一种复合微生物笋肥及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种复合微生物笋肥及其制备方法，具体是一种针对毛竹专用的复合微生物笋肥及其制备方法。该微生物笋肥的原料由深褐芽孢杆菌菌粉，赖氨酸芽孢杆菌菌粉，瑞格链霉菌,菌粉，秋田链霉菌菌粉，淡黄木霉菌粉，黄腐酸钾，氨基酸原粉；本发明专利技术中所使用的这5株菌株都是可从土壤中直接分离得到，都具有根迹促生作用，具有解磷，固氮，解钾作用，可在作物表面、植株内部或土壤中繁殖生长的同时，并定向植物根际分泌某些次生代谢产物，能够提高植物对养分的吸收、刺激植株生长起到肥料的效果；本发明专利技术微生物笋肥对人、畜安全，属于环境友好型，本发明专利技术制备方法简单、成本低、使用简单。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物肥料
，具体涉及一种复合微生物笋肥及其制备方法。
技术介绍
我国毛竹面积386.83万hm2，占全国竹林总面积的71.89%,森林总面积的2.13%，对于南方集体林区的生态建设和“三农”增收有重要的意义，施肥作为毛竹林培育的重要技术措施得到更广泛应用。从竹林对不同养分的需求来看，毛竹对氮的需要量比较多，但土壤中氮的含量却很低。毛竹对磷的需要量虽然比氮少，但土壤供给量也很少，许多土壤特别是红壤地区土壤磷含量较低。K通常在土壤中含量较丰富，但也有土壤局部缺K现象。施肥一般都是以氮、磷、钾肥为主。从肥料的作用效果来看，有机肥与微生物笋肥长期施用可以改良土壤结构，增加土壤通气性和保水能力，而复合肥和无机肥能直接被根或叶面吸收，虽然见效快，但长期施用或施用不当，易造成地力衰退而使作物减产、品质恶化或对生态环境产生不良影响。因而在过去的几十年中，大多数学者对毛竹施肥的研究大部分集中在氮、磷、K三要素上，有关微生物肥在毛竹上的应用的研究报导较少。专门针对毛竹的微生物笋肥则未见报道。
技术实现思路
本专利技术所要解决的问题是研制出一种复合微生物笋肥，制备该复合微生物笋肥的原料按重量份为：深褐芽孢杆菌菌粉10-30份，赖氨酸芽孢杆菌菌粉20-40份，瑞格链霉菌菌粉20-40份，秋田链霉菌菌粉10-30份，淡黄木霉菌粉20-40份，黄腐酸钾20-60份，氨基酸原粉10-30份；该笋肥复配的菌种特点主要是适应性强，稳定性好，能共生共存，合理利用微生物间的相互作用，配备高技术的生产发酵技术生产出优质的产品。本专利技术中所使用的这5株菌株都是可从土壤中直接分离得到，都具有根迹促生作用，具有解磷，固氮，解钾作用，可在毛竹根，茎，叶表面或土壤中繁殖生长的同时，并定向毛竹根际分泌某些次生代谢产物，能够提高毛竹对养分的吸收、刺激其生长起到肥料的效果；本专利技术微生物笋肥对人、畜安全，属于环境友好型，本专利技术制备方法简单、使用成本低、使用简单。另一个目的，提供了一种复合微生物笋肥的制备方法，其具体制备方法，包括以下步骤：步骤一、深褐芽孢杆菌菌粉的制备取出深褐芽孢杆菌保藏管，用营养肉汁固体培养基分别划平板进行复苏，30℃培养48小时。在平板下挑取单个菌落接种至装有营养肉汁固体培养基，在30℃培养箱中培养48小时，用3000ml无菌水将三个茄子瓶中的菌苔洗脱，接种至装有300L深褐芽孢杆菌液体种子培养基的500L发酵罐中，开搅拌120r/min，前12小时通气量为200L/min，12小时后通气量为320L/min，30℃培养16-24小时，待总菌含量不低于10亿cfu/ml，即可作为深褐芽孢杆菌液体种子；发酵：将上述制备的深褐芽孢杆菌液体种子加至深褐芽孢杆菌固体发酵培养基中，混匀，在浅盘上发酵，堆料厚度为5-10cm，控制发酵温度为30-40℃，发酵36-48小时，待芽孢含量不低于50亿cfu/g，即可晒干，待水分含量低于10%，粉碎过40目筛，即得到深褐芽孢杆菌菌粉；其中，所述营养肉汁固体培养基：蛋白胨5g，牛肉膏3g，氯化钠5g，琼脂20g，水1000mL，pH7.2；其中，所述深褐芽孢杆菌液体种子培养基：葡萄糖8g/L，玉米粉10g/L，豆粉10g/L，硫酸镁0.2g/L，硫酸锰0.1g/L，磷酸二氢钾0.5g/L，磷酸氢二钠1.0g/L，pH7.0。各培养基灭菌的条件为：0.10-0.15MPa，121℃灭菌30分钟；其中，深褐芽孢杆菌固体发酵培养基：啤酒糟60%，玉米皮35%，菜粕粉2%，石粉3%，尿素0.4%，磷酸氢二钾0.4%，硫酸镁0.05%，硫酸锰0.01%，培养基含水量50%-60%。各培养基灭菌的条件为：0.10-0.15MPa，121℃灭菌30分钟。步骤二、赖氨酸芽孢杆菌菌粉的制备取出赖氨酸芽孢杆菌保藏管，用无氮固体培养基分别划平板进行复苏，30℃培养72小时。在平板下挑取单个菌落接种至装有无氮固体培养基，在30℃培养箱中培养72小时，用3000ml无菌水将三个茄子瓶中的菌苔洗脱，接种至装有300L赖氨酸芽孢杆菌种子培养基的500L发酵罐中，开搅拌120r/min，前8小时通气量为100L/min，8-24小时后通气量为200L/min，24小时后通气量为300L/min，30℃培养32-48小时，待总菌数含量不低于20亿cfu/ml，即可作为赖氨酸芽孢杆菌种子液；发酵：将上述制备的赖氨酸芽孢杆菌种子液以10%-20%的比例接种至赖氨酸芽孢杆菌固体培养基上，混匀，在浅盘上发酵，堆料厚度为5-10cm，控制发酵温度为30-40℃，发酵36-48小时，待芽孢含量不低于50亿cfu/g，即可晒干，待水分含量低于10%，粉碎过100目筛，即得到赖氨酸芽孢杆菌菌粉；其中，所述无氮固体培养基：蔗糖10g，磷酸氢二钾0.2g，硫酸镁0.2g，氯化钠0.2g，硫酸钙0.1g，碳酸钙5g，琼脂18g，蒸馏水1000mL，pH7.2；其中，所述赖氨酸芽孢杆菌种子培养基：糖蜜20g/L，玉米淀粉10g/L，花生粕粉30g/L，硫酸镁0.4g/L，硫酸锰0.6g/L，磷酸二氢钾0.6g/L，碳酸钙10g/L，pH7.0。各培养基灭菌的条件为：0.10-0.15MPa，121℃灭菌30分钟；赖氨酸芽孢杆菌固体培养基：玉米酒糟57%，麸皮35%，棉粕5%，石粉1%，粗玉米皮2%，尿素0.4%，磷酸氢二钾0.4%，硫酸镁0.05%，培养基含水量50%-60%。各培养基灭菌的条件为：0.10-0.15MPa，121℃灭菌30分钟。步骤三，瑞格链霉菌菌粉的制备取出瑞格链霉菌菌种保藏管，用高氏一号固体培养基划平板进行复苏，30℃培养7天。在平板下挑取单个菌落划线接种装有150毫升高氏一号固体培养基的茄子瓶中，在培养箱中30℃培养6-8天，待菌苔长满茄子瓶，产生大量孢子粉即可用500毫升的无菌生理盐水洗脱，调节孢子浓度为0.1亿cfu/ml，即为瑞格链霉菌种子液；发酵：将上述制备的瑞格链霉菌种子液以3%的接种量接种至灭菌的瑞格链霉菌固体发酵培养基上，菌种与瑞格链霉菌固体培养基混合均匀后，将接好种的瑞格链霉菌固体发酵培养基摊在发酵槽上，物料高度为3-6cm，控温28-32℃，第一天空气湿度保持为60%-75%，过后空气湿度保持为40%-50%，发酵3-4天，检测其孢子含量不低于20亿CFU/g，即可低温风干至水分低于8%，粉碎过40目筛，即得到瑞格链霉菌菌粉；其中，所述的高氏一号固体培养基：硝酸钾：1克，可溶性淀粉：20克，磷酸氢二钾：0﹒5克，硫酸镁：0﹒5克，氯化钠：0﹒5克，硫酸亚铁：0﹒01克，琼脂：20克，蒸馏水补足1000ml，PH7﹒2～7﹒4；其中，所述的瑞格链霉菌固体发酵培养基：甘蔗渣80%，豆粕2%，玉米芯粉1%，石粉10%，麸皮7%，硫酸锰0.004%，磷酸氢二钾0.1%，硫酸镁0.05%，固体培养基含水量为40%-60%。各培养基灭菌的条件为：0.10-0.15MPa，121℃灭菌30分钟。步骤四，秋田链霉菌菌粉的制备取出秋田链霉菌菌种保藏管，用高氏一号固体培养基划平板进行复苏，30℃培养7天。在平板下挑取单个菌落划线接种装有150毫升高氏一号固体培养基的茄本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种复合微生物笋肥，其特征在于，制备该复合微生物笋肥的原料按重量份为：深褐芽孢杆菌菌粉10‑30份，赖氨酸芽孢杆菌菌粉20‑40份，瑞格链霉菌菌粉20‑40份，秋田链霉菌菌粉10‑30份，淡黄木霉菌粉20‑40份，黄腐酸钾20‑60份，氨基酸原粉10‑30份；其具体制备方法，包括以下步骤：步骤一、深褐芽孢杆菌菌粉的制备取出深褐芽孢杆菌保藏管，用营养肉汁固体培养基分别划平板进行复苏，30℃培养48小时，在平板下挑取单个菌落接种至装有营养肉汁固体培养基，在30℃培养箱中培养48小时，用3000ml无菌水将三个茄子瓶中的菌苔洗脱，接种至装有300L深褐芽孢杆菌液体种子培养基的500L发酵罐中，开搅拌120r/min，前12小时通气量为200L/min，12小时后通气量为320L/min ，30℃培养16‑24小时，待总菌含量不低于10亿cfu/ml，即可作为深褐芽孢杆菌液体种子；发酵：将上述制备的深褐芽孢杆菌液体种子加至深褐芽孢杆菌固体发酵培养基中，混匀，在浅盘上发酵，堆料厚度为5‑10cm，控制发酵温度为30‑40℃，发酵36‑48小时，待芽孢含量不低于50亿cfu/g，即可晒干，待水分含量低于10%，粉碎过40目筛，即得到深褐芽孢杆菌菌粉；其中，所述营养肉汁固体培养基：蛋白胨5g，牛肉膏3g，氯化钠5g，琼脂20 g，水1000mL，pH7.2 %；其中，所述深褐芽孢杆菌液体种子培养基：葡萄糖8g/L，玉米粉10 g/L， 豆粉10 g/L，硫酸镁0.2 g/L，硫酸锰0.1 g/L，磷酸二氢钾0.5 g/L，磷酸氢二钠1.0 g/L，pH7.0；其中，深褐芽孢杆菌固体发酵培养基：啤酒糟60%， 玉米皮35%，菜粕粉2%，石粉3%，尿素0.4%，磷酸氢二钾0.4%，硫酸镁0.05%，硫酸锰0.01%，培养基含水量50%‑60%，各培养基灭菌的条件为：0.10‑0.15MPa，121℃灭菌30分钟；步骤二、赖氨酸芽孢杆菌菌粉的制备取出赖氨酸芽孢杆菌保藏管，用无氮固体培养基分别划平板进行复苏，30℃培养72小时，在平板下挑取单个菌落接种至装有无氮固体培养基，在30℃培养箱中培养72小时，用3000ml无菌水将三个茄子瓶中的菌苔洗脱，接种至装有300L赖氨酸芽孢杆菌种子培养基的500L发酵罐中，开搅拌120r/min，前8小时通气量为100L/min，8‑24小时后通气量为200L/min ，24小时后通气量为300L/min ，30℃培养32‑48小时，待总菌数含量不低于20亿cfu/ml，即可作为赖氨酸芽孢杆菌种子液；发酵：将上述制备的赖氨酸芽孢杆菌种子液以10%‑20%的比例接种至赖氨酸芽孢杆菌固体培养基上，混匀，在浅盘上发酵，堆料厚度为5‑10cm，控制发酵温度为30‑40℃，发酵36‑48小时，待芽孢含量不低于50亿cfu/g，即可晒干，待水分含量低于10%，粉碎过100目筛，即得到赖氨酸芽孢杆菌菌粉；其中，所述无氮培养基：蔗糖10g，磷酸氢二钾0.2g，硫酸镁0.2g，氯化钠0.2g，硫酸钙0.1g，碳酸钙5g，琼脂18g，蒸馏水1000mL，pH7.2；其中，所述赖氨酸芽孢杆菌种子培养基：糖蜜20g/L，玉米淀粉10 g/L， 花生粕粉30 g/L，硫酸镁0.4 g/L，硫酸锰0.6g/L，磷酸二氢钾0.6 g/L，碳酸钙10 g/L， pH7.0，各培养基灭菌的条件为：0.10‑0.15MPa，121℃灭菌30分钟；赖氨酸芽孢杆菌固体培养基：玉米酒糟57%，麸皮35%，棉粕5%，石粉1%，粗玉米皮2%，尿素0.4%，磷酸氢二钾0.4%，硫酸镁0.05%，培养基含水量50%‑60%，各培养基灭菌的条件为：0.10‑0.15MPa，121℃灭菌30分钟 ；步骤三，瑞格链霉菌菌粉的制备取出瑞格链霉菌菌种保藏管，用高氏一号固体培养基划平板进行复苏，30℃培养7天，在平板下挑取单个菌落划线接种装有150毫升高氏一号固体培养基的茄子瓶中，在培养箱中30℃培养6‑8天，待菌苔长满茄子瓶，产生大量孢子粉即可用500毫升的无菌生理盐水洗脱，调节孢子浓度为0.1亿cfu/ml，即为瑞格链霉菌种子液；发酵：将上述制备的瑞格链霉菌种子液以3%的接种量接种至灭菌的瑞格链霉菌固体发酵培养基上，菌种与瑞格链霉菌固体培养基混合均匀后，将接好种的瑞格链霉菌固体发酵培养基摊在发酵槽上，物料高度为3‑6cm，控温28‑32℃，第一天空气湿度保持为60%‑75%，过后空气湿度保持为40%‑50%，发酵3‑4天，检测其孢子含量不低于20亿CFU/g，即可低温风干至水分低于8%，粉碎过40目筛，即得到瑞格链霉菌菌粉；其中，所述的高氏一号固体培养基：硝酸钾：1克，可溶性淀粉：20克，磷酸氢二钾：0.5克，硫酸镁：0.5克，氯化钠：0.5克，硫酸亚铁：0.01克，琼...

【技术特征摘要】
1.一种复合微生物笋肥，其特征在于，制备该复合微生物笋肥的原料按重量份为：深褐芽孢杆菌菌粉10-30份，赖氨酸芽孢杆菌菌粉20-40份，瑞格链霉菌菌粉20-40份，秋田链霉菌菌粉10-30份，淡黄木霉菌粉20-40份，黄腐酸钾20-60份，氨基酸原粉10-30份；其具体制备方法，包括以下步骤：步骤一、深褐芽孢杆菌菌粉的制备取出深褐芽孢杆菌保藏管，用营养肉汁固体培养基分别划平板进行复苏，30℃培养48小时，在平板下挑取单个菌落接种至装有营养肉汁固体培养基，在30℃培养箱中培养48小时，用3000ml无菌水将三个茄子瓶中的菌苔洗脱，接种至装有300L深褐芽孢杆菌液体种子培养基的500L发酵罐中，开搅拌120r/min，前12小时通气量为200L/min，12小时后通气量为320L/min，30℃培养16-24小时，待总菌含量不低于10亿cfu/ml，即可作为深褐芽孢杆菌液体种子；发酵：将上述制备的深褐芽孢杆菌液体种子加至深褐芽孢杆菌固体发酵培养基中，混匀，在浅盘上发酵，堆料厚度为5-10cm，控制发酵温度为30-40℃，发酵36-48小时，待芽孢含量不低于50亿cfu/g，即可晒干，待水分含量低于10%，粉碎过40目筛，即得到深褐芽孢杆菌菌粉；其中，所述营养肉汁固体培养基：蛋白胨5g，牛肉膏3g，氯化钠5g，琼脂20g，水1000mL，pH7.2%；其中，所述深褐芽孢杆菌液体种子培养基：葡萄糖8g/L，玉米粉10g/L，豆粉10g/L，硫酸镁0.2g/L，硫酸锰0.1g/L，磷酸二氢钾0.5g/L，磷酸氢二钠1.0g/L，pH7.0；其中，深褐芽孢杆菌固体发酵培养基：啤酒糟60%，玉米皮35%，菜粕粉2%，石粉3%，尿素0.4%，磷酸氢二钾0.4%，硫酸镁0.05%，硫酸锰0.01%，培养基含水量50%-60%，各培养基灭菌的条件为：0.10-0.15MPa，121℃灭菌30分钟；步骤二、赖氨酸芽孢杆菌菌粉的制备取出赖氨酸芽孢杆菌保藏管，用无氮固体培养基分别划平板进行复苏，30℃培养72小时，在平板下挑取单个菌落接种至装有无氮固体培养基，在30℃培养箱中培养72小时，用3000ml无菌水将三个茄子瓶中的菌苔洗脱，接种至装有300L赖氨酸芽孢杆菌种子培养基的500L发酵罐中，开搅拌120r/min，前8小时通气量为100L/min，8-24小时后通气量为200L/min，24小时后通气量为300L/min，30℃培养32-48小时，待总菌数含量不低于20亿cfu/ml，即可作为赖氨酸芽孢杆菌种子液；发酵：将上述制备的赖氨酸芽孢杆菌种子液以10%-20%的比例接种至赖氨酸芽孢杆菌固体培养基上，混匀，在浅盘上发酵，堆料厚度为5-10cm，控制发酵温度为30-40℃，发酵36-48小时，待芽孢含量不低于50亿cfu/g，即可晒干，待水分含量低于10%，粉碎过100目筛，即得到赖氨酸芽孢杆菌菌粉；其中，所述无氮培养基：蔗糖10g，磷酸氢二钾0.2g，硫酸镁0.2g，氯化钠0.2g，硫酸钙0.1g，碳酸钙5g，琼脂18g，蒸馏水1000mL，pH7.2；其中，所述赖氨酸芽孢杆菌种子培养基：糖蜜20g/L，玉米淀粉10g/L，花生粕粉30g/L，硫酸镁0.4g/L，硫酸锰0.6g/L，磷酸二氢钾0.6g/L，碳酸钙10g/L，pH7.0，各培养基灭菌的条件为：0.10-0.15MPa，121℃灭菌30分钟；赖氨酸芽孢杆菌固体培养基：玉米酒糟57%，麸皮35%，棉粕5%，石粉1%，粗玉米皮2%，尿素0.4%，磷酸氢二钾0.4%，硫酸镁0.05%，培养基含水量50%-60%，各培养基灭菌的条件为：0.10-0.15MPa，121℃灭菌30分钟；步骤三，瑞格链霉菌菌粉的制备取出瑞格链霉菌菌种保藏管，用高氏一号固体培养基划平板进行复苏，30℃培养7天，在平板下挑取单个菌落划线接种装有150毫升高氏一号固体培养基的茄子瓶中，在培养箱中30℃培养6-8天，待菌苔长满茄子瓶，产生大量孢子粉即可用500毫升的无菌生理盐水洗脱，调节孢子浓度为0.1亿cfu/ml，即为瑞格链霉菌种子液；发酵：...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋常德，胡艳晖，
申请(专利权)人：佛山市艳晖生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44