具有抗肿瘤活性的取代硫脲基磷酰胺酯类化合物制造技术

利用各种取代苯胺及α－氨基酸酯与氮芥双异硫氰酸酯、氮芥异氰异硫氰酸二酯及单异硫氰酸酯氯化物进行加成反应，得到了四个系列取代硫脲基及脲基氮芥磷酰胺类衍生物。该类化合物具有广谱的抗癌活性，对人胸癌、白血病、乳腺癌（ＢＣＡＰ）、胃癌（ＭＧＣ）及结肠癌（ＨＣＴ）等均有很好的抑制作用。小鼠毒性试验表明，此类化合物均属于低毒。其合成工艺简单，原料易得，因此是一类具有很好发展前景的新型高效、低毒的抗肿瘤化合物。（*该技术在2014年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术是一种有关新型广谱抗肿瘤药物的合成方法。氮芥磷酸衍生物作为抗癌药物早在五十年代就开始了研究，有些因具有良好的抗癌活性已用于临床，如Endoxan，Holoxan等，但它们具有损害骨髓细胞及泌尿系统等副作用。因此，进一步对氮芥磷酸衍生物作结构修饰，寻找高效、低毒的抗肿瘤药物，对促进肿瘤的化疗作用具有十分重要的意义。有些磷酰硫脲类化合物对人畜十分安全，甚至无毒，在医药上还可用作杀线虫剂、抗肿瘤剂及体内驱虫剂。此外，将α-氨基酸引入药物，可以作为药物的有效载体，增强药物的脂溶性，降低药物的毒性，提高药物的活性，增强药物的化疗作用。本专利技术将取代硫脲基及生命体内源物质α-氨基酸引入氮芥磷酸衍生物，目的是寻求一种高效低毒的抗肿瘤药物。所合成化合物具有广谱抗肿瘤活性，尤其对人乳腺癌(BCAP)、人胃癌(MGC)及人白血病(HL-60)等瘤株有很好抑制作用。本专利技术的抗肿药物是通过亲核取代反应和亲核加成反应而得到的一类新型氮芥磷酸衍生物，其合成方法如下 Y1＝Y2＝o-Me，m-Me，p-Me，o-Cl，m-Cl ，p-Cl，H，m-NO2，p-NO2，p-Br；R＝H，o-Cl，m-Cl，p-Cl，p-Br，o-Me，m-Me，p-Me，m-NO2，p-NO2，2，4-Cl2，2，4-Me2，2，3，4，5，6-Cl5；Y3与R相同；R1＝H，Me，i-Pr，PhCH2，i-Bu，CH2CH2SCH3，s-Bu上述产物(I)和(II)用作抗肿瘤药物具有较好的广谱的抗肿瘤活性(见实例1-实例12)；本专利技术的抗肿瘤药物的合成路线简单，工艺操作简便，原料易得，产物易于分离和纯化，合成周期短。实例1 o-对氯苯基-N’，N’-二-(2-氯乙基)-N3-邻氯苯基硫脲基磷酰胺酯的制备及应用在100ml反应瓶中，加入4mmol o-对氯苯基-N，N-二-(2-氯乙基)氯代磷酰胺酯和30ml无水乙腈。室温搅拌下分别加入8.2mmol硫氰酸钾。在12-20℃搅拌反应8-12小时。在低于60℃下减压蒸干溶剂，剩余物用50ml(25ml×2)无水苯分两次提取，并用10ml(5ml×2)无水苯洗滤渣两次。合并滤液与洗液，减压蒸去溶剂，以20ml无水乙腈作反应溶剂，室温下滴加4mmol邻氯苯胺和10ml乙腈的混合液，搅拌反应4-6小时，滤出所得固体产物，滤液浓缩，加适量无水乙醚，冷冻放置，又析出部分产品，合并所得固体，用丙酮-乙醚重结晶，得产品1.28g，产率63.7％，m.p.131-2℃，分子式C17H18Cl4N3O2PS。元素分析计算值(％)C，40.72；H，3.59；N，8.38；实测值(％)C，40.48；H，3.47；N，8.45；1HNMR(CDCl3)，δ(ppm)3.36-3.82(m，8H，2ClCH2CH2)，7.1-7.92(m，8H，8Ph-H)，8.16(d，1H，NH)，10.34(s，1H，NH)。抗肿瘤活性测试方法，取对数生长期细胞，加入96孔培养板。待贴壁后加入受试化合物，培养72h，加入MTT，4h后除去培养液，加入酸化异丙醇，振荡后测定量570nm处光密度值。把实例1得到的产物用上述方法测试得到体外抗肿瘤活性结果如下 实例2 o-邻甲苯基-N’，N’-二-(2-氯乙基)-N3-对氯苯基硫脲基磷酰胺酯的制备及应用操作同实例1，用o-邻甲苯基-N，N-二-(2-氯乙基)氯代磷酰胺酯中间体及用对氯苯胺代替邻氯苯胺进行反应。产品为白色固体，从丙酮-乙醚重结晶，m. p.143-4℃，收率68.4％。分子式C18H21Cl3N3O2PS。元素分析计算值(％)C，44.95；H，4.37；N，8.74；实测值(％)C，44.71；H，4.34；N，8.70；1HNMR(CDCl3)，δ(ppm)2.40(s，3H，CH3)，3.44-3.92(m，8H，2ClCH2CH2)，7.12-7.58m，8H，8Ph-H)，8.48(d，1H，NH)，10.5(s，1H，NH)。生测结果如下 实例3 o-2，4-二甲苯基-N’，N’-二-(2-氯乙基)-N3-对氯苯基硫脲基磷酰胺酯的制备及应用操作同实例2，用o-2，4-二甲苯基-N，N-二-(2-氯乙基)氯代磷酰胺酯中间体进行反应。产品为白色固体，从丙酮-乙醚重结晶，m.p.126-7℃，收率61.1％。分子式C19H23Cl3N3O2PS。元素分析计算值(％)C，46.11；H，4.65；N，8.49；实测值(％)C，46.13；H，4.48；N，8.26；1HNMR(CD3C(O)CD3)，δ(ppm)2.32-2.40(ds，6H，2CH3)，3.44-3.90(m，8H，2ClCH2CH2)，7.12-7.92(m，8H，7Ph-H，NH)，10.5(s，1H，NH)。生测结果如下 实例4 o-邻甲苯基-N’，N’-二-(2-氯乙基)-N3-对溴苯基硫脲基磷酰胺酯的制备及应用操作同实例2，用对溴苯胺代替对氯苯胺进行反应。产品为白色固体，从丙酮-乙醚重结晶，m.p.148-9℃，收率67.7％。分子式C18H21Cl2BrN3O2PS。元素分析计算值(％)C，41.14；H，4.00；N，8.00；实测值(％)C，41.06；H，3.68；N，8.08；1HNMR(CD3C(O)CD3)，δ(ppm)2.40(s，3H，CH3)，3.44-3.90(m，8H，2ClCH2CH2)，7.04-7.68(m，8H，8Ph-H)，9.52(d，1H，NH)，10.5(s，1H，NH)。生测结果如下 实例5 o-对氯苯基-N’，N’-二-(2-氯乙基)-N3-乙氧羰基异丙基取代亚甲基硫脲基磷酰胺酯的制备及应用在100ml反应瓶中，加入4mmol o-对氯苯基-N，N-二-(2-氯乙基)氯代磷酰胺酯和30ml无水乙腈。室温搅拌下分批加入8.2mmol硫氰酸钾，搅拌反应8-10小时，在不超过60℃下减压蒸去溶剂，剩余物用50ml(25ml×2)无水苯分两次提取，并用10ml(5ml×2)苯洗滤渣两次，合并滤液与洗液，减压蒸去溶剂，以20ml无水乙腈作反应溶剂，将4mmol dl-α-缬氨酸乙酯的10ml无水乙腈溶液室温下滴入，并反应6-15h。减压浓缩，加适量乙醚，冷冻放置，析出白色固体，抽滤，用氯仿-乙醚重结晶。m.p.125℃，收率61.9％。分子式C18H27Cl3N3O4PS。元素分析计算值(％)C，41.66；H，5.21；N，8.10；实测值(％)C，41.42；H，5.38；N，7.96；1HNMR(CDCl3)，δ(ppm)0.82-0.99(m，6H，2CH3)，1.21(m，3H，CH3)，2.4(m，1H，CH)，3.4-3.68(m，8H，2ClCH2CH2)，4.18(m，2H，CH2)，4.82(m，1H，CH)，7.10-7.36(m，4H，4Ph-H)，7.8(w，1H，NH)，9.2(q，1H，NH，J＝7.11Hz)；31PNMR(CDCl3)，δ(ppm)1.091及0.916。生测结果如下 实例6 o-对氯苯基-N’，N’-二-(2-氯乙基)-N3-乙氧羰基(2-甲硫基)乙基取代亚甲基硫脲基磷酰胺酯的制本文档来自技高网...

【技术保护点】
具有抗癌活性的取代硫脲基磷酰胺酯类化合物，其特征在于它的化学结构为 （ＣｌＣＨ↓［２］ＣＨ↓［２］）↓［２］ＮＰ（Ｏ）ＡＡ↓［１］， 其中ＡＡ↓［１］＝＊＊＊ （Ⅰ） Ｘ＝Ｓ（Ⅰ↓［１］），Ｏ（Ⅰ↓［２］） Ｙ＝ｏ－Ｍｅ，ｍ－Ｍｅ，ｐ－Ｍｅ，ｏ－Ｃｌ，ｍ－Ｃｌ，ｐ－Ｃｌ，Ｈ，ｍ－ＮＯ↓［２］，ｐ－ＮＯ↓［２］，ｐ－Ｂｒ； ＊＊＊ （Ⅱ） ＊＊＊ Ｒ＝Ｈ，ｏ－Ｃｌ，ｍ－Ｃｌ，ｐ－Ｃｌ，ｐ－Ｂｒ，ｏ－Ｍｅ，ｍ－Ｍｅ，ｐ－Ｍｅ，ｍ－ＮＯ↓［２］，ｐ－ＮＯ↓［２］，２，４－Ｃｌ↓［２］，２，４－Ｍｅ↓［２］，２，３，４，５，６－Ｃｌ↓［５］； Ｙ↓［３］与Ｒ相同； Ｒ↑［１］＝Ｈ，Ｍｅ，ｉ－Ｐｒ，ＰｈＣＨ↓［２］，ｉ－Ｂｕ，ＣＨ↓［２］ＣＨ↓［２］ＳＣＨ↓［３］，ｓ－Ｂｕ。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈茹玉，毛丽娟，王惠林，周嘉，
申请(专利权)人：南开大学，
类型：发明
国别省市：12[中国|天津]