一种制备丹参酚酸Ｂ的方法技术

本发明专利技术提供一种从丹参中提取丹参酚酸Ｂ的制备方法，该方法为丹参水提液中加入抗氧剂，抗氧剂用量为提取液体积的０．００１％－１０％，采用过滤、离心或自然沉降法去除沉淀，滤液上非极性或弱极性大孔树脂，洗脱液酸化至ｐＨ＝１～４。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种丹参酚酸B的制备方法。
技术介绍
丹参Salviamiltiorrhiza是具有活血化瘀功效的传统中药，对心脑血管疾病具有显著疗效，自古以来就广泛应用于临床。药理研究表明水溶性的酚酸成分是丹参活血化瘀的有效成分，具有显著的抗脂质过氧化，清除自由基和抗血栓作用。随着人口老龄化进程的加速以及生活方式的改变，心脑血管病已成为一个全球性的健康问题，冠心病、卒中的死亡率在世界范围分别居第1、3位。新型有效的防治心脑血管病药物的开发已刻不容缓。随着中药现代化进程的日益深入，具有显著抗脂质过氧化、清除自由基和抗血栓作用的丹参酚酸类成分越来越引起人们的注意。目前已有不少以丹参酚酸为主要药效成分的药物制剂，如丹参注射液、香丹注射液等。研究表明，在丹参的干燥根中，酚酸B含量在5％左右，个别产地所产丹参中酚酸B的含量高达8％-10％。丹参酚酸B是丹参中主要的酚酸类成分，也是丹参具有活血化瘀功效的主要活性成分。但在目前的丹参药物制剂中，其酚酸类成分主要由丹参素和原儿茶醛组成，丹参酚酸B的含量很低。这是由于丹参酚酸B是二分子丹参素与一分子原紫草酸缩合而成的四聚咖啡酸类化合物，其化学结构中存在的酚羟基和羧基很不稳定，低浓度的丹参酚酸B水溶液在常温下经24小时后酚酸B即损失30％左右。现有的丹参提取过程中往往经过多次加热处理，使大部分丹参酚酸B降解为丹参素和寡聚咖啡酸的脱水、脱羧产物或进一步氧化成原儿茶醛、原儿茶酸。丹参素虽然也是丹参具有活血化瘀作用的有效成分之一，但在加热条件下同样易氧化分解。总而言之，丹参作为一种疗效显著的传统中药，在目前的制剂工艺中，其利用度是很低的。现有的丹参注射液的的制备方法是取丹参药材，加10倍量的注射用水煎煮2小时，过滤，保留第一次煎液；药渣再用8倍量的注射用水煎煮2小时，过滤，保留第二次煎液；药渣再加5倍量的注射用水煎煮1小时，过滤，保留第三次煎液；药渣再加5倍量的注射用水煎煮1小时，过滤，保留第四次煎液，去除药渣。然后合并四次煎煮液，蒸发浓缩至含丹参为2克/毫升的浓缩液。浓缩液中加入乙醇至含醇量为70％-80％，于0℃-5℃条件下放置12-36小时，过滤去除沉淀；滤液蒸馏浓缩至含丹参为3克/毫升的浓缩液，再加入乙醇至含醇量为80％-90％，于0℃-5℃条件下放置48-72小时，过滤去除沉淀；滤液蒸馏浓缩至含丹参为3克/毫升的浓缩液，再加入4倍量的注射用水，于0℃-5℃条件下放置12-36小时，过滤去除沉淀；滤液加热浓缩至含丹参为5克/毫升的浓缩液，再加入4倍量的注射用水，于0℃-5℃条件下放置48-72小时，过滤去除沉淀，滤液加热浓缩至含丹参为5克/毫升的浓缩液，加入活性碳，加热煮沸，制得丹参精制液。在这一工艺中，经过多次加热处理，丹参酚酸B损失90％以上，由丹参酚酸B降解产生的丹参素也损失巨大。如何在提取工艺中保持丹参酚酸B的稳定性，最大限度地利用丹参中的有效成分，是药物研究工作者努力的方向。目前已有以丹参酚酸B提取对象的工艺和方法。如专利公开号为CN 1425659A的国家专利技术专利中公开了一种丹参酚酸B的制备方法。其工艺步骤为1.水提取；2.用盐酸或硫酸酸化提取液；3.采用非极性或弱极性的大孔树脂或MCIGEL-CHP-20P、SephadexLH-20凝胶、C18键合相或C18键合相色谱柱填料通过柱层析法分离纯化丹参酚酸B；4.冷冻干燥。通过该方法可获得纯度在90％以上的丹参酚酸B制品。但我们在研究中发现，采用酸化处理丹参水提液时，丹参酚酸B的损失达20％，采用60％-85％乙醇沉淀处理时丹参酚酸B损失达30％以上；由于丹参酚酸B具有较大的极性，丹参水提、酸化后上非极性或弱极性的大孔树脂，直接以不同浓度醇(或其它有机溶剂)洗脱时层析柱的处理能力较低，按该专利说明书中所述大孔树脂处理丹参水提液中上柱样品(以原药材干重计算)与树脂量之比仅为1∶4(W∶W)，以丹参酚酸B计仅约5.5mg/ml大孔树脂；如果采用MCIGEL-CHP-20P、SephadexLH-20凝胶、C18键合相或C18键合相色谱柱填料，则生产成本将大幅度提高。本专利技术提供了一种新的丹参酚酸B的制备方法，该方法在处理过程中尽可能地保持了丹参酚酸B的稳定性，并在保证产品质量的同时使单位体积大孔树脂对丹参酚酸B的处理能力提高了4倍以上，非常适于大规模的工业化生产。
技术实现思路
本专利技术提供了一种丹参酚酸B的制备方法。本专利技术提供的制备方法为丹参水提液上非极性或弱极性大孔树脂，其特征为，丹参水提液中加入抗氧剂，抗氧剂用量为提取液体积的0.001％-10％，洗脱液酸化至PH＝1～4。具体为1.水提丹参中的酚酸类成分时加入抗氧剂。所用水可为常水、纯水、注射用水等，优选为纯水；水温应保持0-50℃，优选为室温。提取方法可以是浸渍、渗漉或超声萃取。上述浸渍法是取粉碎后可过三号筛的丹参加水一次性浸渍提取或多次浸渍提取。每次浸渍用5-20倍量水，浸渍时间为2-8小时。推荐方案为第一次浸渍用20倍量水，浸渍时间为2小时，第二次浸渍用10倍量水，浸渍时间为4小时。合并两次提取液，过滤、离心或自然沉降初步去除提取液中的固体杂质。上述渗漉法是取粉碎后可过三号筛的丹参装于一有机玻璃制成的渗漉柱或桶中，边装边适当压实，渗漉柱或桶上端留出约1/5体积，加水至所有药材浸没，静止浸泡4小时。打开渗漉柱下端阀门，使渗漉液缓缓流出，每小时流出渗漉液约为丹参干重的一倍，同时不断注入水至渗漉柱上端。以HPLC跟踪检测渗漉液中丹参酚酸B的含量，确定用12-16倍量水渗漉可比较完全地提取出丹参酚酸B。上述超声法是取粉碎后可过三号筛的丹参，加水一次性提取或多次提取。每次提取用5-20倍量水，提取时间为0.5-2小时。推荐方案为第一次用20倍量水，提取时间为0.5小时，第二次浸渍用10倍量水，浸渍时间为1.5小时。合并两次提取液，过滤、离心或自然沉降初步去除提取液中的固体杂质。将上述水提液中加入抗氧剂，静置4-24小时，溶液变混浊并逐渐析出沉淀，采用过滤、离心或自然沉降法去除沉淀。抗氧剂可以是亚硫酸氢钠、亚硫酸钠、抗坏血酸、焦亚硫酸钠。优选为亚硫酸氢钠和抗坏血酸。抗氧剂的用量为提取液体积的0.001％-10％，优选为0.005％-1％，再优选为0.005％-0.01％。加入抗氧剂的目的是延缓溶液中的溶解氧对丹参酚酸B的氧化作用。丹参酚酸B分子结构中的酚羟基和羧基很不稳定，尤其是在低浓度条件下极易氧化降解成丹参素和寡聚咖啡酸的脱水、脱羧产物或进一步氧化成原儿茶醛、原儿茶酸；并且水提液中含有大量的胶质成分，加入抗氧剂后，可产生盐析效果而去除这部分杂质。本专利技术人设计了以下对比实验来考察抗氧剂对丹参水提液中丹参酚酸B的保护作用并比较了醇沉、酸化去除杂质的效果取上述丹参水提液5份，其中四份分别加入0.01％的亚硫酸氢钠、0.01％的抗坏血酸、以盐酸调至pH2、以95％乙醇调至醇浓度为75％，另外一份不做任何处理。5份溶液在用HPLC检测其中的丹参酚酸B含量后除菌、密封，室温下放置两天，观察溶液状态，HPLC检测溶液中的丹参酚酸B含量并与两天前比较。结果表明，处理过的丹参水提液均出现沉淀，目测沉淀的量基本相同，而加入抗氧剂的水提液中丹参酚酸B含量明显比其它三种溶液稳本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种丹参酚酸Ｂ的制备方法，丹参水提液上非极性或弱极性大孔树脂，其特征为，丹参水提液中加入抗氧剂，抗氧剂用量为提取液体积的０．００１％－１０％，洗脱液酸化至ＰＨ＝１～４。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：曲桂武，岳喜典，
申请(专利权)人：山东绿叶天然药物研究开发有限公司，
类型：发明
国别省市：37[中国|山东]