一种草莓组织培养用有机硅及方法技术

本发明专利技术公开了一种草莓组织培养用有机硅及方法，包括以下步骤：步骤一，外植体选择；步骤二，培养基准备；步骤三，灭菌；步骤四，接种；步骤五，组苗移栽；草莓茎尖培养诱导芽分化的基本培养基为MS，附加6‑‑BA0．5mg/L，NAA0．2mg/L，蔗糖30g/L，琼脂粉6．5g／L，pH值调至5.5~6．5；其中，在草莓茎尖的扩大繁殖阶段，采用MS培养基附加6‑BA0．5mg/L、NAA0．01mg/L；升汞0．1％水溶液，浸泡8‑‑10分钟；该草莓组织培养用有机硅及方法，选择升汞作为灭菌剂，杀菌能力较强，并且时间容易控制把握；选择不定根直接生自茎基,根多且粗壮,叶片在3片以上,叶大、厚、深绿的生根苗，成活率普遍较高；整体的操作过程较为简单，实施起来较容易。

【技术实现步骤摘要】
专利
本专利技术涉及一种草莓组织培养用有机硅及方法，属于农业生物组织培养

技术介绍
我国是世界上草莓野生资源最丰富的国家，很早就开始利用野生草莓，并一直沿袭至今。我国的大果草莓栽培始于1915年，但过去未受到重视，发展缓慢。20世纪80年代以来草莓生产有了迅速的发展。中国目前草莓生产面积居世界第一位，其中主要产地分布在东部沿海地区，近几年我国西部地区发展也很快。草莓的营养配比很合理，其中维生素C的含量约是等量的西瓜、葡萄或苹果的10倍，此外草莓中富含铁、果糖、葡萄糖、柠檬酸、苹果酸等草莓以其突出的经济价值和生态功能在我国得到大面积的推广种植。而面对生产需要和现有的生产条件，草莓在产量、品质及抗性等方面都有待于进一步改良。将生物技术与常规育种方法结合起来进行草莓新品种培育，是提高育种草莓效率的有效途径。
技术实现思路
本专利技术为解决现有技术草莓组织培养程序复杂、不易操作的问题，旨在提供一种草莓组织培养用有机硅及方法。一种草莓组织培养用有机硅及方法，由以下步骤来完成：步骤一，外植体选择；步骤二，培养基准备；步骤三，灭菌；步骤四，接种；步骤五，组苗移栽。在步骤一中，在5——6个月就强，无病的草莓在阳光明媚的下午，匍匐茎茎尖，0.3--0.4mm的大小，为外植体；在步骤二中，用于草莓茎尖培养诱导芽分化的基本培养基为MS，附加6--BA0．5mg/L，NAA0．2mg/L，琼脂粉6．5g／L，蔗糖30g/L；pH值调至5.5~6.5；有机硅6-10%；其中，在草莓茎尖的扩大繁殖阶段，采用MS培养基附加6-BA0．5mg/L、NAA0．01mg/L；扩大繁殖主要是将丛生苗分块即每5--7株切成一块，转入继代培养基。在转苗过程中，去掉原生叶片有利于新苗分化，在扩大繁殖中随时清除愈伤组织，有利于新苗增殖和生长。诱导生根培养基用1／2MS附加不同浓度IBA。在步骤3中，在草莓组织培养多种常用杀菌剂；（1）使用过次氯酸钠10％水溶液(含有效氯0．4--0．5％)，浸泡接种材料10--15分钟；（2）次氯酸钙，用其饱和上清液，浸泡接种材料15--30分钟；（3）过氧化氢10--12％水溶液浸泡10--20分钟；（4）新洁尔灭5--10％水溶液，浸泡10--15分钟；（5）升汞0．1％水溶液，浸泡8--10分钟；其中前4种灭菌剂对接种材料比较安全，但因灭菌时间较长，常常使接种材料的外层氧化变褐，以致影响培养效果；升汞有很强的杀菌能力，但浸泡时间稍长会造成接种材料中毒；因此，在草莓组织培养中，如把握好时间，升汞是应用较多的灭菌剂；灭菌后的接种材料，要用无菌水充分清洗，通常要换水3--5次。在步骤四中，草莓组培培养脱毒苗的茎尖为主要目的，材料是非常小的，在接种疫苗的时间需要准确熟练地剥离顶端分生组织，和固体培养基的使用是适当的，接种时应注意不能将整个茎尖埋入培养基中；培养基须用1--1．1大气压热压灭菌20分钟；从材料接种到生根苗长成，这期间的培养温度一般应稳定在25±2℃；每天12小时的光照，光照强度2000lx为宜；文化室的温度范围在18——26℃；在步骤五中，培养瓶在自然条件下从文化室在移栽前，打开空气运动帽；24小时后，除去从瓶苗，根和根颈中的干净，掉到托儿所或洞穴盘被驯化；锯末或腐叶土壤消毒和成熟度矩阵，也可以通过灭菌处理在1:1的比例量用蛭石和珍珠岩混合物，或以2:1比例量的园土和煤渣混合物；培养基中用清水冲洗，或用多菌灵和甲基托布津混合杀菌，渣为基质，但也由0.2%乙酸和碱减少。与现有技术相比，该草莓组织培养用有机硅及方法，选择升汞作为灭菌剂，杀菌能力较强，并且时间容易控制把握；选择不定根直接从茎，根和叶粗壮，在3以上，叶大，厚，深绿色的幼苗成活率高；整体的操作过程较为简单，实施起来较容易。具体实施方式下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本专利技术的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本专利技术保护的范围。一种草莓组织培养用有机硅及方法，由以下步骤来完成：步骤一，外植体选择；步骤二，培养基准备；步骤三，灭菌；步骤四，接种；步骤五，组苗移栽。在步骤一中，在5—6个月就强，无病的草莓在阳光明媚的下午，匍匐茎茎尖，0.3-0.4mm的大小，为外植体；在步骤二中，用于草莓茎尖培养诱导芽分化的基本培养基为MS，附加6--BA0．5mg/L，NAA0．2mg/L，蔗糖30g/L，琼脂粉6．5g／L；pH值调至5.5~6.5。其中，在草莓茎尖的扩大繁殖阶段，采用MS培养基附加6-BA0．5mg/L、NAA0．01mg/L；扩大繁殖主要是将丛生苗分块即每5--7株切成一块，转入继代培养基。在转苗过程中，去掉原生叶片有利于新苗分化，在扩大繁殖中随时清除愈伤组织，有利于新苗增殖和生长。诱导生根培养基用1／2MS附加不同浓度IBA。在步骤3中，在草莓组织培养多种常用杀菌剂；（1）使用过次氯酸钠10％水溶液(含有效氯0．4--0．5％)，浸泡接种材料10--15分钟；（2）次氯酸钙，用其饱和上清液，浸泡接种材料15--30分钟；（3）过氧化氢10--12％水溶液浸泡10--20分钟；（4）新洁尔灭5--10％水溶液，浸泡10--15分钟；（5）升汞0．1％水溶液，浸泡8--10分钟；其中前4种灭菌剂对接种材料比较安全，但因灭菌时间较长，常常使接种材料的外层氧化变褐，以致影响培养效果；升汞有很强的杀菌能力，但浸泡时间稍长会造成接种材料中毒；因此，在草莓组织培养中，如把握好时间，升汞是应用较多的灭菌剂；灭菌后的接种材料，要用无菌水充分清洗，通常要换水3--5次。在步骤四中，草莓组培培养脱毒苗的茎尖为主要目的，材料是非常小的，在接种疫苗的时间需要准确熟练地剥离顶端分生组织，和固体培养基的使用是适当的，接种时应注意不能将整个茎尖埋入培养基中；培养基须用1--1．1大气压热压灭菌20分钟；从材料接种到生根苗长成，这期间的培养温度一般应稳定在25±2℃；每天12小时的光照，光照强度2000lx为宜；文化室的温度范围在18——26℃；在步骤五中，培养瓶在自然条件下从文化室在移栽前，打开空气运动帽；24小时后，除去从瓶苗，根和根颈中的干净，掉到托儿所或洞穴盘被驯化；锯末或腐叶土壤消毒和成熟度矩阵，也可以通过灭菌处理在1:1的比例量用蛭石和珍珠岩混合物，或以2:1比例量的园土和煤渣混合物；培养基中用清水冲洗，或用多菌灵和甲基托布津混合杀菌，渣为基质，但也由0.2%乙酸和碱减少。对于本领域技术人员而言，显然本专利技术不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本专利技术的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本专利技术。因此，无论从哪一点来看，均应将专利技术例看作是示范性的，而且是非限制性的，本专利技术的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本专利技术内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种草莓组织培养用有机硅及方法，包括以下步骤：步骤一，外植体选择；步骤二，培养基准备；步骤三，灭菌；步骤四，接种；步骤五，组苗移栽；其特征在于：S1，在5——6个月就强，无病的草莓在阳光明媚的下午，匍匐茎茎尖，0.3‑‑0.4mm的大小，为外植体；S2，用于草莓茎尖培养诱导芽分化的基本培养基为MS，附加6‑‑BA0．5mg/L，NAA0．2mg/L，蔗糖30g/L，琼脂粉6．5g／L ；pH值调至5.5~6.5，有机硅6‑10%；其中，在草莓茎尖的扩大繁殖阶段，采用MS培养基附加6‑BA0．5mg/L、NAA0．01mg/L；S3， 升汞0.1％水溶液，浸泡9‑11分钟；灭菌后接种材料，完全用消毒水清洗，通常要换水3—5倍。

【技术特征摘要】
1.一种草莓组织培养用有机硅及方法，包括以下步骤：步骤一，外植体选择；步骤二，培养基准备；步骤三，灭菌；步骤四，接种；步骤五，组苗移栽；其特征在于：S1，在5——6个月就强，无病的草莓在阳光明媚的下午，匍匐茎茎尖，0.3--0.4mm的大小，为外植体；S2，用于草莓茎尖培养诱导芽分化的基本培养基为MS，附加6--BA0．5mg/L，NAA0．2mg/L，蔗糖30g/L，琼脂粉6．5g／L；pH值调至5.5~6.5，有机硅6-10%；其中，在草莓茎尖的扩大繁殖阶段，采用MS培养基附加6-BA0．5mg/L、NAA0．01mg/L；S3，升汞0.1％水溶液，浸泡9-11分钟；灭菌后接种材料，完全用消毒水清洗，通常要换水3—5倍。2.根据权利要求1所述的一种草莓组织培养用有机硅及方法，其特征在于：草莓组培培养脱毒苗的茎尖为主要目的，材料是非常小的，在接种疫苗的时间需要准确熟练地剥离顶端分...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨月忠，
申请(专利权)人：江苏健神生物农化有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32