酸的测定领域，尤其涉及一种高分辨率测定灵芝孢子油中反式脂肪酸的方法，应用该方法的甲脂化过程较简单，不需要添加具有毒性的甲醇等溶剂，环保性好，安全性高；灵芝孢子油中反式脂肪酸的方法的检出限较低，能准确测定灵芝孢子油中方式脂肪酸含量水平；且具有灵敏度较高的特点，操作简单能广泛推广使用。
A high resolution method for the determination of trans fatty acids in Ganoderma lucidum spore oil
The invention relates to the field of determination of trans fatty acids in oils, in particular to a high resolution method for the determination of trans fatty acids in Ganoderma lucidum spore oil, methyl esterification process of the application of this method is relatively simple, do not need to add toxic solvents such as methanol, good environmental protection, high safety; method of trans fatty acids the ganoderma spore oil, lower detection limit, can accurately determine the mode of ganoderma spore oil, fatty acid content; and has the characteristics of high sensitivity, simple operation can be widely used.
【技术实现步骤摘要】
一种高分辨率测定灵芝孢子油中反式脂肪酸的方法
本专利技术涉及油脂中反式脂肪酸的测定领域，尤其涉及一种高分辨率测定灵芝孢子油中反式脂肪酸的方法。
技术介绍
灵芝(Ganodermalucidum)，是担子菌纲多孔菌科灵芝属真菌赤芝和紫芝的总称，灵芝孢子是灵芝生长成熟期从菌盖弹射出的极其细小的孢子，为灵芝的生殖细胞，具有灵芝的全部遗传活性物质。灵芝孢子油为灵芝孢子粉经干燥、破壁、超临界二氧化碳萃取制得，为黄色透明液体，主要成分是灵芝三萜、不饱和脂肪酸等，药理实验研究也表明灵芝孢子油具有抗肿瘤、提高免疫、保肝护肝、抗氧化等作用。目前CFDA官网数据显示灵芝孢子油国产保健食品批文为48个，主要功效成分为灵芝三萜类，主要保健功能是增强免疫力、化学性肝损伤有辅助保护功能等。灵芝孢子油中不饱和脂肪酸含量较高，但是不饱和脂肪酸容易发生氧化酸败，尤其是经过精制、罐装胶囊、贮存等期间更容易发生氧化反应，导致反式脂肪酸含量、酸值、过氧化值升高，不仅会影响灵芝孢子油的功效，而且反式脂肪酸会引起胆固醇增高，从而增加心血管疾病发生的风险。目前食品中反式脂肪酸测定的标准方法主要为GB5009.257-2016、GB5413.36-2010和SN/T2326-2009，但是气相色谱法测定反式脂肪酸时，脂肪酸皂化、甲酯化等样品处理过程较复杂，同时这三种方法均存在检出限较高、不能准确测定食品中反式脂肪酸含量水平，而难以广泛应用。
技术实现思路
本专利技术针对现有技术中存在的问题，提供一种高分辨率测定灵芝孢子油中反式脂肪酸的方法，具有甲酯化处理相对简单、检出限较低、灵敏度高等优点，能有效解决现有技术不足的问题。本专利技术通过以下技术方案实现该目的：一种高分辨率测定灵芝孢子油中反式脂肪酸的方法，包括如下步骤：S1、甲酯化：称取0.100g灵芝孢子油，加入3ml正己烷，再加入3ml的0.10～0.4mol/L的氢氧化钾甲醇溶液，在50℃的温度下震荡15min，静止30min后，过膜得到样品；S2、气相色谱检测：选用HP-88色谱柱，载气为氮气；进样口温度220～250℃，压力35.57PSI，分流比100:1；检测器温度230～260℃，氢气流量35～50mL/min，空气350～500mL/min，氮气25mL/min；柱温箱温度为程序升温，140℃保留5min，以3～10℃/min的速度升温到210℃，保留15min，再以2～5℃/min的速度升到230℃，保留20min；进样量：1μL。其中，所述步骤S1中的膜是设置有微孔的有机滤膜。作为优选的，所述微孔的孔径为0.45μm。作为优选的，所述步骤S2中进样口温度为230℃，检测器温度为250℃，氢气流量为45ml/min，空气流量为450ml/min。作为优选的，所述步骤S2中程序升温具体为：140℃保留5min，以5℃/min的速度升温到210℃，保留15min，再以3℃的速度升到230℃，保留20min。与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：1)本专利技术高分辨率测定灵芝孢子油中反式脂肪酸的方法的甲脂化过程较简单，不需要添加具有毒性的甲醇等溶剂，环保性好，安全性高；2)本专利技术高分辨率测定灵芝孢子油中反式脂肪酸的方法的检出限较低，能准确测定灵芝孢子油中方式脂肪酸含量水平；3)本专利技术高分辨率测定灵芝孢子油中反式脂肪酸的方法的灵敏度较高，并操作简单能广泛推广使用。具体实施方式以下结合具体实施例对本专利技术进行详细描述。实施例1。一种高分辨率测定灵芝孢子油中反式脂肪酸的方法，具体实施方式如下：1)灵芝孢子油甲酯化步骤：精确称取0.100g灵芝孢子油，加入3ml正己烷，再加入3ml的0.1mol/L的氢氧化钾甲醇溶液。使用摇床在50℃的温度下震荡15min，静止30min后，过膜得到样品。2)反式脂肪酸检测方法：色谱柱HP-88(100m×0.25mm×0.2μm，Agilent)；载气：氮气；进样口：温度240℃，压力35.57PSI，分流比100:1；检测器：温度260℃，氢气流量50mL/min，空气500mL/min，氮气25mL/min；3)柱温箱温度：程序升温(140℃，保留5min，以10℃/min的速度升温到210℃，保留15min，再以2℃/min的速度升到230℃，保留20min)；进样量：1μL。实施例2。一种高分辨率测定灵芝孢子油中反式脂肪酸的方法，具体实施方式如下：1)灵芝孢子油甲酯化步骤：精确称取0.100g灵芝孢子油，加入3ml正己烷，再加入3ml的0.3mol/L的氢氧化钾甲醇溶液。使用摇床在50℃的温度下震荡15min，静止30min后，过膜得到样品。2)反式脂肪酸检测方法：色谱柱HP-88(100m×0.25mm×0.2μm，Agilent)；载气：氮气；进样口：温度230℃，压力35.57PSI，分流比100:1；检测器：温度240℃，氢气流量45mL/min，空气450mL/min，氮气25mL/min；3)柱温箱温度：程序升温(140℃，保留5min，以8℃/min的速度升温到210℃，保留15min，再以4℃/min的速度升到230℃，保留20min)；进样量：1μL。实施例3。一种高分辨率测定灵芝孢子油中反式脂肪酸的方法，具体实施方式如下：1)灵芝孢子油甲酯化步骤：精确称取0.100g灵芝孢子油，加入3ml正己烷，再加入3ml的0.4mol/L的氢氧化钾甲醇溶液。使用摇床在50℃的温度下震荡15min，静止30min后，过膜得到样品。2)反式脂肪酸检测方法：色谱柱HP-88(100m×0.25mm×0.2μm，Agilent)；载气：氮气；进样口：温度250℃，压力35.57PSI，分流比100:1；检测器：温度260℃，氢气流量45mL/min，空气450mL/min，氮气25mL/min；3)柱温箱温度：程序升温(140℃，保留5min，以5℃/min的速度升温到210℃，保留15min，再以3℃/min的速度升到230℃，保留20min)；进样量：1μL。实施例4。一种高分辨率测定灵芝孢子油中反式脂肪酸的方法，具体实施方式如下：1)灵芝孢子油甲酯化步骤：精确称取0.100g灵芝孢子油，加入3ml正己烷，再加入3ml的0.2mol/L的氢氧化钾甲醇溶液。使用摇床在50℃的温度下震荡15min，静止30min后，过膜得到样品。2)反式脂肪酸检测方法：色谱柱HP-88(100m×0.25mm×0.2μm，Agilent)；载气：氮气；进样口：温度220℃，压力35.57PSI，分流比100:1；检测器：温度230℃，氢气流量35mL/min，空气350mL/min，氮气25mL/min；3)柱温箱温度：程序升温(140℃，保留5min，以3℃/min的速度升温到210℃，保留15min，再以5℃/min的速度升到230℃，保留20min)；进样量：1μL。实施例5。将反式脂肪酸标准品按照实施例1～4中的方法进行检测，各反式脂肪酸出峰时间不重叠，可以进行高准确度分析，但实施例1、实施例4检测出的反式脂肪酸含量较低于标准品中实际含量，而实施例2、实施例3检测结果与实际含量较一致；另对实施例2、实施例3重复性试验，结果显示反式亚麻酸都出现波动现象，其中实施例2波本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种高分辨率测定灵芝孢子油中反式脂肪酸的方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、甲酯化：称取0.100g灵芝孢子油，加入3ml正己烷，再加入3ml的0.10～0.4mol/L的氢氧化钾甲醇溶液，在50℃的温度下震荡15min，静止30min后，过膜得到样品；S2、气相色谱检测：选用HP‑88色谱柱，载气为氮气；进样口温度220～250℃，压力35.57PSI，分流比100:1；检测器温度230～260℃，氢气流量35～50mL/min，空气350～500mL/min，氮气25m L/min；柱温箱温度为程序升温，140℃保留5min，以3～10℃/min的速度升温到210℃，保留15min，再以2～5℃/min的速度升到230℃，保留20min；进样量：1μL。
【技术特征摘要】
1.一种高分辨率测定灵芝孢子油中反式脂肪酸的方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、甲酯化：称取0.100g灵芝孢子油，加入3ml正己烷，再加入3ml的0.10～0.4mol/L的氢氧化钾甲醇溶液，在50℃的温度下震荡15min，静止30min后，过膜得到样品；S2、气相色谱检测：选用HP-88色谱柱，载气为氮气；进样口温度220～250℃，压力35.57PSI，分流比100:1；检测器温度230～260℃，氢气流量35～50mL/min，空气350～500mL/min，氮气25mL/min；柱温箱温度为程序升温，140℃保留5min，以3～10℃/min的速度升温到210℃，保留15min，再以2～5℃/min的速度升到230℃，保留20min；进样...
【专利技术属性】
技术研发人员：葛啸虎，陈海佳，王一飞，杨占东，
申请(专利权)人：广州康琪莱生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44
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