玛咖超临界CO2提取物中玛咖酰胺B含量的分析方法技术

本发明专利技术涉及玛咖超临界CO2提取物中玛咖酰胺B含量的分析方法，包括以下步骤：溶液的配制、标准线的绘制以及浓度计算。通过N‑苄基十六烷酰胺标准品溶液的浓度与峰面积，拟合出标准线，再根据标准线计算出玛咖超临界提取物中N‑苄基十六烷酰胺的含量。本发明专利技术的分析方法不仅精密度高、重复性好，而且稳定性优异，回收率高。另外，本发明专利技术所述液相色谱测试N‑苄基十六烷酰胺的峰面积，N‑苄基十六烷酰胺峰的分离度大，选择性好，灵敏度高。

Method for analysis of B content in Maca supercritical CO2 extract

The invention relates to a method for analyzing the content of B in the extract of Maca supercritical CO2, which comprises the following steps: the preparation of the solution, the drawing of the standard line and the calculation of the concentration. The concentration and peak area of N sixteen alkyl benzyl amide of standard solution, standard line fitting, according to the standard line to calculate the content of Maca in supercritical fluid extraction of N sixteen alkyl benzyl amide. The method of the invention has the advantages of high precision, good repeatability, high stability and high recovery rate. In addition, the peak area of N sixteen alkyl benzyl amide test the liquid chromatography of the invention, the N benzyl sixteen alkylamide peak separation degree, good selectivity, high sensitivity.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种玛咖酰胺B含量的分析方法，尤其涉及玛咖超临界CO2提取物中玛咖酰胺B含量的分析方法。
技术介绍
玛咖是十字花科独行菜属一年生或两年生草本植物。玛咖块根中含有丰富的营养物质及次生代谢产物。研究结果表明，玛咖具有抗疲劳、改善性功能、提高生育能力、减少前列腺增生、缓解更年期综合症、等多种功效，超临界CO2萃取能较好的富集玛咖酰胺。玛咖酰胺是玛咖中特有的功效成分，N-苄基十六烷酰胺是一种玛咖酰胺类成分，N-苄基十六烷酰胺又名玛咖酰胺B，N-苄基十六烷酰胺具有延长小鼠负重游泳时间、增强小鼠抗疲劳作用。然而，目前没有对玛咖提取物中N-苄基十六烷酰胺含量准确分析方法。
技术实现思路
针对上述背景中的问题，本专利技术提供一种准确性高的玛咖超临界CO2提取物中玛咖酰胺B含量的分析方法。本专利技术的目的将通过以下技术方案实现：玛咖超临界CO2提取物中玛咖酰胺B含量的分析方法，包括以下步骤：(1)溶液的配制：包括N-苄基十六烷酰胺标准品溶液和玛咖测试品溶液，N-苄基十六烷酰胺标准品溶液通过将N-苄基十六烷酰胺溶解在甲醇中制得，玛咖测试品溶液通过将玛咖超临界CO2提取物溶解在甲醇中过滤后得到；(2)标准线的绘制：测定不同浓度的N-苄基十六烷酰胺标准品溶液的液相色谱，得出不同浓度的N-苄基十六烷酰胺的峰面积，并根据N-苄基十六烷酰胺的浓度与峰面积，拟合标准线；(3)浓度计算：测定玛咖测试品溶液的液相色谱，得出玛咖测试品中N-苄基十六烷酰胺的峰面积，通过标准线，从而计算出玛咖超临界提取物中N-苄基十六烷酰胺的含量。优选的，所述的玛咖超临界CO2提取物中玛咖酰胺B含量的分析方法，所述玛咖测试品溶液将玛咖超临界提取物溶解在甲醇中，采用0.45μm微孔滤膜进行过滤。优选的，所述的玛咖超临界CO2提取物中玛咖酰胺B含量的分析方法，所述液相色谱采用反相C18色谱柱。优选的，所述的玛咖超临界CO2提取物中玛咖酰胺B含量的分析方法，所述液相色谱的流动相为乙腈-水或者乙腈-酸，其中酸的体积分数为0.5％-1.0％。优选的，所述的玛咖超临界CO2提取物中玛咖酰胺B含量的分析方法，所述酸为甲酸、冰乙酸、三氟乙酸、磷酸中的一种或多种。优选的，所述的玛咖超临界CO2提取物中玛咖酰胺B含量的分析方法，所述液相色谱的检测波长为210-260nm。优选的，所述的玛咖超临界CO2提取物中玛咖酰胺B含量的分析方法，所述液相色谱的柱温为25-40℃。优选的，所述的玛咖超临界CO2提取物中玛咖酰胺B含量的分析方法，所述液相色谱的流速为0.6-1.0ml/min。本专利技术的有益效果是：本专利技术的分析方法不仅精密度高、重复性好，而且稳定性优异，回收率高。另外，本专利技术所述液相色谱测试N-苄基十六烷酰胺的峰面积，N-苄基十六烷酰胺峰的分离度大，选择性好，灵敏度高。附图说明图1为本专利技术实施例2中玛咖测试品的液相色谱图；图2为本专利技术实施例3中N-苄基十六烷酰胺标准品溶液的液相色谱图。具体实施方式为更好地理解本专利技术，下面通过以下实施例对本专利技术作进一步具体的阐述，但不可理解为对本专利技术的限定，对于本领域的技术人员根据上述
技术实现思路
所作的一些非本质的改进与调整，也视为落在本专利技术的保护范围内。实施例1玛咖超临界CO2提取物中玛咖酰胺B含量的分析方法，包括以下步骤：(1)溶液的配制：包括N-苄基十六烷酰胺标准品溶液和玛咖测试品溶液，N-苄基十六烷酰胺标准品溶液通过将N-苄基十六烷酰胺溶解在甲醇中制得，玛咖测试品溶液将玛咖超临界提取物溶解在甲醇中，采用0.45μm微孔滤膜进行过滤得到；(2)标准线的绘制：测定不同浓度的N-苄基十六烷酰胺标准品溶液的液相色谱，得出不同浓度的N-苄基十六烷酰胺的峰面积，并根据N-苄基十六烷酰胺的浓度与峰面积，拟合标准线；(3)浓度计算：测定玛咖测试品溶液的液相色谱，得出玛咖测试品中N-苄基十六烷酰胺的峰面积，通过标准线，从而计算出玛咖超临界提取物中N-苄基十六烷酰胺的含量(即每克玛咖超临界提取物中N-苄基十六烷酰胺的质量，单位mg/g)。液相色谱采用反相C18色谱柱。液相色谱的流动相为乙腈-水或者乙腈-酸，其中酸的体积分数为0.5％-1.0％，酸为甲酸、冰乙酸、三氟乙酸、磷酸中的一种或多种。液相色谱的检测波长为210-260nm，液相色谱的柱温为25-40℃。液相色谱的流速为0.6-1.0ml/min。液相色谱的型号为：UltiMate3000高效液相色谱仪(包括梯度泵SR-3000、自动进样器WPS-3000、柱恒温系统TCC-3000、检测器DAD-3000、色谱工作站变色龙7.2)(赛默飞世尔科技公司)；色谱柱的型号为：DiamonsilPlusC18(4.6mm×250mm，5μm)。乙腈(色谱纯，德国默克公司)；纯净水(杭州娃哈哈集团有限公司)；其他试剂均为分析纯。实施例2在实施例1的基础上，玛咖测试品通过取玛咖超临界提取物0.1g，加10ml甲醇超声溶解，采用0.45μm微孔滤膜过滤得到。液相色谱的流动相为磷酸(A)-乙腈(B)，其中，磷酸的体积分数为1.0％，流速为1.0ml/min，柱温为35℃，检测波长210nm，梯度洗脱(如下表1)，得到了玛咖测试品的液相色谱图(如图1)。表1并且根据N-苄基十六烷酰胺标准品溶液的浓度与峰面积的关系，得到了线性拟合方程，y＝3.9049x-0.0063，相关系数为0.9995，其中，x表示N-苄基十六烷酰胺标准品溶液中N-苄基十六烷酰胺的浓度，y表示对应N-苄基十六烷酰胺的峰面积。实施例3：精密度实验在实施例2的基础上，N-苄基十六烷酰胺标准品溶液中N-苄基十六烷酰胺的浓度为0.21mg/ml，采用该浓度连续进样6次，得到其液相色谱图(如图2)并记录N-苄基十六烷酰胺的峰面积，求出对应的平均值(Average)及相对标准偏差(RSD％)，其结果如下表2：表2由表2可知，平均值(Average)为21.3186，相对标准偏差(RSD％)为0.70，精密度高。实施例4：重复性实验在实施例2的基础上，同一批次的玛咖超临界提取物，重复制备六份玛咖测试品溶液，测定其液相色谱，并且根据实施例2中的线性拟合方程，计算6份样品中N-苄基十六烷酰胺的含量(w)，并求出对应的平均值(Average)及相对标准偏差(RSD％)，其结果如表3所示。表3由表3可知，平均值(Average)为10.7918，相对标准偏差(RSD％)为0.97，符合规定，重复性好。实施例5：稳定性实验在实施2的基础上，取同一批次的玛咖测试品溶液，进行液相色谱仪分析，分别于0、2、4、8、12、24h测定其液相图谱，记录N-苄基十六烷酰胺的峰面积(w)，并求出平均值(Average)及相对标准偏差(RSD％)，其结果如表4所示。表4由表4可知，平均值(Average)为8.4777，相对标准偏差(RSD％)为2.31，符合规定，稳定性好。实施例6：回收率实验在实施例2的基础上，计算出玛咖测试品溶液中N-苄基十六烷酰胺的含量，为初始量，并加入初始量80％、100％、120％的N-苄基十六烷酰胺标准品溶液(加入量)，再测试溶液中N-苄基十六烷酰胺的含量，为实测量。其中，每组含量设置3次平行实验，考察N-苄基十六烷酰胺的平均值(Averag本文档来自技高网...

【技术保护点】
玛咖超临界CO2提取物中玛咖酰胺B含量的分析方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)溶液的配制：包括N‑苄基十六烷酰胺标准品溶液和玛咖测试品溶液，N‑苄基十六烷酰胺标准品溶液通过将N‑苄基十六烷酰胺溶解在甲醇中制得，玛咖测试品溶液通过将玛咖超临界CO2提取物溶解在甲醇中过滤后得到；(2)标准线的绘制：测定不同浓度的N‑苄基十六烷酰胺标准品溶液的液相色谱，得出不同浓度的N‑苄基十六烷酰胺的峰面积，并根据N‑苄基十六烷酰胺的浓度与峰面积，拟合标准线；(3)浓度计算：测定玛咖测试品溶液的液相色谱，得出玛咖测试品中N‑苄基十六烷酰胺的峰面积，通过标准线，从而计算出玛咖超临界提取物中N‑苄基十六烷酰胺的含量。

【技术特征摘要】
1.玛咖超临界CO2提取物中玛咖酰胺B含量的分析方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)溶液的配制：包括N-苄基十六烷酰胺标准品溶液和玛咖测试品溶液，N-苄基十六烷酰胺标准品溶液通过将N-苄基十六烷酰胺溶解在甲醇中制得，玛咖测试品溶液通过将玛咖超临界CO2提取物溶解在甲醇中过滤后得到；(2)标准线的绘制：测定不同浓度的N-苄基十六烷酰胺标准品溶液的液相色谱，得出不同浓度的N-苄基十六烷酰胺的峰面积，并根据N-苄基十六烷酰胺的浓度与峰面积，拟合标准线；(3)浓度计算：测定玛咖测试品溶液的液相色谱，得出玛咖测试品中N-苄基十六烷酰胺的峰面积，通过标准线，从而计算出玛咖超临界提取物中N-苄基十六烷酰胺的含量。2.根据权利要求1所述的玛咖超临界CO2提取物中玛咖酰胺B含量的分析方法，其特征在于：所述玛咖测试品溶液将玛咖超临界提取物溶解在甲醇中，采用0.45μm微孔滤膜进行过滤。3.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：张易，马晋芳，葛发欢，张陈，彭银，叶静，周飞贤，
申请(专利权)人：中山大学，广州中大南沙科技创新产业园有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44