本发明专利技术涉及使用免疫毒素预防或治疗头颈鳞状上皮细胞癌及膀胱癌的方法，此免疫毒素包括：（ａ）结合癌细胞上一种蛋白的配体，连接于（ｂ）；（ｂ）对癌细胞具有细胞毒性作用的毒素。在本发明专利技术具体的实施方案中，使用ＶＢ４－８４５预防或治疗头颈鳞状上皮细胞癌及膀胱癌，ＶＢ４－８４５是一种重组免疫毒素，含有人源化、ＭＯＣ３１衍生的单链抗体片段，此片段与截断型假单胞菌外毒素Ａ融合。本发明专利技术还包括预防或治疗癌症的联合治疗方法，其中包括减少化学治疗药物的使用剂量。本发明专利技术还包括为预防或治疗癌症直接将重组免疫毒素导入癌瘤的配方及方法。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及对患有癌症或有患癌风险的病人施予一种免疫毒素以预防或治疗癌症的方法，此免疫毒素可以结合选择性表达于癌细胞表面的抗原。
技术介绍
最近，免疫治疗方法已经显现为一种潜在有效的抗癌新方法。鼠源和人源化/嵌合抗体及各自的抗体片段定向攻击肿瘤相关抗原(TAAs)的方法已经用于某些人类癌症的诊断及治疗5-13。这些抗体的非偶联形式、偶联毒素形式及放射标记形式已经用于此类治疗。与免疫治疗有关的一种肿瘤相关抗原是Ep-CAM(上皮细胞粘附分子，已知的有17-1A、KSA、EGP-2及GA733-2)。Ep-CAM是一种在许多实体肿瘤，包括肺癌、乳腺癌、卵巢癌、结肠直肠癌及头颈部鳞状细胞癌中高表达的跨膜蛋白，但在大多数正常上皮组织表达量很少，Ep-CAM在癌瘤形成中的作用仍不清楚，但其表达与细胞增生率相关。Ep-CAM特异性抗体已经用于反映及检测小细胞肺癌和非小细胞肺癌病人的原发性肿瘤及其转移瘤。抗Ep-CAM的单克隆抗体中鼠源单克隆抗体PANOREX(也称为依决可单抗)在德国已经被批准用于结肠癌的治疗，在美国处于临床试验阶段14-15。然而，众人瞩目的PNOREX治疗伴有不良副反应，包括腹部痛性痉挛、恶心、短暂腹泻及皮肤荨麻疹损伤39-41，57。其它Ep-CAM靶向抗体的临床试验不很成功，抗体BIS-1治疗伴有外周血管收缩、呼吸困难及发烧，抗体3622W94治疗伴有急性坏死性胰腺炎36-38。探索有效、低毒性的抗Ep-CAM抗体仍在继续，已有报道完全人源化的抗Ep-CAM抗体M-T201，通过抗体依赖的细胞介导的细胞毒性(“ADCC”)而发挥作用58。衍生于鼠源单克隆抗体MOC31的人源化、稳定的单链抗Ep-CAM抗体4D5MOC-B也已经开发，在2000年4月10日及2000年10月19日公布的国际专利申请PCT/EPOO/03176(公开号No.WO 00/61635)及Willuda等59中有所描述。这些公开的治疗方法未揭露人源化抗体在治疗头颈鳞状上皮细胞癌(HNSCC)及膀胱癌中的使用。如上所述，与Ep-CAM表达增加相关的癌症之一是头颈鳞状上皮细胞癌(“HNSCC”)，Ep-CAM表达与人类头颈鳞状上皮细胞癌的发展有关。头颈鳞状上皮细胞癌在目前世界上最常见的癌症中位居第六。头颈鳞状上皮细胞癌可以引起严重的病症，尤其是语言和吞咽功能的异常。手术、放射治疗、化学药物治疗、或者这些方法的结合通常作为治疗方法的选择。尽管所有方法试图治愈患头颈鳞状上皮细胞癌的病人，但复发仍然是头颈部癌症治疗失败(40％-50％的病人)的最常见原因。补救治疗包括与一线治疗相同的治疗方法。然而，姑息手术常常是困难的而且会毁损面容。另外，放射治疗很少可行或有益，化学药物治疗基本上不会实质改善头颈鳞状上皮细胞癌病人存活率。这些病人的预后仍旧很差，复发后的生存中值仅为大约六个月。由于头颈鳞状上皮细胞癌病人预后不良，疾病对生活质量的影响及有限的治疗方法选择，人们对新型肿瘤特异性治疗方法的研制尤其是针对头颈鳞状上皮细胞癌的方法有很大兴趣，而且是迫切需要。膀胱癌是世界第七大最常见癌症，估计每年产生260,000新病例。在欧洲，每年导致大约50,000人死亡。膀胱组织癌几乎完全作为移行细胞癌在移行上皮细胞，排列于膀胱组织表层发生。在初次诊断中，70％-90％的膀胱癌病人具有泌尿道上皮表层癌的浅表病变，为非侵入性且呈乳头状瘤(指状突起)。目前的治疗包括血管内化学药物治疗，及接种卡介苗(BCG)的免疫治疗，其可以引起全身感染结核杆菌的危险。尽管使用攻击治疗方法，这些浅表乳头状瘤中的70％会在延长的临床病程中复发，导致严重的病症，大约4-8％会发展成侵袭性癌。为满足此医学需求，需要研制新型肿瘤特异性治疗方法，其中一种新方法是使用免疫毒素的靶向治疗方法抗体与毒素交联，抗体特异性结合肿瘤细胞并释放能有效杀伤肿瘤细胞的毒素。
技术实现思路
本专利技术涉及治疗头颈鳞状上皮细胞癌及膀胱癌的新方法，通过给予需要此种治疗的病人施予有效药量、可以特异结合(因此是“靶向”)癌细胞表面一种蛋白的重组免疫毒素。如需要，免疫毒素可以与一种或多种其它抗癌治疗剂联合给药，同时给药和/或顺序给药，和/或与放射治疗或手术联合。本专利技术还涉及预防癌症发生、复发或降低其复发率的方法，包括直接将有效药量的免疫毒素导向疑有癌症发生或复发的部位。本专利技术还涉及降低手术后并发症危险的方法，包括在癌症手术之前、手术中、和/或手术后直接将有效药量的免疫毒素用于手术部位。本专利技术还涉及使肿瘤或癌症对另一种癌症治疗剂敏感的方法，该方法包括使用有效药量免疫毒素，其它癌症治疗剂可以是在给予免疫毒素之前、重叠、同时，和/或之后给予。本专利技术治疗方法所使用的免疫毒素包括(a)结合癌细胞上一种蛋白的配体，连接于(b)；(b)对癌细胞具有细胞毒性作用的毒素。癌细胞结合部分(a)可以例如通过化学连接或遗传连接与毒素部分(b)偶联。在具体的非限制性实施方案中，配体结合Ep-CAM，在一个具体的非限制性实施方案中，配体是抗体或抗体片段。从下列详细描述中本专利技术其它特点及优点将显而易见。然而，应该清楚，从此详细描述本专利技术精神和范围的各种变化和修改将为本领域技术人员所熟悉，表现本专利技术优先方案的详细描述及具体的实施例仅通过举例说明的方法给出。附图说明本专利技术现以下列图例描述图1向肿瘤块免疫毒素和/或其它癌症治疗剂瘤内给药示意图。图2.(A)VB4-845图。本图描述免疫毒素的4D5MOC scFV和ET-A252-608部分及可变区连接的结构，包括组氨酸标签，PelB信号，连接子区，VL和V-H区，ETA的II、Ib和III区，及内质网(ER)滞留信号。(B)预测的4D5MOCB-ETA三维模型，显示了scFV(VL和VH)，ETA252-608(II、Ib和III结构域)，连接肽及两个组氨酸标签的结构。图3A-D及SEQ ID NOS1和2显示了VB4-845的DNA和氨基酸序列。核苷酸及多肽序列可以划分为以下几个结构域包括胞质表达的信号序列，组氨酸标签，CDR1区，CDR2区，CDR3区，VL区，VH区，连接子区，ETA的结构域II区、Ib区和III区，及内质网(ER)滞留信号KDEL。图4.VB4-845对人类肿瘤异种移植物的抗肿瘤作用53。对于负荷Ep-CAM阳性肿瘤异种移植物(HT29、SW2、CAL27)或阴性对照(COLO320(o))的裸鼠每隔一日给予VB4-8455ug(给药9次(■))或10ug(给药3次(▲))静脉治疗。肿瘤大小相对于初始的中值肿瘤大小160mm3给出。图5.对于负荷CAL27肿瘤异种移植物裸鼠的肿瘤周围给药治疗。肿瘤周围途径给予负荷Ep-CAM阳性的CAL27肿瘤异种移植物的裸鼠VB4-845，隔日一次(周一/周三/周五)，每次5ug(给药9次)。肿瘤大小相对于初始的中值肿瘤大小给出。图6.VB4-845(4D5MOCB-ETA)治疗后的肝功能测定。为了进行比较，也显示了SchUmann等55-56所描述的以单次致死剂量(85ug/kg)野生型ETA治疗的小鼠转氨酶活性。数据以均数±标准差(n＝3)来表示。图7.VB4-845诱发的肝脏和脾脏组织病理学结果。圆圈表明20ug剂量本文档来自技高网...
【技术保护点】
有效量的免疫毒素在制备治疗或预防头颈鳞状上皮细胞癌或膀胱癌药剂的用途，其中所述免疫毒素包括：（ａ）结合癌细胞上一种蛋白的配体，连接于（ｂ），（ｂ）对癌细胞具有细胞毒性作用的毒素。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：乌维赞格梅思特维特克，克劳迪尔迪保罗，道尔尼克克里斯丁丘迪，尼古拉斯罗纳德格罗沃，迪米特彼得费塞尔罗斯，
申请(专利权)人：苏黎世大学，
类型：发明
国别省市：CH[瑞士]
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