一种木瓜蛋白酶的提炼方法技术

技术编号:15082606 阅读:116 留言:0更新日期:2017-04-07 13:38
本发明专利技术公开了一种木瓜蛋白酶的提炼方法,其特征在于:包括以下步骤:a、将尼龙膜先在盐酸中进行水解,然后浸入甲醛溶液,加入磷酸,待反应完全后,浸入到壳聚糖溶液中,室温反应后进行烘干,最后用醋酸和去离子水洗涤;b、利用超声波粉碎木瓜,然后再用步骤a中的尼龙膜进行粗酶分离;c、利用聚乙二醇和磷酸钾或甲基纤维素和葡聚糖进行双水相萃取,提纯精酶。本发明专利技术的有益效果是:进行粗酶的分离,省去了反复沉淀步骤,使活力回收大大提高,由于原料本身不含有害物质,在操作过程中也没有引人有害杂质,得到的木瓜酶制品可以直接用于食品的深加工。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种提炼方法,尤其涉及一种木瓜蛋白酶的提炼方法
技术介绍
木瓜蛋白酶简称木瓜酶,又称为木瓜酵素,是利用未成熟的番木瓜果实中的乳汁,采用现代生物工程技术提炼而成的纯天然生物酶制品,它是一类含巯基(~SH)蛋白酶,具有蛋白酶和酯酶的活性,其广泛的特异性对动植物蛋白、多肽、酯、酰胺等有较强的水解能力,能催化各种蛋白质,水解成一系列长短不一的短肽或氨基酸,还能把蛋白水解物合成为类蛋白质,由于它的热稳定性好及天然卫生安全等特点,广泛应用于食品、皮革、纺织、日化和制药行业,提高产品质量与档次,降低成本。目前,木瓜蛋白酶的提取纯化主要是采用沉淀法,但是这种方法工艺繁琐,产品中仍然混有其它的蛋白酶,纯度不高,不能达到制药工业的需求。随着人们对纯度和安全性提出进一步的要求,色谱技术应用于木瓜蛋白酶的纯化,如离子交换色谱、亲和色谱,该类填料特异性高,纯化倍数高,但分离速度受粒间扩散和低的轴向速率限制,压降大,分离时间长,处理量小,不能使用高的加料速度。而膜分离是一种根据分子的大小进行分离的技术,特点是表面积大、扩散路径短、操作压低、处理量大,但传统膜分离技术只有分离相对分子质量相差10倍以上的物系,不能满足生化分离的需要。因此,为解决上述问题,特提供一种新的技术方案。
技术实现思路
本专利技术提供一种木瓜蛋白酶的提炼方法。本专利技术采用的技术方案是:一种木瓜蛋白酶的提炼方法,包括以下步骤:a、将尼龙膜先在盐酸中进行水解,然后浸入甲醛溶液,加入磷酸,待反应完全后,浸入到壳聚糖溶液中,室温反应后进行烘干,最后用醋酸和去离子水洗涤;b、利用超声波粉碎木瓜,然后再用步骤a中的尼龙膜进行粗酶分离;c、利用聚乙二醇和磷酸钾或甲基纤维素和葡聚糖进行双水相萃取,提纯精酶。优选地,所述步骤a中盐酸水解温度为20-23℃,水解的时间控制在15-20小时之间。优选地,所述步骤a中甲醛溶液、磷酸、壳聚糖溶液的质量比为20:0.5:10。优选地,所述步骤a中醋酸与去离子水的质量比为1:1。优选地,所述步骤a烘干的温度控制在40-50℃之间。本专利技术的有益效果是:进行粗酶的分离,省去了反复沉淀步骤,使活力回收大大提高,由于原料本身不含有害物质,在操作过程中也没有引人有害杂质,得到的木瓜酶制品可以直接用于食品的深加工。具体实施方式为了加深对本专利技术的理解,下面将结合实施例对本专利技术作进一步详述,该实施例仅用于解释本专利技术,并不构成对本专利技术的保护范围的限定。实施例1一种木瓜蛋白酶的提炼方法,包括以下步骤:a、将尼龙膜先在盐酸中进行水解,盐酸水解温度为20℃,水解的时间控制在15小时,然后浸入20ml甲醛溶液,加入0.5ml磷酸,待反应完全后,浸入到10ml壳聚糖溶液中,室温反应后进行烘干,烘干的温度控制在40℃,最后用50ml醋酸和50ml去离子水洗涤;b、利用超声波粉碎木瓜,然后再用步骤a中的尼龙膜进行粗酶分离;c、利用聚乙二醇和磷酸钾或甲基纤维素和葡聚糖进行双水相萃取,提纯精酶。实施例2一种木瓜蛋白酶的提炼方法,包括以下步骤:a、将尼龙膜先在盐酸中进行水解,盐酸水解温度为22℃,水解的时间控制在17小时,然后浸入20ml甲醛溶液,加入0.5ml磷酸,待反应完全后,浸入到10ml壳聚糖溶液中,室温反应后进行烘干,烘干的温度控制在45℃,最后用50ml醋酸和50ml去离子水洗涤;b、利用超声波粉碎木瓜,然后再用步骤a中的尼龙膜进行粗酶分离;c、利用聚乙二醇和磷酸钾或甲基纤维素和葡聚糖进行双水相萃取,提纯精酶。实施例3一种木瓜蛋白酶的提炼方法,包括以下步骤:a、将尼龙膜先在盐酸中进行水解,盐酸水解温度为23℃,水解的时间控制在20小时,然后浸入20ml甲醛溶液,加入0.5ml磷酸,待反应完全后,浸入到10ml壳聚糖溶液中,室温反应后进行烘干,烘干的温度控制在50℃,最后用50ml醋酸和50ml去离子水洗涤;b、利用超声波粉碎木瓜,然后再用步骤a中的尼龙膜进行粗酶分离;c、利用聚乙二醇和磷酸钾或甲基纤维素和葡聚糖进行双水相萃取,提纯精酶。本专利技术的有益效果是:进行粗酶的分离,省去了反复沉淀步骤,使活力回收大大提高,由于原料本身不含有害物质,在操作过程中也没有引人有害杂质,得到的木瓜酶制品可以直接用于食品的深加工。以上所述,仅是本专利技术的较佳实施例而已,并非是对本专利技术作任何其他形式的限制,而依据本专利技术的技术实质所作的任何修改或等同变化,仍属于本专利技术所要求保护的范围。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种木瓜蛋白酶的提炼方法,其特征在于:包括以下步骤:a、将尼龙膜先在盐酸中进行水解,然后浸入甲醛溶液,加入磷酸,待反应完全后,浸入到壳聚糖溶液中,室温反应后进行烘干,最后用醋酸和去离子水洗涤;b、利用超声波粉碎木瓜,然后再用步骤a中的尼龙膜进行粗酶分离;c、利用聚乙二醇和磷酸钾或甲基纤维素和葡聚糖进行双水相萃取,提纯精酶。

【技术特征摘要】
1.一种木瓜蛋白酶的提炼方法,其特征在于:包括以下步骤:a、将尼龙膜先在盐酸中进行水解,然后浸入甲醛溶液,加入磷酸,待反应完全后,浸入到壳聚糖溶液中,室温反应后进行烘干,最后用醋酸和去离子水洗涤;b、利用超声波粉碎木瓜,然后再用步骤a中的尼龙膜进行粗酶分离;c、利用聚乙二醇和磷酸钾或甲基纤维素和葡聚糖进行双水相萃取,提纯精酶。2.根据权利要求1所述的一种木瓜蛋白酶的提炼方法,其特征在于:所述步骤a中盐...

【专利技术属性】
技术研发人员:张茜茜
申请(专利权)人:太仓市雅丰农场专业合作社
类型:发明
国别省市:江苏;32

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