一种化妆品中禁限用过敏原香精物质的检测方法技术

本发明专利技术涉及化合物检测技术领域，特别涉及一种化妆品中禁限用过敏原香精物质的检测方法。该检测方法包括：取化妆品样品，制备样品溶液；采用液相色谱‑质谱分析技术检测样品溶液中禁限用过敏原香精物质；液相色谱的条件为：色谱柱为苯基柱、RP‑MS或C18色谱柱；流动相A为乙腈，流动相B为含5mM乙酸铵的0.05％甲酸溶液；梯度洗脱程序；质谱的条件为：电喷雾离子源；正离子扫描；多反应监测；离子源温度650℃；离子源电压5500V。该方法具有检测限低、检测效率高、回收率好、可同时定性定量的优点，可用于化妆品中常见香料过敏性化学物质的快速筛查，以满足目前企业质控、市场监管和保障消费者安全的需求。

Method for detecting forbidden essence substance in cosmetics

The invention relates to the technical field of compound detection, in particular to a test method for prohibiting the use of allergen essence substances in cosmetics. The detecting method comprises: cosmetic samples, preparation of sample solution; by liquid chromatography mass spectrometry sample solution technology restriction with allergen flavor substances; liquid chromatography condition: chromatographic column for RP or MS phenyl column, C18 column; the mobile phase A was B, the mobile phase 0.05% formic acid solution containing 5mM ammonium acetate; gradient elution; mass spectrometry conditions: electrospray ion source; positive ion scanning; multiple reaction monitoring; ion source temperature of 650 DEG C; ion source voltage 5500V. This method has low detection limit, high detection efficiency and good recovery rate, at the same time the advantages of qualitative and quantitative, can be used for rapid screening of common spice allergy chemicals in cosmetics, in order to meet the current needs of enterprise quality control, market regulation and protect the safety of consumers.

【技术实现步骤摘要】
一种化妆品中禁限用过敏原香精物质的检测方法
本专利技术涉及化合物检测
，特别涉及一种化妆品中禁限用过敏原香精物质的检测方法。
技术介绍
随着我国改革开放的不断发展，我国人民经济水平与生活质量也在不断提高，审美观不断变化，化妆品成为了人们日常消费的一部分，也是生活必需品。据统计，2014年我国化妆品年销售额达2000多亿元，约占全球化妆品市场的8.8％，仅次于美国，中国已成为全球最大化妆品市场之一。据统计，平均每位女性每天使用12种个人护理品，包含168种成分；平均每位男性每天使用6种个人护理品，包含85种成分。这些成分中一些物质可刺激皮肤和引起过敏反应。据了解，在化妆品类投诉中，使用化妆品后出现皮肤过敏及不良反应的投诉通常占到投诉总量的60％到70％。化妆品中致敏物质有香精、防腐剂、赋形剂、表面活性剂、乳化剂、保湿剂、天然成分等。其中化妆品过敏中至少有35％是由香精引起的过敏，它能在与皮肤直接接触时引起皮肤过敏，也能在其挥发过程中通过呼吸引起人体过敏，或者通过光敏作用导致皮肤过敏，是不可忽视的过敏原。2003年欧盟在修订76/768/EEC法规时规定，包括肉桂醇等16种香精化合物被禁止在化妆品中使用或限制使用，并规定自2005年3月起日用香精中26种香精(其中2种为提取物)如在不可冲洗型化妆品中含量大于等于0.001％、在可冲洗型化妆品中含量大于等于0.01％时，必须在该化妆品标签上加以标明。目前对化妆品中香精类过敏原物质的检测多采用气相色谱法、气相色谱-质谱法、液相色谱法、气相色谱-傅立叶变换红外光谱联用(GC-FTIR)技术等。但由于化妆品成分复杂，芳香性、挥发性物质较多，剂型多样，种类繁杂，且乳化剂、润滑剂、表面活性剂等助剂、功能性成分较多，气相色谱或气相色谱-质谱联用时干扰较大，基线较高，分析时间为30～40分钟，而液相色谱分析也存在分析时间长、峰分离度不高、不能准确定性的问题，因此这些方法均具有一定的局限性。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供了一种化妆品中禁限用过敏原香精物质的检测方法。该检测方法干扰小，基线低，分析时间短，分离度高，能够准确定性、定量。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：本专利技术提供了一种化妆品中禁限用过敏原香精物质的检测方法，包括如下步骤：取化妆品样品，制备样品溶液；采用液相色谱-质谱分析技术检测样品溶液中禁限用过敏原香精物质；液相色谱的条件为：色谱柱为苯基柱、RP-MS或C18色谱柱；流动相A为乙腈，流动相B为含5mM乙酸铵的0.05％甲酸溶液；梯度洗脱程序；质谱的条件为：电喷雾离子源(ESI)；正离子扫描；多反应监测(MRM)；离子源温度650℃；离子源电压5500V；禁限用过敏原香精物质选自水杨酸苄酯、α-异甲基紫罗兰酮、α-戊基肉桂醛、β-香茅醇、肉桂酸苄酯、2-辛炔酸甲酯、α-戊基肉桂醇、香叶醇、苯甲醇、新铃兰醛、芳樟醇、金合欢醇、肉桂醛、香豆素、α-己基肉桂醛、丁香酚、苯甲酸苄基酯、异丁香酚、铃兰醛、肉桂醇、茴香醇、柠檬醛、α-香芹烯或羟基香茅醛。液相色谱－串联质谱法是近年发展起来的一种新技术，可在一级质谱条件下获得很强的待测物准分子离子峰，并且可借助二级质谱对准分子离子进行裂解，进而获得丰富的结构信息。该技术较之气相色谱法、气相色谱-质谱法、液相色谱法、气相色谱-傅立叶变换红外光谱联用(GC-FTIR)法具有检测限低、灵敏度高、抗干扰强的特点，本专利技术针对目前报道较多的化妆品过敏案例中的24种过敏原物质，包括水杨酸苄酯、α-异甲基紫罗兰酮、α-戊基肉桂醛、β-香茅醇、肉桂酸苄酯、2-辛炔酸甲酯、α-戊基肉桂醇、香叶醇、苯甲醇、新铃兰醛、芳樟醇、金合欢醇、肉桂醛、香豆素、α-己基肉桂醛、丁香酚、苯甲酸苄基酯、异丁香酚、铃兰醛、肉桂醇、茴香醇、柠檬醛、α-香芹烯、羟基香茅醛等，首次采用LC-MS/MS技术，建立了化妆品中24种过敏原香精物质的高通量、快速筛查方法，可对化妆品中常见香精过敏原化学物质进行快速在线定性、定量分析。作为优选，梯度洗脱程序为：0～6.0min，10％A～90％A；6.0～8.0min，保持90％A；8.0～8.1min，90％A～10％A；8.1～13.0min，保持10％A。作为优选，液相色谱的流速600μL/min。作为优选，液相色谱的进样量为10μL。作为优选，质谱的母离子、子离子、去簇电压和碰撞能量参数如下：作为优选，质谱条件的雾化气、气帘气、辅助气和碰撞气均为高纯氮气。在本专利技术提供的实施例中，化妆品样品为液态样品或膏状、乳状样品。在本专利技术提供的一具体实施例中，化妆品样品为液态样品，其样品溶液的制备方法为：将化妆品样品与乙腈、氯化钠混合，超声提取，过滤。在本专利技术提供的另一具体实施例中，化妆品样品为膏状、乳状样品，其样品溶液的制备方法为：将化妆品样品与乙腈混合，超声提取，加入氯化钠，离心、过滤。作为优选，以g/mL计，化妆品样品与乙腈的比例为2:(10～20)。在本专利技术提供的实施例中，以g/mL计，化妆品样品与乙腈的比例为2:10。作为优选，氯化钠的加入量为形成氯化钠饱和溶液的量。作为优选，超声提取的频率为28kHz，温度为10～30℃，时间为15min。作为优选，过滤为采用0.22μm的滤膜过滤。作为优选，离心为9000r/min离心10min。本专利技术提供了一种化妆品中禁限用过敏原香精物质的检测方法。该检测方法包括：取化妆品样品，制备样品溶液；采用液相色谱-质谱分析技术检测样品溶液中禁限用过敏原香精物质；液相色谱的条件为：色谱柱为苯基柱或C18色谱柱；流动相A为乙腈，流动相B为含5mM乙酸铵的0.05％甲酸溶液；梯度洗脱程序；质谱的条件为：电喷雾离子源(ESI)；正离子扫描；多反应监测(MRM)；离子源温度650℃；离子源电压5500V。本专利技术至少具有如下优势之一：1、本专利技术建立了一种不同化妆品基质中24种禁限用过敏性香精物质的液相色谱-串联质谱检测方法。本专利技术针对化妆品基质成分复杂，芳香性、挥发性物质多的特点，采用LC-MS/MS技术，建立可同时快速测定化妆品中24种过敏原香精物质的在线高通量、快速筛查方法，液态和固态化妆品各种基质的方法检测限可达5mg/kg，较之目前国内外文献报道的方法(10mg/kg)，降低了50％。该方法具有检测限低、检测效率高、回收率好、可同时定性定量的优点，可用于化妆品中常见香料过敏性化学物质的快速筛查，以满足目前企业质控、市场监管和保障消费者安全的需求。2、LC-MS/MS为串级质谱，通过准分子离子峰裂解为子离子，对化合物进行定性，并可结合保留时间定性，因此较之GC-MS和GC、LC定性更为准确。3、本专利技术方法每个样品的仪器分析时间为13min，而目前相近文献报道的分析方法时间分别为30余分钟和40分钟，是本方法的2.3～3.1倍。4、采用液相色谱-串联质谱时，由于不同化合物裂解方式和裂解离子对有差异，可根据不同化合物的出峰时间、背景干扰、其他化合物干扰等因素，选择合适的离子对，从而在提取离子对图上将其分开，以解决气相色谱、液相色谱检测时峰分离度不好、进而导致定量不准确的问题。5、化妆品中含表面活性剂，该方法加入的除水试剂氯化钠兼有盐析作用，可有效改善文献方法使用无水硫酸钠时破乳本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种化妆品中禁限用过敏原香精物质的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：取化妆品样品，制备样品溶液；采用液相色谱‑质谱分析技术检测所述样品溶液中禁限用过敏原香精物质；所述液相色谱的条件为：色谱柱为苯基柱、RP‑MS或C18色谱柱；流动相A为乙腈，流动相B为含5mM乙酸铵的0.05％甲酸溶液；梯度洗脱程序；所述质谱的条件为：电喷雾离子源；正离子扫描；多反应监测；离子源温度650℃；离子源电压5500V；所述禁限用过敏原香精物质选自水杨酸苄酯、α‑异甲基紫罗兰酮、α‑戊基肉桂醛、β‑香茅醇、肉桂酸苄酯、2‑辛炔酸甲酯、α‑戊基肉桂醇、香叶醇、苯甲醇、新铃兰醛、芳樟醇、金合欢醇、肉桂醛、香豆素、α‑己基肉桂醛、丁香酚、苯甲酸苄基酯、异丁香酚、铃兰醛、肉桂醇、茴香醇、柠檬醛、α‑香芹烯或羟基香茅醛。

【技术特征摘要】
1.一种化妆品中禁限用过敏原香精物质的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：取化妆品样品，制备样品溶液；采用液相色谱-质谱分析技术检测所述样品溶液中禁限用过敏原香精物质；所述液相色谱的条件为：色谱柱为苯基柱、RP-MS或C18色谱柱；流动相A为乙腈，流动相B为含5mM乙酸铵的0.05％甲酸溶液；梯度洗脱程序；所述质谱的条件为：电喷雾离子源；正离子扫描；多反应监测；离子源温度650℃；离子源电压5500V；所述禁限用过敏原香精物质选自水杨酸苄酯、α-异甲基紫罗兰酮、α-戊基肉桂醛、β-香茅醇、肉桂酸苄酯、2-辛炔酸甲酯、α-戊基肉桂醇、香叶醇、苯甲醇、新铃兰醛、芳樟醇、金合欢醇、肉桂醛、香豆素、α-己基肉桂醛、丁香酚、苯甲酸苄基酯、异丁香酚、铃兰醛、肉桂醇、茴香醇、柠檬醛、α-香芹烯或羟基香茅醛。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱程序为：0～6.0min，10％A～90％A；6.0～8.0min，保持90％A；8.0～8.1min，90％A～10％A；8.1～13.0min，保持10％A。3.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：王玉健，徐莉，庞道标，梁振纲，
申请(专利权)人：海南出入境检验检疫局检验检疫技术中心，
类型：发明
国别省市：海南,46