地耳草中具有抗EB病毒和抗卡波氏肉瘤相关疱疹病毒作用化合物及其制法及应用制造技术

本发明专利技术提供了具有抗EB病毒和抗KSHV活性的化合物及其来源，以及分离纯化方法和应用，具体是从金丝桃属植物地耳草中分离纯化得到化合物1-18，其中从湖北省蕲春县大别山地区10月份采集的地耳草中分离纯化出化合物1-10，从江西省庐山市庐山地区8月份采集的地耳草中分离纯化出化合物11-18。通过这18个化合物对两种致瘤疱疹病毒进行抗病毒活性研究，发现化合物1、3、4、7和8对EB病毒的DNA复制有抑制活性；化合物3、6和13-17对卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)裂解期的复制有抑制活性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医药
，涉及抗EB病毒和抗卡波氏肉瘤相关疱疹病毒作用化合物化合物及其分离制备方法和应用，具体涉及分离纯化过程，结构确证，抗病毒及抑制病毒DNA复制作用等。
技术介绍
EB病毒(Epstein-Barrvirus，EBV)属于疱疹病毒科γ疱疹病毒亚科，是一种嗜人类淋巴细胞病毒，全球范围内约95％的健康成人携带该病毒。EBV主要潜伏于人类静止状态的成熟B淋巴细胞，是传染性单核细胞增多症的病原体，同时与多种人类淋巴细胞性和上皮细胞性肿瘤的发生发展有关，如鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma，NPC)、何杰金氏病、T/B淋巴细胞瘤、Burkitt’S淋巴瘤以及免疫缺陷病人的B淋巴细胞瘤等，是公认的DNA肿瘤病毒。EB病毒在裂解期的DNA复制是它在细胞里繁殖的重要阶段，因此，筛选和研发针对EBV裂解期的DNA复制的药物，对于治疗EBV相关疾病具有重要的意义。卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi’ssarcomaassociatedherpesvirus，KSHV)又称为人疱疹病毒8型(Humanherpesvirus8，HHV-8)，属于疱疹病毒科(Herpesviridae)，是一种双链DNA(dsDNA)病毒。KSHV是卡波氏肉瘤(Kaposi’ssarcoma，KS)、原发性渗出性淋巴瘤(Primaryeffusionlynphoma，PEL)及多中心卡氏病(Multicentrecattleman’sdisease，MCD)的病原体，在我国新疆维吾尔自治区地区有较高的KSHV感染率及KS发病率。目前临床上治疗KSHV相关疾病的方法取得了一定的进展，但是这些方法不能完全治愈，并且对人体有一定的副作用。因此，筛选和研发针对KSHV裂解期复制的药物，对于治疗KSHV相关疾病具有重要的意义。地耳草(Hypericumjaponicum)是藤黄科金丝桃属多年生草本植物地耳草[Hypericumjaponicum(Thunb.)Herb]的全草，又名田基黄、小元宝草、四方草、千重楼(浙江)等，产于辽宁、山东至长江以南各省区。民间以全草入药，有清热解毒、止血消肿的功效；主要用于治疗传染性肝炎、泻痢、小儿惊风、疳积、喉蛾、肠痈、疖肿蛇咬伤等。在欧洲、美洲的民间也有药用记载。现代药理研究表明,田基黄具有抑菌、保肝、抑制肿瘤和防治心血管疾病等作用,现已开发成针剂在临床上治疗急、慢性肝炎。
技术实现思路
：本专利技术的任务是提供具有抗EB病毒和抗KSHV活性的化合物及其来源以及分离纯化方法和应用。实现本专利技术的具体方案是：本专利技术提供的具有抗EB病毒和抗KSHV活性的化合物是具有以下式(I)所示的化合物1至化合物18：化合物1：地耳草右旋抗EB病毒素A[(+)-hyperjaponolA(1)]化合物2：地耳草左旋抗EB病毒素A[(－)-hyperjaponolA(2)]化合物3：地耳草右旋抗EB病毒素B[(+)-hyperjaponolB(3)]化合物4：地耳草左旋抗EB病毒素B[(－)-hyperjaponolB(4)]化合物5：地耳草右旋抗EB病毒素C[(+)-hyperjaponolC(5)]化合物6：地耳草左旋抗EB病毒素C[(－)-hyperjaponolC(6)]化合物7：地耳草抗EB病毒素D(hyperjaponolD)，R＝CH(CH3)2化合物8：地耳草抗EB病毒素E(hyperjaponolE)，化合物9：地耳草抗EB病毒素F(hyperjaponolF)，化合物10：地耳草绵马素G(hyperjaponolG)化合物11：地耳草右旋抗KS疱疹病毒素A[(+)-japonicolA(11)]化合物12：地耳草左旋抗KS疱疹病毒素A[(－)-japonicolA(12)]化合物13：地耳草右旋抗KS疱疹病毒素B[(+)-japonicolB(13)]化合物14：地耳草左旋抗KS疱疹病毒素B[(－)-japonicolB(14)]化合物15：地耳草右旋抗KS疱疹病毒素C[(+)-japonicolC(15)]化合物16：地耳草左旋抗KS疱疹病毒素C[(－)-japonicolC(16)]化合物17：地耳草右旋抗KS疱疹病毒素D[(+)-japonicolD(17)]化合物18：地耳草左旋抗KS疱疹病毒素D[(－)-japonicolD(18)]式(I)我们在抗病毒活性筛选的指导下，对采自湖北省蕲春县大别山地区和采自江西省庐山市庐山地区的地耳草进行了系统的抗病毒活性成分研究，分离得到了18个新化合物。其中，从采自湖北省蕲春县大别山地区的地耳草中分离得到化合物1-10，从采自江西省庐山市庐山地区的地耳草种分离得到化合物11-18。结构式如式(I)所示。通过这18个化合物对两种致瘤疱疹病毒进行抗病毒活性研究，发现化合物1、3、4、7和8对EB病毒的DNA复制有抑制活性；化合物3、6和13-17对卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)裂解期的复制有抑制活性。本专利技术涉及地耳草中化合物的分离制备、以及它具有抑制病毒的活性。化合物1、3、4、7和8可以预期发展成为治疗由EB病毒引起的红斑狼疮、风湿性关节炎、和鼻咽癌、何杰金氏病、T/B淋巴细胞瘤、Burkitt’S淋巴瘤以及免疫缺陷病人的B淋巴细胞瘤等肿瘤疾病的药物；化合物3、6和13-17可以预期发展成为治疗由KSHV引起的卡波氏肉瘤、原发性渗出性淋巴瘤及多中心卡氏病等疾病的药物。由此完成了本专利技术。本专利技术人通过对采自湖北省蕲春县大别山地区的地耳草全草的乙醇提取物进行分离纯化，得到10个新化合物，即化合物1-10。对采自江西省庐山市庐山地区的地耳草全草的乙醇提取物进行分离纯化，得到8个新化合物，即化合物11-18。运用多种波谱分析方法和其他手段，确定它们的结构为杂萜类化合物，具体结构如式(I)所示。通过对化合物1-18的抗病毒活性评价，发现化合物1、3、4和7-9对EB病毒在B95-8细胞中用佛波酯(PMA/TPA)诱导后进行裂解复制，表现出良好的抑制病毒DNA复制的活性，其中化合物3和7的活性尤其显著，可以作为抑制EB病毒药物开发的潜在药物；发现化合物3、6和13-17对KSHV在iSLK.219细胞中用四环素(Dox)和丁酸钠(NaB)诱导后进行裂解复制，表现出良好的抑制KSHV裂解复制的活性，其中化合物13活性较为显著，可以作为抑制KSHV药物开发的先导化合物。本专利技术的另一任务是提供式(I)中所示化合物1-18在制本文档来自技高网...

【技术保护点】
从金丝桃属植物地耳草中分离纯化得到的具有下式(I)所示结构的化合物1‑18，其中，从湖北省蕲春县大别山地区10月份采集的地耳草中分离纯化出化合物1‑10，从江西省庐山市庐山地区8月份采集的地耳草中分离纯化出化合物11‑18，化合物1：地耳草右旋抗EB病毒素A[(+)‑hyperjaponol A(1)] 化合物2：地耳草左旋抗EB病毒素A[(－)‑hyperjaponol A(2)] 化合物3：地耳草右旋抗EB病毒素B[(+)‑hyperjaponol B(3)] 化合物4：地耳草左旋抗EB病毒素B[(－)‑hyperjaponol B(4)] 化合物5：地耳草右旋抗EB病毒素C[(+)‑hyperjaponol C(5)] 化合物6：地耳草左旋抗EB病毒素C[(－)‑hyperjaponol C(6)] 化合物7：地耳草抗EB病毒素D(hyperjaponol D)，R＝CH(CH3)2化合物8：地耳草抗EB病毒素E(hyperjaponol E)，化合物9：地耳草抗EB病毒素F(hyperjaponol F)，化合物10：地耳草绵马素G(hyperjaponol G) 化合物11：地耳草右旋抗KS疱疹病毒素A[(+)‑japonicol A(11)] 化合物12：地耳草左旋抗KS疱疹病毒素A[(－)‑japonicol A(12)] 化合物13：地耳草右旋抗KS疱疹病毒素B[(+)‑japonicol B(13)] 化合物14：地耳草左旋抗KS疱疹病毒素B[(－)‑japonicol B(14)]化合物15：地耳草右旋抗KS疱疹病毒素C[(+)‑japonicol C(15)] 化合物16：地耳草左旋抗KS疱疹病毒素C[(－)‑japonicol C(16)]化合物17：地耳草右旋抗KS疱疹病毒素D[(+)‑japonicol D(17)] 化合物18：地耳草左旋抗KS疱疹病毒素D[(－)‑japonicol D(18)]式(I)。...

【技术特征摘要】
1.从金丝桃属植物地耳草中分离纯化得到的具有下式(I)所示结构的化合物1-18，其中，从湖北省蕲春县大别山地区10月份采集的地耳草中分离纯化出化合物1-10，从江西省庐山市庐山地区8月份采集的地耳草中分离纯化出化合物11-18，
化合物1：地耳草右旋抗EB病毒素A[(+)-hyperjaponolA(1)]
化合物2：地耳草左旋抗EB病毒素A[(－)-hyperjaponolA(2)]
化合物3：地耳草右旋抗EB病毒素B[(+)-hyperjaponolB(3)]
化合物4：地耳草左旋抗EB病毒素B[(－)-hyperjaponolB(4)]
化合物5：地耳草右旋抗EB病毒素C[(+)-hyperjaponolC(5)]
化合物6：地耳草左旋抗EB病毒素C[(－)-hyperjaponolC(6)]
化合物7：地耳草抗EB病毒素D(hyperjaponolD)，R＝CH(CH3)2化合物8：地耳草抗EB病毒素E(hyperjaponolE)，化合物9：地耳草抗EB病毒素F(hyperjaponolF)，化合物10：地耳草绵马素G(hyperjaponolG)
化合物11：地耳草右旋抗KS疱疹病毒素A[(+)-japonicolA(11)]
化合物12：地耳草左旋抗KS疱疹病毒素A[(－)-japonicolA(12)]
化合物13：地耳草右旋抗KS疱疹病毒素B[(+)-japonicolB(13)]
化合物14：地耳草左旋抗KS...

【专利技术属性】
技术研发人员：张勇慧，胡琳珍，薛永波，张锦文，王珍珍，
申请(专利权)人：华中科技大学，
类型：发明
国别省市：湖北;42