一种利用超临界CO制造技术

本发明专利技术提供一种利用超临界CO

A supercritical CO

The invention provides a method for utilizing supercritical CO

【技术实现步骤摘要】
一种利用超临界CO2提取红花杜鹃叶中活性成分的方法
本专利技术属于天然产物分离
，具体涉及一种利用超临界CO2提取红花杜鹃叶中活性成分的方法。
技术介绍
杜鹃花科植物分布广，品种多，其活性成分种类多，活性高，用途广，具有广阔的开发前景。目前，研究表明杜鹃属植物化学主要成分为土荆芥油素、异土荆芥油素、槲皮素、山奈素、金丝桃甙、红色素、谷甾醇等。杜鹃花科植物活性成分有良好的抗菌消炎作用，如秀丽杜鹃、汶川杜鹃、矮枇杷的抗菌作用就强于或相当于黄莲。但近年来，其作为神经药理学基质而更受重视。杜鹃花属中很多种类的活性成分已被研究，如黄毛杜鹃、日本杜鹃等。目前已从黄杜鹃中分离并鉴定出结构的活性成分有8种：分别是闹羊花素-Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ，Rhodomollein-Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ，Kalmanol和Grayanotoxin-Ⅲ。此外，还含有浸木毒素、石楠素、杜鹃花毒素、司帕拉沙酚、马醉木毒素等。JamesA.Klock等从黄杜鹃提取到的化学成分作为心血管药的治疗；Yoshiki等从兴安杜鹃中提取出2种新的色原烷衍生物1和色原烷衍生物2，另一种化合物色原烯3具有潜在的抗艾滋病病毒活性；钟国华等以黄杜鹃作为麻醉剂，治疗温疟，有显著的减慢心率和降低血压作用。从华丽杜鹃叶分离的杜鹃素和Matleucinal能影响视觉。映山红的嫩叶是“红桃合剂”的主要成分，对慢性支气管炎有良好疗效，满山红、紫花杜鹃都有止咳化痰的功效。从大红花杜鹃叶叶中分离得到的木藜芦毒素在低剂量(1～100μg/kg)时有明显降压作用，还能诱发动物的传入神经、迷走神经、肌神经、颈神经、颈动脉神经和皮质神经产生强烈的突发效应，证明是一种高强度的肌兴奋剂。另外，杜鹃花科植物中的黄杜鹃药液喷雾防治桑蟥、灌施防治地下害虫、浸渍处理蚜虫效果良好，熏蒸家蝇，致死时间与除虫菊粉相同，苏醒时间比除虫菊粉长，苏醒百分率比除虫菊粉低。据不完全统计，黄杜鹃对豆平蝽、甘蔗绵蚜、苎麻黄蛱蝶、菜粉蝶、稻瘿蚊、稻蝗、稻苞虫、负泥虫、叶蝉、甘薯金花虫、红蜘蛛等10科50余种重要经济害虫毒杀效果良好，因此，曾作为土农药在黄杜鹃产区广泛应用。杜鹃花科植物中还有很多植物亟待研究开发，其活性成分更是天然药用学科的热点研究课题。目前，尚未见采用超临界CO2提取红花杜鹃叶活性成分的报道，也未见有相关专利。本专利技术以红花杜鹃叶为提取原料，利用超临界CO2萃取方法进行生物活性成分的提取分离，其操作简便、方法简单、提取效率高等特点。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是克服现有的缺陷，提供了一种提取率高、能耗低、操作简便的红花杜鹃叶中生物活性成分的新提取方法。本专利技术提供一种利用超临界CO2提取红花杜鹃叶中活性成分的方法，是将红花杜鹃叶粉碎后放入萃取釜中，以CO2流体为萃取剂，在萃取压力15-20MPa、萃取温度为35-45℃、萃取时间为1.5-2.5h下进行萃取，得到淡黄色的活性成分的提取物。作为优选，所述红花杜鹃叶在自然条件下户外晾干再粉碎。作为优选，将红花杜鹃叶粉碎后过200目筛。作为优选，所述萃取压力为20MPa、萃取温度为40℃、萃取时间为2.5h。作为优选，将提取物采用气相色谱-质谱联用技术进行测定，检测条件为：进样口温度：270℃，升温程序：60℃，以10℃/min速率升至280℃，保持5min，以5℃/min速率升至290℃，保持3min，分流进样，分流比：20:1，载气：高纯氦气，纯度≥99.999%，流速1.0mL/min；进样量：1μL。本专利技术具有以下有益效果：超临界CO2萃取法是用无毒、无残留的超临界CO2代替水或有机溶剂作提取溶剂，不仅可以在接近室温的条件下萃取，而且可以实现高选择性提取和分离，从而获得高质量的产品。并且超临界CO2提取不会产生三废，对环境保护极为有利，提取材料CO2价廉易得，可循环使用，生产成本较低。应用本专利技术的方法对开花期采摘的红花杜鹃叶中进行提取，生物活性成分提取效率高，提取速度快，提取分离获得的化合物的种类多（达23种）；工艺简单，节省试剂，耗能少，成本低，污染少，优于其它采用传统提取技术的提取方法。附图说明附图用来提供对本专利技术的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本专利技术的实施例一起用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的限制。在附图中：图1为红花杜鹃叶GC/MS化学成分分析图谱。具体实施方式以下的实施例便于更好地理解本专利技术，但并不限定本专利技术。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为市售。实施例11、材料及方法1.1仪器与试剂材料安捷伦气相质谱仪(Agilent6890-5973GC/MS)；红花杜鹃叶采摘自西藏自治区，于开花期采摘；氯仿等化学试剂均为色谱纯。1.2提取方法1.2.1红花杜鹃叶原料处理将采摘的红花杜鹃叶自然条件下户外晾干，粉碎后过200目筛，备用。在自然条件下户外晾干的好处是：目的是让红花杜鹃叶的水分在自然环境温度下缓慢蒸发掉所含水分，而不破坏其组织结构或丢失其它所含化学成分。选择该粉碎粒径的目的是：一方面是尽量不破坏红花杜鹃叶的组织结构，另一方面是在这个粒度条件下更加便于萃取。1.2.2活性成分提取精密称取4.3g-5.6g粉碎后的红花杜鹃叶于萃取釜中，以CO2流体为萃取剂，在不同萃取压力、萃取温度和萃取时间下进行提取，从接样口收集到0.00554g-0.00974g淡黄色提取物，用氯仿溶解。1.2.3样品检测条件进样口温度：270℃，升温程序：60℃，以10℃/min速率升至280℃，保持5min，以5℃/min速率升至290℃，保持3min，分流进样，分流比：20:1，载气：高纯氦气，纯度≥99.999%，流速1.0mL/min。进样量：1μL。2.试验结果2.1提取率影响条件的优化结果选用了对总提取率有主要影响的3个因素（萃取压力Mpa、萃取温度℃、萃取时间h）考虑三个水平，以L9(33)正交表进行试验影响因素优化。优化结果见表1、表2、表3。表1L9(33)正交试验影响因素水平表表2L9(33)正交试验结果表3L9(33)正交试验方差分析在实验范围内，考虑提取生产成本，最佳提取条件是A3B2C1，即开花期红花杜鹃叶粉碎为200目、萃取压力20MPa、萃取温度为40℃、反应时间2.5h为最佳提取条件。2.2GC/MS检测结果分析将应用上述最优提取条件（即红花杜鹃叶粉碎为200目、萃取压力20MPa、萃取温度为40℃、反应时间2.5h）提取的红花杜鹃叶活性成分采用气相色谱-质谱联用技术进行测定，具体参见图1，共检测分离出23种含量较高的化合物；经与质谱谱图数据库比对，初步鉴定主要为烷烃（39.54%）、酯（26.94%）、烯（24.48%）、酰胺类（8.78%）等化合物。实施例1本专利技术的提取红花杜鹃叶中生物活性成分的方法如下：（1）将采摘的红花杜鹃叶在自然条件下户外晾干，粉碎后过200目筛；（2）称取4.9g红花杜鹃叶粉体放入萃取釜中，以CO2流体为萃取剂，萃取压力20MPa、萃取温度为40℃、萃取时间为2.5h，得到0.00974g淡黄色的活性成分提取物。实施例2本专利技术的提取红花杜鹃叶中生物活性成分的方法如下：（1）将采摘的红花杜鹃叶在自然条件下户外晾干，粉碎后过200目筛；（2）本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用超临界CO

【技术特征摘要】
1.一种利用超临界CO2提取红花杜鹃叶中活性成分的方法，其特征在于：是将红花杜鹃叶粉碎后放入萃取釜中，以CO2流体为萃取剂，在萃取压力15-20MPa、萃取温度为35-45℃、萃取时间为1.5-2.5h下进行萃取，得到淡黄色的活性成分的提取物。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述红花杜鹃叶在自然条件下户外晾干再粉碎。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：将红花杜鹃叶粉碎后过200目筛。4.根据权利要求1所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：拉巴次旦，班旦，郝宝成，梁剑平，吴金措姆，四郎玉珍，袁振杰，格桑卓嘎，陶蕾，
申请(专利权)人：西藏自治区农牧科学院畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：西藏,54