包含神经前体细胞或其分泌蛋白质组作为有效成分的治疗缺血性疾病或神经炎症性疾病的组合物制造技术

本发明专利技术提供治疗缺血性疾病或神经炎症性疾病的组合物。在本发明专利技术所利用的多聚唾液酸神经细胞粘附分子‑阳性神经前体细胞用于促进被注射的组织中的血管生成以及抑制炎症反应。可利用抗多聚唾液酸神经细胞粘附分子‑抗体简单地分离上述多聚唾液酸神经细胞粘附分子‑阳性神经前体细胞，并且相对于间充质干细胞，呈现更优秀的血管生成及验证抑制活性，从而可有用地用作针对因血管损伤而引起的缺血性疾病及因炎症而引起的神经损伤疾病的有效的治疗组合物。并且，本发明专利技术的神经前体细胞的分泌蛋白质组不仅减少缺血性损伤部位，还恢复神经功能，因而还可用作针对因缺血性疾病和炎症而引起的神经损伤疾病等的退行性神经系统疾病的治疗剂。

A composition comprising a precursor cell or a secreted proteome thereof as an effective component in the treatment of ischemic diseases or inflammatory diseases

The present invention provides compositions for the treatment of ischemic diseases or inflammatory diseases. In polysialic acid neural cell adhesion molecule positive neural precursor cells to promote angiogenesis by injection of tissue and inhibit the inflammatory reaction by using the invention. Can the use of anti polysialic acid neural cell adhesion molecule antibody simple separation of the polysialic acid neural cell adhesion molecule positive neural precursor cells, and the mesenchymal stem cells showed angiogenesis and verification better inhibitory activity, which can be useful for treatment of ischemic diseases caused by effective composition because of vascular injury and inflammation caused by the disease for nerve injury. Moreover, the invention of the secreted proteins of neural precursor cells not only reduce ischemic injury, restore nerve function, so it can be used as a therapeutic agent for ischemic diseases caused by inflammation and nerve injury disease and other degenerative disease of the nervous system.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】包含神经前体细胞或其分泌蛋白质组作为有效成分的治疗缺血性疾病或神经炎症性疾病的组合物
本专利技术涉及神经前体细胞或包含其分泌蛋白质组(Secretome)作为有效成分的治疗缺血性疾病或神经炎症性疾病的组合物。
技术介绍
干细胞因其多分化能而被视为多种疾病的有希望的治疗候选物质。例如，间充质干细胞(mesenchymalstemcells，MSCs)具有可容易地获得及分离、促进血管生成、抑制炎症的许多营养因子等特性(Caplan，A.I.，&Dennis，J.E.(2006).JournalofCellularBiochemistry，98，1076-1084)。间充质干细胞的这些特性被适用于治疗人类疾病的研究中。根据最近的研究，间充质干细胞在许多动物模型及人体临床治疗(Chen，J.，Li，Y.，Katakowski，M.，etal.(2003).JournalofNeuroscienceResearch，73，778-786；Kopen，G.C.，Prockop，D.J.，&Phinney，D.G.(1999).ProceedingsoftheNationalAcademyofSciences，96，10711-10716)中起到组织恢复的作用。在一些报道中提及了间充质干细胞在体外分化为包括神经细胞(Bae，K.S.，Park，J.B.，Kim，H.S.，Kim，D.S.，Park，D.J.，&Kang，S.J.(2011).YonseiMedicalJournal，52，401-412)及星形胶质细胞(astrocyte)(Kopen，G.C.，Prockop，D.J.，&Phinney，D.G.(1999).ProceedingsoftheNationalAcademyofSciences，96，10711-10716)的神经系列的分化能力，但未提及这些被分化的细胞在体内起到哪些功能的明确证据。间充质干细胞的有益的效果为上述间充质干细胞被旁分泌(paracrine)机制诱导，而不是细胞替代，由此，间充质干细胞的移植(transplantation)可具有临时且有限的效果，而不是长时间持续的改善(Cho，S.R.，Kim，Y.R.，Kang，H.S.，etal.(2009).CellTransplantion，18，1359-1368)。相反地，胚胎干细胞(embryonicstemcells，ESCs)可分化为来源于3个胚芽层(embryonicgermlayer)的所有特定细胞形态，并且具有强大的自我再生能力。值得注意的是，来源于胚胎干细胞的神经前体细胞(neuralprecursorcells，NPCs)优选分化为包括神经细胞、星形胶质细胞及少突胶质细胞(oligodendrocyte)的神经系列的特定形态的细胞，因此可视为用于脑组织恢复的细胞源(cellsource)。这些细胞还分泌促进内源性神经前体细胞的生存及增殖的一些因子(Capone，C.，Frigerio，S.，Fumagalli，S.，etal.(2007).PLoSOne，7，e373)。但是，仍然未提及分化于胚胎干细胞的神经前体细胞或者神经前体细胞的培养液在完成疾病模型移植后如何起到改善功能的作用的内容。在本说明书全文中，参照了多篇论文及专利文献，并表示了其引用。所引用的论文及专利文献的公开内容全部引入本说明书作为参照，从而更加明确说明本专利技术所属
的水平及本专利技术的内容。
技术实现思路
技术问题本专利技术者为了开发缺血性疾病或神经炎症性疾病的根本的治疗方法而进行了深入研究。其结果，当向病变部位注射在表面表达作为神经粘附分子的多聚唾液酸神经细胞粘附分子(PSA-NCAM，poly-sialylatedneuralcelladhesionmolecule)的神经前体细胞时，促进血管的新生以及抑制炎症反应，从而可有效地治疗因血管损伤而产生的缺血性疾病及因炎症而产生的神经组织的损伤，由此完成了本专利技术。因此，作为不同于干细胞移植的实施方式，通过给药至神经前体细胞分泌蛋白质组的病变部位来减少缺血性损伤部位并恢复神经功能，从而可有效地治疗缺血性疾病和因炎症而产生的神经损伤疾病等的退行性神经系统疾病，由此完成了本专利技术。并且，本专利技术的目的在于，提供治疗缺血性疾病或神经炎症性疾病的组合物。本专利技术的再一目的在于，提供缺血性疾病或神经炎症性疾病的治疗方法。根据如下的专利技术的详细说明、权利要求及附图可进一步明确本专利技术的还有一目的及优点。解决问题的方案根据本专利技术的一实施方式，本专利技术提供包含多聚唾液酸神经细胞粘附分子-阳性神经前体细胞作为有效成分的治疗缺血性疾病或神经炎症性疾病的组合物。根据本专利技术的再一实施方式，本专利技术提供包括向所需的个体给药包含多聚唾液酸神经细胞粘附分子-阳性神经前体细胞作为有效成分的组合物的步骤的缺血性疾病或神经炎症性疾病的治疗方法。根据本专利技术，本专利技术的组合物在患有缺血性疾病或神经炎症性疾病的个体恢复缺血性组织的血管或者抑制炎症反应，从而起到抑制上述症状的发展或者去除或减轻上述症状的作用。并且，本专利技术的组合物因其本身的特性还可作为缺血性疾病或神经炎症性疾病的治疗组合物，并且还可以与其它抗缺血/抗炎症组合物同时给药而作为针对这些疾病的治疗辅助剂。在此，在本说明书使用的术语“治疗”或“治疗剂”包括“治疗辅助”或“治疗辅助剂”的意识。根据本专利技术，本专利技术的组合物显著增加作为血管生成诱发因子的促血管生成素-1(angiopoietin-1)的表达，并且大大提高给药(或移植)部位的血管数量及微血管浓度。并且，本专利技术的组合物因血管组织的消失、血管生成的缺乏或不正常血管的形成等而产生的血流量减少的个体中恢复血管组织或者增加血管的数量，从而可用作恢复血流量的有效的缺血性疾病治疗组合物。根据本专利技术，本专利技术的组合物抑制所给药(或移植)的神经组织中的反应性小胶质细胞及星形胶质细胞地活性化。小胶质细胞(microglia)作为在中枢神经系统执行第一性免疫功能的细胞，与正常状态的小胶质细胞不同地，被活性化的小胶质细胞积极地进行吞噬作用，并且实现细胞增殖，而且通过表达TNF-α、IL-1β及IL-6等的细胞因子、趋化因子、诱生型一氧化氮合酶(iNOS，induciblenitricoxidesynthase)、环氧合酶-2(COX-2，cyclooxygenase-2)等的遗传基因来生成炎症介质物质。被活性化的星形胶质细胞也分泌作为炎症性细胞因子的IL-6、TGF-β、LIF及IL-1，所分泌的这些细胞因子重新使小胶质细胞及星形胶质细胞活性化，从而恶化组织内环境。并且，用于抑制小胶质细胞及星形胶质细胞的活性化的本专利技术的组合物可有效地防止因炎症反应而引起的神经组织的损伤。根据本专利技术的一实例，本专利技术的治疗缺血性疾病或神经炎症性疾病的组合物用于增加促血管生成素-1的表达。在本说明书所使用的术语“表达的增加”是指不同于正常状态以能够检测出的程度显著增加遗传基因或蛋白质的表达，更具体地，不同于对照组，表达量称为130％以上。根据本专利技术发热一实例，本专利技术的治疗缺血性疾病或神经炎症性疾病的组合物用于抑制胶质细胞(glialcell)或星形胶质本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗缺血性疾病或神经炎症性疾病的组合物，其特征在于，包含多聚唾液酸神经细胞粘附分子‑阳性神经前体细胞作为有效成分。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.06.27 KR 10-2014-00800091.一种治疗缺血性疾病或神经炎症性疾病的组合物，其特征在于，包含多聚唾液酸神经细胞粘附分子-阳性神经前体细胞作为有效成分。2.根据权利要求1所述的治疗缺血性疾病或神经炎症性疾病的组合物，其特征在于，上述治疗缺血性疾病或神经炎症性疾病的组合物用于增加促血管生成素-1的表达。3.根据权利要求1所述的治疗缺血性疾病或神经炎症性疾病的组合物，其特征在于，上述治疗缺血性疾病或神经炎症性疾病的组合物用于抑制胶质细胞或星形胶质细胞的活性化。4.根据权利要求3所述的治疗缺血性疾病或神经炎症性疾病的组合物，其特征在于，上述治疗缺血性疾病或神经炎症性疾病的组合物用于减少CD68或胶质纤维酸性蛋白的表达。5.根据权利要求1所述的治疗缺血性疾病或神经炎症性疾病的组合物，其特征在于，上述多聚唾液酸神经细胞粘附分子-阳性神经前体细胞从神经丛分离，上述神经丛从全能干细胞分化。6.一种治疗缺血性疾病或神经炎症性疾病的组合物，其特征在于，包含神经前体细胞的分泌蛋白质组作为有效成分。7.根据权利要求6所述的治疗缺血性疾病或神经炎症性疾病的组合物，其特征在于，上述神经前体细胞从全能干细胞分化。8.根据权利要求6所述的治疗缺血性疾病或神经炎症性疾病的组合物，其特征在于，上述神经前体细胞为从全能干细胞分化的神经丛步骤中的神经前体细胞。9.根据权利要求6所述的治疗缺血性疾病或神经炎症性疾病的组合物，其特征在于，上述神经前体细胞为多聚唾液酸神经细胞粘附分子-阳性神经前体细胞。10.根据权利要求6所述的治疗缺血性疾病或神经炎症性疾病的组合物，其特征在于，上述神经前体细胞为多聚唾液酸神经细胞粘附分子-阴性神经前体细胞。11.根据权利要求6所述的治疗缺血性疾病或神经炎症性疾病的组合物，其特征在于，在动物细胞培养基中培养神经前体细胞来获得的细胞培养液中含有上述分泌蛋白质组。12.根据权利要求11所述的治疗缺血性疾病或神经炎症性疾病的组合物，其特征在于，在包含胰岛素/转铁蛋白/硒和碱性成纤维细胞生长因子的无血清动物细胞培养基中培养神经前体细胞后，去除细胞来获得上述细胞培养液。13.根据权利要求6所述的治疗缺血性疾病或神经炎症性疾病的组合物，其特征在于，上述分泌蛋白质组包括如下的蛋白质：聚集蛋白、膜联蛋白A5、基础免疫球蛋白、二聚糖、钙调蛋白-3、类共激活蛋白、丝切蛋白-1、胶原蛋白α-2、滞蛋白-3、消去蛋白、营养不良蛋白聚糖、肝配蛋白...

【专利技术属性】
技术研发人员：金东旭，金汉洙，
申请(专利权)人：S生物医药公司，
类型：发明
国别省市：韩国,KR