复合菌种降解煤泥水中残留聚丙烯酰胺的方法技术

本发明专利技术涉及一种复合菌种降解煤泥水中残留聚丙烯酰胺的方法，此方法是将球红假单胞菌菌悬液和黄孢原毛平革菌孢子悬液作为复合降解菌悬液，在一定的聚丙烯酰胺浓度下将球红假单胞菌菌悬液和黄孢原毛平革菌孢子悬液按1:X的体积比加入到降解培养基中，调制含聚丙烯酰胺的降解培养基PH至5‑7、培养温度25‑50℃等外界条件下，通过一系列的生物降解作用对聚丙烯酰胺进行降解。这种方法的优点是聚丙烯酰胺的降解效果好，能弥补单菌种不足，充分发挥不同菌种之间的协同作用，降低各因素对降解效果的不利影响，降解适应性更强。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种复合菌种降解煤泥水中残留聚丙烯酰胺的方法
技术介绍
煤泥水是煤炭洗选加工过程中产生的一种选煤废水。目前，煤泥水处理主要采用添加有机高分子絮凝剂和无机絮凝剂来加速煤泥颗粒的絮凝沉降。有机高分子絮凝剂中的聚丙烯酰胺由于具有长分子链且侧链上带有大量的活性基团被广泛用来提高煤泥水的絮凝率。但聚丙烯酰胺的大量使用也会带来一些负面作用：一方面，残留聚丙烯酰胺聚集在选煤厂循环水中，在加入浮选药剂前就有部分聚丙烯酰胺吸附在煤泥颗粒上，致使浮选药剂的吸附能力下降；另一方面，含聚丙烯酰胺的循环水由于得不到及时有效治理而被大量外排，会造成对环境的污染。因此，对选煤厂煤泥水中残留聚丙烯酰胺的有效处理具有十分重要的现实意义。目前，采用复合菌种生物降解法，降解处理煤泥水中残留聚丙烯酰胺的研究未见报道。由于煤泥水中残留的聚丙烯酰胺对湿法选煤工艺系统会产生不利影响，含聚废水外排又会对环境造成一定的危害，因此煤泥水中的残留聚丙烯酰胺的降解问题正逐渐引起人们的关注。微生物降解法能有效地处理各种难降解污染物，由于其技术成熟、无二次污染、运行费用低廉，在环境污染物处理方面起着重要的作用。微生物降解法将会成为无害化处理煤泥中残留聚丙烯酰胺的有效手段。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种复合菌种降解煤泥水中残留聚丙烯酰胺的方法，其优点在于：聚丙烯酰胺的降解效果良好，弥补单菌种降解的不足，能充分发挥不同菌种之间的协同作用，降低了各因素对降解效果的限制,增强了降解适应性。本专利技术中所用生物材料来源如下：黄孢原毛平革菌(Phanerochaetechrysosporium)，编号：BKMF-1767，购自广东省微生物研究所菌种保藏中心；球红假单胞菌(Rhodopseudomonassphaeroides),取自中国矿业大学化工学院实验室的保藏菌种，密封保存于冰箱中。其中黄孢原毛平革菌的培养条件为：在160rpm，30℃的培养基条件下培养2-4d；球红假单胞菌的培养条件为：在120rpm，30℃的培养基条件下培养2-4d。权利要求1、复合菌种降解煤泥水中残留聚丙烯酰胺的方法，其特征是：将球红假单胞菌菌悬液和黄孢原毛平革菌孢子悬液作为复合降解菌悬液，在一定的聚丙烯酰胺浓度下,将球红假单胞菌菌悬液和黄孢原毛平革菌孢子悬液按1:X的体积比加入到降解培养基中，调制含聚丙烯酰胺的降解培养基PH至5～7、培养温度25～50℃等条件下，通过生物降解作用对聚丙烯酰胺进行降解。2、根据权利要求1所述的复合菌种降解煤泥水中残留聚丙烯酰胺的方法，其特征在于：球红假单胞菌和黄孢原毛平革菌的活化及驯化包括以下步骤：1)球红假单胞菌：a、活化培养：从冰箱中取出甘油保存的菌种放置一段时间，用无菌吸管吸取0.3～0.5ml的液体菌种，转到液体基础培养基中，培养一段时间后再转接一次，即可得到复活的球红假单胞菌；b、驯化培养：在150ml的锥形瓶中加入灭菌的50ml的基础培养基和20ml含聚丙烯酰胺的灭菌的浓缩池溢流液，然后将活化的0.5ml菌接入锥形瓶中，在摇床中震荡培养。培养两天后倒出20ml的上清液，再加入20ml含聚丙烯酰胺的灭菌的浓缩池溢流液，往后每24h倒出20ml的上清液，再加入20ml含聚丙烯酰胺的灭菌的浓缩池溢流液，持续5天。再将菌液按2％的比例接入到250ml的锥形瓶中(含50ml基础培养基和150ml含聚丙烯酰胺的灭菌的浓缩池溢流液)，3d后每24h倒出50ml的上清液，再加入50ml含聚丙烯酰胺的灭菌的浓缩池溢流液，此过程持续7d,待菌液变浑浊。取驯化液体培养基中的菌接种到相应的固体培养基上，待在恒温培养箱中长出完好的菌落或成熟的孢子，挑取形态较好的菌落或孢子接种到斜面培养基上进行保藏；所述球红假单胞菌基础培养基配方为：NH4CL1g、K2HPO40.2g、NaCL0.5g、NaHCO31g、CH3COONa2g、酵母膏1g、MnCL2·4H2O0.3g、微量元素5ml、琼脂20g、1000ml去离子水、PH＝7，其中微量元素配方为：CuSO4·5H2O0.4g、ZnSO4·7H2O0.6g、MgCL22g；所述液体培养基配方为：同固体培养基配方，不加入琼脂；2)黄孢原毛平革菌：a、活化培养：取在冰箱中斜面保藏的黄孢原毛平革菌，在无菌操作台上挑取斜面培养基上的孢子接种到新鲜的黄孢原毛平革菌固体培养基上，挑取成熟的孢子再接种到固体培养基上，等长出成熟的孢子作为活化的菌种使用，并置于冰箱中保藏；b、驯化培养：在150ml的锥形瓶中加入灭菌的50ml的基础培养基和20ml含聚丙烯酰胺的灭菌的浓缩池溢流液，然后将活化的0.5ml菌接入锥形瓶中，在摇床中震荡培养。培养两天后倒出20ml的上清液，再加入20ml含聚丙烯酰胺的灭菌的浓缩池溢流液，往后每24h倒出20ml的上清液，再加入20ml含聚丙烯酰胺的灭菌的浓缩池溢流液，持续5天。再将菌液按2％的比例接入到250ml的锥形瓶中(含50ml基础培养基和150ml含聚丙烯酰胺的灭菌的浓缩池溢流液)，3d后每24h倒出50ml的上清液，再加入50ml含聚丙烯酰胺的灭菌的浓缩池溢流液，此过程持续7d,待菌液变浑浊。取驯化液体培养基中的菌接种到相应的固体培养基上，待在恒温培养箱中长出完好的菌落或成熟的孢子，挑取形态较好的菌落或孢子接种到斜面培养基上进行保藏；所述黄孢原毛平革菌基础培养基配方为：马铃薯淀粉20g，葡萄糖20g，KH2PO43g，MgSO4·7H2O1.5g，琼脂20g，去离子水1000mL，维生素B18mg，PH＝6，其中微量元素配方为：CuSO4·5H2O0.4g、ZnSO4·7H2O0.6g、MnCL2·4H2O0.5g；所述液体培养基配方为：同固体培养基配方，不加入琼脂。3、根据权利要求2所述的复合菌种降解煤泥水中残留聚丙烯酰胺的方法，其特征在于：球红假单胞菌和黄孢原毛平革菌驯化培养步骤的条件为：在120rpm，30℃的条件下培养。4、根据权利要求3所述的复合菌种降解煤泥水中残留聚丙烯酰胺的方法，其特征在于：球红假单胞菌菌悬液和黄孢原毛平革菌孢子悬液分别通过以下步骤制备得到：1)球红假单胞菌：接种驯化后的球红假单胞菌到液体培养基中，置于温度30℃、转速120rpm的摇床中震荡培养40h；再取适量发酵培养液于低速离心机上4000转离心10min，倒出上清液，用无菌生理盐水冲洗底部的细菌，采用血球计数器计数，最后配制成109/ml的菌悬液，4℃冰箱保存备用。2)黄孢原毛平革菌：在30℃培养5d的黄孢原毛平革菌固体培养基上加入10mL的无菌生理盐水，并用灼烧的接种环刮下一定量的孢子置于盛有玻璃珠的三角瓶。然后，放置30℃200r/min的摇床充分振荡5h。最后，通过采用血球计数器计数配制成107/ml的孢子悬液，4℃冰箱保存备用。5、复合菌种降解煤泥水中残留聚丙烯酰胺的方法，其特征在于包括以下步骤：1)在降解培养基中加入体积比为1:X球红假单胞菌菌悬液和黄孢原毛平革菌孢子悬液，搅拌均匀，其中：球红假单胞菌菌悬液和黄孢原毛平革菌孢子悬液按(1～5)％的比例加入降解培养基中；2)调制含聚丙烯酰胺的降解培养基PH至4～9、培养温度25～50℃、摇床转速70～170r/min。6、根本文档来自技高网...

【技术保护点】
复合菌种降解煤泥水中残留聚丙烯酰胺的方法，其特征是：将球红假单胞菌菌悬液和黄孢原毛平革菌孢子悬液作为复合降解菌悬液，在一定的聚丙烯酰胺浓度下,将球红假单胞菌菌悬液和黄孢原毛平革菌孢子悬液按1:X的体积比加入到降解培养基中，调制含聚丙烯酰胺的降解培养基PH至5～7、培养温度25～50℃等条件下，通过生物降解作用对聚丙烯酰胺进行降解。

【技术特征摘要】
1.复合菌种降解煤泥水中残留聚丙烯酰胺的方法，其特征是：将球红假单胞菌菌悬液和黄孢原毛平革菌孢子悬液作为复合降解菌悬液，在一定的聚丙烯酰胺浓度下,将球红假单胞菌菌悬液和黄孢原毛平革菌孢子悬液按1:X的体积比加入到降解培养基中，调制含聚丙烯酰胺的降解培养基PH至5～7、培养温度25～50℃等条件下，通过生物降解作用对聚丙烯酰胺进行降解。2.根据权利要求1所述的复合菌种降解煤泥水中残留聚丙烯酰胺的方法，其特征在于：球红假单胞菌和黄孢原毛平革菌的活化及驯化包括以下步骤：1)球红假单胞菌：a、活化培养：从冰箱中取出甘油保存的菌种放置一段时间，用无菌吸管吸取0.3～0.5ml的液体菌种，转到液体基础培养基中，培养一段时间后再转接一次，即可得到复活的球红假单胞菌；b、驯化培养：在150ml的锥形瓶中加入灭菌的50ml的基础培养基和20ml含聚丙烯酰胺的灭菌的浓缩池溢流液，然后将活化的0.5ml菌接入锥形瓶中，在摇床中震荡培养。培养两天后倒出20ml的上清液，再加入20ml含聚丙烯酰胺的灭菌的浓缩池溢流液，往后每24h倒出20ml的上清液，再加入20ml含聚丙烯酰胺的灭菌的浓缩池溢流液，持续5天。再将菌液按2％的比例接入到250ml的锥形瓶中(含50ml基础培养基和150ml含聚丙烯酰胺的灭菌的浓缩池溢流液)，3d后每24h倒出50ml的上清液，再加入50ml含聚丙烯酰胺的灭菌的浓缩池溢流液，此过程持续7d,待菌液变浑浊。取驯化液体培养基中的菌接种到相应的固体培养基上，待在恒温培养箱中长出完好的菌落或成熟的孢子，挑取形态较好的菌落或孢子接种到斜面培养基上进行保藏；所述球红假单胞菌基础培养基配方为：NH4CL1g、K2HPO40.2g、NaCL0.5g、NaHCO31g、CH3COONa2g、酵母膏1g、MnCL2·4H2O0.3g、微量元素5ml、琼脂20g、1000ml去离子水、PH＝7，其中微量元素配方为：CuSO4·5H2O0.4g、ZnSO4·7H2O0.6g、MgCL22g；所述液体培养基配方为：同固体培养基配方，不加入琼脂；2)黄孢原毛平革菌：a、活化培养：取在冰箱中斜面保藏的黄孢原毛平革菌，在无菌操作台上挑取斜面培养基上的孢子接种到新鲜的黄孢原毛平革菌固体培养基上，挑取成熟的孢子再接种到固体培养基上，等长出成熟的孢子作为活化的菌种使用，并置于冰箱中保藏；b、驯化培养：在150ml的锥形瓶中加入灭菌的50ml的基础培养基和20ml含聚丙烯酰胺的灭菌的浓缩池溢流液，然后将活化的0.5ml菌接入锥形瓶中，在摇床中震荡培养。培养两天后倒出20ml的上清液，再加入20ml含聚丙烯酰胺的灭菌的浓缩池溢流液，往后每24h倒出20ml的上清液，再加入20ml含聚丙烯酰胺的灭菌的浓缩池溢流液，持续5天。再将菌液按2％的比例接入到250ml的锥形瓶中(含50ml基础培养基和150ml含聚丙烯酰胺的灭菌的浓缩池溢流液)，3d后每24h倒出50ml的上清液，再加入50ml含聚丙烯酰胺的灭菌的浓缩池溢流液，此过程持续7d,待菌液变浑浊。取驯化液体培养基中的菌接种到相应的固体培养基上，待在恒温培养箱中长出完好的菌落或成熟的孢子，...

【专利技术属性】
技术研发人员：张东晨，戴雯，闫佳，冀敏敏，范晓露，常飞，
申请(专利权)人：安徽理工大学，
类型：发明
国别省市：安徽;34