一种诱导2型糖尿病灵长类动物动物模型的高糖高脂半流质膳食及其诱导方法技术

本发明专利技术公开了一种诱导2型糖尿病灵长类动物动物模型的高糖高脂半流质膳食及其诱导方法。按质量比将蔗糖、猪油、胆固醇、胆酸盐＝5～15:5～15:0.5～1.5:0.1～1.0进行混合，加热搅拌均匀乳化制备成半流质状膳食，即为诱导2型糖尿病灵长类动物动物模型的高糖高脂半流质膳食。本发明专利技术可以量化每个动物每天摄入高糖高脂的数量，并且无口感变化造成动物摄入量不足的担忧，能定时定量的摄入高糖高脂，从而大大加快了2型糖尿病模型的发病进程。本发明专利技术制作的2型糖尿病灵长类动物模型具有啮齿动物、化学药物诱发的猴糖尿病模型无法比拟的优势，可用于各种类型降糖类药物(特别是生物技术类抗糖尿病药物)的研发及评价。

High sugar, high fat and semi liquid diet for inducing primate type 2 diabetes primate model and method for inducing the same

The invention discloses a high sugar, high fat and semi liquid diet for inducing type 2 diabetes primate animal model and a method for inducing the same. According to the mass ratio of cane sugar, lard, cholesterol, bile salt = 5 ~ 15:5 ~ 15:0.5 ~ 1.5:0.1 ~ 1 are mixed, heated and stirred uniformly emulsion prepared by semi liquid diet, high-fat diet semiliquid is induced by type 2 diabetes primate animal model. The invention can quantify each animal daily intake amount of sugar and fat, and no taste changes caused by animal intake concerns to quantitative timing intake of high glucose and fat, thus greatly accelerating the progression of type 2 diabetes model. The monkey model of diabetes mellitus type 2 diabetes primate animal models produced by the invention has rodents, chemically induced the incomparable advantages, can be used for various types of hypoglycemic drugs (especially biotechnology anti diabetic drug development and evaluation).

【技术实现步骤摘要】
一种诱导2型糖尿病灵长类动物动物模型的高糖高脂半流质膳食及其诱导方法
：本专利技术属于糖尿病研究领域，具体涉及一种诱导2型糖尿病灵长类动物动物模型的高糖高脂半流质膳食及其诱导方法。
技术介绍
：随着人类生活水平的提供，糖尿病的发病率也越来越高，糖尿病及其并发症已经成为威胁人类健康的一类重要疾病。因为糖尿病的发病率居高不下，所以降糖药的研发一直是药物研发中的热点，而降糖药物的研发离不开良好的动物疾病模型。目前用于降糖药研发的动物疾病模型主要有转基因疾病模型和发化学法诱导的高血糖动物模型，转基因动物模型如小鼠糖尿病模型(db/db、KK小鼠等)、大鼠糖尿病模型(GK、ZDF大鼠等)。化学药物(四氧嘧啶、链脲佐菌素)诱导的高血糖模型包括单独诱发和/或配合高脂饲料诱发的小鼠、大鼠、猴糖尿病模型。由于人类糖尿病的成因多数与饮食不节(与生活条件提高后高糖、高脂大量摄入有关)有关，但上述模型多数为啮齿类动物疾病模型，虽然与人类的同源性较高，但其疾病形成原因以及基因组与人类还是存在较大差异，在生物技术药物迅猛发展的今天，由于药物的特异性(如生物药有动物种属的选择特异性)上述模型已经不能满足药物研发的需求。啮齿类疾病动物模型的应用领域正逐渐转向降糖药物的筛选方面。而化学药物诱发的灵长类动物糖尿病模型是成因也与人类糖尿病成因具有明显的差别，如人类2型糖尿病患者多数伴有胰岛素抵抗、高胰岛素血症等特点，而化学药物诱发的灵长类动物糖尿病模型无上述该特征，其成因为化学药物损伤胰岛细胞后导致的胰岛素绝对不足。因此，建立与人类糖尿病发病相似的灵长类动物模型对新型降糖药物的研发具有非常重要的意义。高糖高脂膳食，指的是通过人工的行为，将人类饮食结构中最常见的糖类和脂肪按一定比例混合所得的混合物。通过高糖高脂饲料诱发灵长类动物糖尿病模型已有报道，但其制作方法为将高糖高脂加入到猴饲料中，猴通过摄入饲料而将高糖高脂成分摄入体内，日久成模。该法的不足之处为未充分考虑到灵长类动物喜爱用饲料玩耍的生活习性，饲养过程中，多数的饲料被其玩耍丢弃而浪费，不能准确的计算每个动物每天摄入高糖高脂的数量，无法量化。且由于饲料含热量较高、油腻感强，且饲料本身的口感发生了较大的变化，动物在摄入一定量的饲料后会有饱涨感，出于自我保护的作用，动物会停止摄入更大量的高糖高脂饲料，导致高糖高脂的摄入量会相对减少，从而使得造模时间大大延长。
技术实现思路
：本专利技术的第一个目的是提供一种能量化、快速诱导出2型糖尿病灵长类动物动物模型的高糖高脂半流质膳食。本专利技术的诱导2型糖尿病灵长类动物动物模型的高糖高脂半流质膳食，其特征在于，是通过以下方法制备的：按质量比将蔗糖、猪油、胆固醇、胆酸盐＝5～15:5～15:0.5～1.5:0.1～1.0进行混合，加热搅拌均匀乳化制备成半流质状膳食，即为诱导2型糖尿病灵长类动物动物模型的高糖高脂半流质膳食。按照各成分的最大质量比配制的高糖高脂其流动性已达极限，即再增加各成分的质量所配制的膳食将不具备流动特性，难以通过灌胃器具送达动物的胃部。按照低于各成分最小质量比配制的高糖高脂膳食流动性较好，长期将其灌胃给予灵长类动物理论上可复制2型糖尿病灵长类动物造模，但需要耗费的时间也将会明显延长。本专利技术的第二个目的是提供一种2型糖尿病灵长类动物的诱导方法，其特征在于，将上述诱导2型糖尿病灵长类动物模型的高糖高脂半流质膳食灌入灵长类动物胃部，诱导灵长类动物产生2型糖尿病，而得到2型糖尿病模型灵长类动物模型。优选，是将诱导2型糖尿病灵长类动物模型的高糖高脂半流质膳食按照9.2-17.2g/kg灵长类动物的体重的量通过鼻饲管灌胃给予，每天一次，每周6天，连续给予25个月。优选，所述的灵长类动物优选为食蟹猴。本专利技术的第三个目的是提供一种用于筛选和评价抗2型糖尿病类药物筛选和评价研究的方法，其特征在于，根据候选药物的特点，按照一定的剂量和频率给予上述2型糖尿病灵长类动物模型，根据效果评价候选药物是否具有抗2型糖尿病作用，从而为候选药物提供筛选和/或评价研究结果。本专利技术的诱导2型糖尿病灵长类动物模型的高糖高脂半流质膳食中使用的糖类和脂肪分别为人类日常生活中摄入量比较大的蔗糖、猪油、胆固醇和胆酸盐，将上述四种物质按一定的比例混合，制备成半流质膳食，将其通过鼻饲管将其灌入灵长类动物胃部，这样就可以使得灵长类动物按照体重、被动地按照一定的时间和频率精准的摄入上述高糖高脂混合物，模拟人类因物质生活条件提高而导致的饮食失节而产生的2型糖尿病。本专利技术可以量化每个动物每天摄入高糖高脂的数量，并且无口感变化造成动物摄入量不足的担忧，能定时定量的摄入高糖高脂，从而大大加快了2型糖尿病模型的发病进程。本专利技术制作的2型糖尿病灵长类动物模型具有啮齿动物、化学药物诱发的猴糖尿病模型无法比拟的优势，可用于各种类型降糖类药物(特别是生物技术类抗糖尿病药物)的研发及评价。具体实施方式：以下实施例是对本专利技术的进一步说明，而不是对本专利技术的限制。实施例1：1.实验材料1.1蔗糖：500g/瓶，分析纯，西陇化工。1.2猪油：15kg/桶，食品级，海南省鼎升食品有限公司。1.3胆固醇：500g/瓶，分析纯，上海博奥生物科技有限公司。1.4胆酸盐：500g/瓶，分析纯，天津市恒兴化学试剂制造有限公司。1.5葡萄糖：500g/瓶，分析纯，天津市北联精细化学品开发有限公司。1.6食蟹猴：3-7岁10只，8-20岁，26只雄性，普通级，从广东蓝岛生物技术有限公司购入。1.7胰岛素ELISA测定试剂盒，猴血浆/血清专用，从大连泛邦试剂有限公司购入，96T，原装进口。1.8胰高血糖素ELISA测定试剂盒，，猴血浆/血清专用，从大连泛邦试剂有限公司购入，96T，原装进口。1.9血糖测定试剂：浙江伊利康生物技术有限公司。1.10糖化血清白蛋白测定试剂：50T/48样，南京建成生物工程研究所。1.11胰岛素：诺华公司产品。2.主要仪器2.17020生化分析仪：7020型，日本日立公司。2.2糖化血红蛋白测定仪：NycoCardReaderII型，挪威NycoCard公司2.3血糖仪：强生公司产品。2.4分光光度计：722N型，上海菁华科技仪器有限公司。2.5恒速泵：SN-50C6型，深圳圣诺医疗设备有限公司。2.6酶标仪：ELX808型，美国伯腾仪器有限公司3.实验方法3.1半流质高糖高脂膳食的制备：蔗糖、猪油、胆固醇、胆酸盐按质量百分比为下述比例混合：蔗糖、猪油、胆固醇、胆酸盐＝5～15:5～15:0.5～1.5:0.1～1.0进行混合，加热至约70摄氏度，搅拌均匀乳化，即制备成半流质状膳食，即为本专利技术的诱导2型糖尿病灵长类动物横下的高糖高脂半流质膳食。3.2选取正常的8-20岁的雄性中老年食蟹猴26只，按体重随机分为5组，分别为高糖高脂组、高糖低脂组、低糖高脂组、低糖低脂组，每组6-7只，另外选用10只年龄为3-7岁的成年雄性猴，5只为阴性对照组，5只为高糖高脂成年组。高糖高脂组膳食质量比配方为：蔗糖、猪油、胆固醇、胆酸盐＝10：10：1：0.5，将各组份按其含量混合均匀，加热至约70摄氏度，搅拌均匀乳化即得，膳食给予量为17.2g/kg；高糖低脂组膳食质量比配方为：蔗糖、猪油、胆固醇、胆酸盐＝10：5：1：0.5，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种诱导2型糖尿病灵长类动物动物模型的高糖高脂半流质膳食，其特征在于，是通过以下方法制备的：按质量比将蔗糖、猪油、胆固醇、胆酸盐＝5～15:5～15:0.5～1.5:0.1～1.0进行混合，加热搅拌均匀乳化制备成半流质状膳食，即为诱导2型糖尿病灵长类动物动物模型的高糖高脂半流质膳食。

【技术特征摘要】
1.一种诱导2型糖尿病灵长类动物动物模型的高糖高脂半流质膳食，其特征在于，是通过以下方法制备的：按质量比将蔗糖、猪油、胆固醇、胆酸盐＝5～15:5～15:0.5～1.5:0.1～1.0进行混合，加热搅拌均匀乳化制备成半流质状膳食，即为诱导2型糖尿病灵长类动物动物模型的高糖高脂半流质膳食。2.一种2型糖尿病灵长类动物的诱导方法，其特征在于，将权利要求1所述的诱导2型糖尿病灵长类动物模型的高糖高脂半流质膳食灌入灵长类动物胃部，诱导灵长类动物产生2型糖尿病，而得到2型糖尿病模型灵长类动物模型。3.根据权利要求2所述的诱导方法，...

【专利技术属性】
技术研发人员：饶军华，肖百全，杨威，李比海，刘贻颜，徐世千，梁兴林，黄远铿，
申请(专利权)人：广东省生物资源应用研究所，
类型：发明
国别省市：广东,44