恢复对抗癌症的NKG2D通路功能的疫苗组合物和方法技术

本发明专利技术提供通过引发针对MIC多肽的免疫响应治疗受试者的癌症的组合物和方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】相关申请的交叉参考本申请要求2014年3月14日提交的U.S.S.N.61/953,064的优先权和权益，其内容通过引用以其全部并入本文。政府支持采用由NationalInstitutesofHealth以批准号NCI1R01CA173750-01授予的政府支持完成本专利技术。政府在本专利技术中具有一定权利。
本专利技术涉及在人类受试者中诱导抗癌免疫响应的方法与组合物。背景MICA是NKG2D(一种在大多数人类NK细胞、γδT细胞和CD8+T细胞上表达的C型凝集素样、II型跨膜受体)的配体。在连接反应时，NKG2D通过衔接蛋白DAP10发信号以唤起穿孔素依赖性细胞溶解并提供共同刺激。在人体内，NKG2D配体包括MHCI类链相关蛋白A(MICA)、密切相关的MICB、UL-16结合蛋白(ULBP)1-4和RAE-1G。虽然NKG2D配体通常不在健康的组织上发现，各种形式的细胞应激(包括DNA损伤)可能上调配体表达，导致它们在多种实体和血液恶性肿瘤(包括黑素瘤)中的频繁检测。通过配体阳性转化细胞的NKG2D活化有助于外源肿瘤免疫，因为NKG2D缺陷小鼠显示提高的肿瘤易感性。但是在许多癌症患者中，NKG2D介导的肿瘤免疫是无效的。部分地，通过NKG2D配体从肿瘤细胞中脱落，可以实现免疫逃逸，这引发了表面NKG2D的内在化和细胞毒性淋巴细胞的受损功能。参见例如Wu等人,“PrevalentExpressionoftheImmunostimulatoryMHCClassIChain-relatedMoleculeisCounteractedbySheddinginProstateCancer”,JClinInvest114:560-8(2004)；Groh等人,“Tumour-derivedSolubleMICLigandsImpairExpressionofNKG2DandT-cellActivation”,Nature419:734-8(2002)；Doubrovina等人,“EvasionfromNKCellImmunitybyMHCClassIChain-relatedMoleculesExpressingColonAdenocarcinoma”,JImmunol171:6891-9(2003)。MIC从肿瘤中脱落造成在肿瘤细胞表面上表达的MIC的密度降低也是肿瘤逃避的机理之一。参见Marten等人,“SolubleMICisElevatedintheSerumofPatientswithPancreaticCarcinomaDiminishingGammaDeltaTCellCytotoxicity”,IntJCancer119:2359-65(2006)。可溶性NKG2D配体也可以刺激调节性NKG2D+CD4+Foxp3-T细胞(其可以通过Fas配体、IL-10和TGF-β拮抗抗肿瘤细胞毒性)的扩张。MICA是从肿瘤细胞中脱落的NKG2D配体，即从细胞表面释放到周围介质中，并且来自癌症患者亚群的血清含有提高水平的可溶形式(sMICA)。MIC(术语“MIC”是指MICA和MICB)脱落部分通过与蛋白质二硫键异构酶ERp5的相互作用来实现，所述蛋白质二硫键异构酶ERp5裂解MICα3结构域中的二硫键，使其易受通过ADAM-10/17和MMP14进行的蛋白酶解(proteolysis)。已经描述了通过施用抗-MIC抗体或抗原结合肽片段来治疗癌症的方法。例如，US8,182,809描述了此类方法，该方法利用特异性结合到位于MIC多肽的α3胞外域中的氨基酸序列NGTYQT的纯化抗体或包含其抗原结合片段的多肽，以便抑制MIC多肽与ERp5的相互作用并抑制MIC的脱落。并且US7,959,916描述了使用抗-MICα3结构域抗体抑制MIC多肽从癌细胞中脱落的方法。肿瘤衍生的可溶性MIC多肽，MICA或MICB，或两者，已经也被建议作为癌症的诊断和预后的生物标记，并建议抗-MICA或抗-MICB抗体作为治疗癌症和自身免疫性疾病的治疗剂。例如，US7,771,718描述了使用抗MIC抗体以结合可溶性MIC多肽来减轻淋巴细胞中MIC诱导的NKG2D抑制方法。在实践中，使用治疗性抗体治疗癌症或其它疾病的方法相对昂贵，因为需要制造大量具有足够纯度以便输注至患者的此类抗体。考虑到大规模抗体生产的复杂性和对抗体输注方案的专门要求，需要替代方法以便以更有效和成本有效的方式来靶向MIC多肽。本专利技术通过提供用于在受试者中诱导抗MIC抗体的疫苗提供了这一问题的解决方案。肿瘤疫苗通常由共同作用以诱导识别和溶解肿瘤细胞的抗原特异性细胞毒性T细胞(CTL)的肿瘤抗原和免疫刺激分子(例如细胞因子或TLR配体)组成。此时，几乎所有疫苗均含有共享的肿瘤抗原或全肿瘤细胞制剂(Gilboa,1999)。共享的肿瘤抗原是跨越多个个体在肿瘤中具有选择性表达的免疫原性蛋白，并通常以合成肽或重组蛋白形式递送至患者(Boon等人,2006)。相反，全肿瘤细胞制剂以自体照射细胞、细胞裂解物、细胞融合、热休克蛋白制剂或总mRNA形式递送至患者(Parmiani等人,2007)。因为全肿瘤细胞由患者分离，该细胞表达患者特异性肿瘤抗原以及共享的肿瘤抗原。最后，存在第三类肿瘤抗原，该抗原由于识别它们的技术困难而极少用于疫苗(Sensi等人,2006)。这一类由具有导致改变的氨基酸序列的肿瘤特异性突变的蛋白组成。此类突变蛋白具有以下潜力：(a)独特地标记肿瘤(相对于非肿瘤细胞)以便通过免疫系统识别和破坏(Lennerz等人,2005)；(b)避免中枢和有时的外周T细胞耐受，并由此被更有效的高亲和力T细胞受体识别(Gotter等人,2004)。概述本专利技术提供了通过引发针对MIC多肽的免疫响应来治疗受试者的癌症的组合物与方法。本文中所用的术语“MIC”指的是MICA和/或MICB。在一个实施方案中，本专利技术提供了用于治疗癌症的疫苗组合物，该组合物包含有效量的含有SEQIDNO1-23的一种或更多种或由其组成的肽作为免疫原性组分，所述有效量是有效引发针对MIC多肽或癌症的免疫响应的量。在另一实施方案中，该疫苗组合物包含有效量的含有SEQIDNO1-4或2-4的一种或更多种、SEQIDNO5-7的一种或更多种、SEQIDNO8-10的一种或更多种、或SEQIDNO5-13的一种或更多种或由其组成的肽作为免疫原性组分。在另一实施方案中，该疫苗组合物包含有效量的含有SEQIDNO14-23的一种或更多种、SEQIDNO15-23的一种或更多种、SEQIDNO18-23的一种或更多种、或SEQIDNO21-23的一种或更多种或由其组成的肽作为免疫原性组分。在一个实施方案中，该疫苗组合物有效引发针对MIC多肽的体外免疫响应。在另一实施方案中，该疫苗组合物有效引发针对MIC多肽的体内免疫响应。在一个实施方案中，该免疫响应针对未附着于细胞的MIC多肽，也称为可溶性MIC多肽。该可溶性MIC可以为单体形式或多聚体形式。在另一实施方案中，该免疫响应针对表达MIC多肽的癌细胞。该癌细胞可以是体外或体内的。在一个实施方案中，该疫苗组合物有效引发针对表达MIC多肽的癌细胞的免疫响应。该本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于治疗癌症的疫苗组合物，所述组合物包含有效量的包含SEQ ID NO: 1‑13的一种或更多种或由其组成的肽作为免疫原性组分，所述有效量是有效引发针对MIC多肽或所述癌症的免疫响应的量。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.03.14 US 61/9530641.用于治疗癌症的疫苗组合物，所述组合物包含有效量的包含SEQIDNO:1-13的一种或更多种或由其组成的肽作为免疫原性组分，所述有效量是有效引发针对MIC多肽或所述癌症的免疫响应的量。2.权利要求1所述的疫苗组合物，其中所述组合物有效引发针对MIC多肽的体外免疫响应。3.权利要求1所述的疫苗组合物，其中所述组合物有效引发针对MIC多肽的体内免疫响应。4.权利要求1所述的疫苗组合物，其中所述MIC多肽未附着到细胞上。5.权利要求1所述的疫苗组合物，其中所述组合物有效引发针对表达MIC多肽的癌细胞的免疫响应。6.权利要求1所述的疫苗组合物，其中所述MIC多肽是MICA或MICB多肽。7.权利要求1所述的疫苗组合物，其中所述癌症表达MICA和/或MICB蛋白。8.权利要求1所述的疫苗组合物，其中所述癌症是黑素瘤。9.权利要求1所述的疫苗组合物，其中所述肽包含以下或由以下组成：一种或更多种的SEQIDNO2-13、或SEQIDNO:15-23，或与其任意一种具有90%或95%的氨基酸序列同一性的肽。10.权利要求1所述的疫苗组合物，其中所述疫苗组合物包含多种肽，所述肽选自两种或更多种的SEQIDNO5-10、或SEQIDNO:15-20，或与其任意一种具有95%的氨基酸序列同一性的肽；或选自两种或更多种的SEQIDNO2-13、或SEQIDNO:21-23，或与其...

【专利技术属性】
技术研发人员：G德拉诺夫，KW乌彻尔普芬宁，C哈维，FS霍迪，
申请(专利权)人：达纳法伯癌症研究所公司，
类型：发明
国别省市：美国;US