纤维症预防或者治疗剂制造技术

本发明专利技术提供对治疗纤维症有效的siRNA和使用了它的医药品。一种siRNA，其以选自序列号1中的碱基序号为1285～1318号的碱基、1398～1418号的碱基、1434～1463号的碱基、1548～1579号的碱基、1608～1628号的碱基、1700～1726号的碱基、1778～1798号的碱基以及1887～1907号的碱基中的连续的17～23个碱基为靶序列，全长为30个核苷酸以下。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术专利申请是针对申请日为2011年10月14日、申请号为201180044862.9、专利技术名称为“纤维症预防或者治疗剂”的申请提出的分案申请。
本专利技术涉及纤维症治疗剂。具体而言，涉及以编码转化生长因子(TGF)-β1的基因为靶的小干扰RNA(siRNA)和使用了它的医药品。
技术介绍
肺纤维症是指由于过量的胶原和其它细胞外基质的蓄积而导致肺组织纤维化的症状。在肺纤维症中，特发性肺纤维症是中位生存期平均为3年、5年生存率为20～40％的预后不良的慢性难治性疾病。作为肺纤维症的治疗，可使用类固醇药物、免疫抑制剂，但目前没有可改善预后这样的有效的治疗法，因此需要开发新的治疗药。近年来，逐渐清楚许多疾病是由于基因而发病的，关于肺纤维症，也报告了许多基因的参与(专利文献1～4、非专利文献1～6)。作为参与肺纤维症的主要因子，报告有TGF-β1(专利文献1～2、非专利文献2～6)、Smad3(非专利文献1)、MCP-1(专利文献3)等。另一方面，核酸特别是siRNA引起与细胞中存在的特定序列相同或者几乎相同的基因的mRNA的降解，阻碍靶基因的表达(RNA干扰)。因此，由RNA干扰所产生的阻碍靶基因表达的功能在减少或治疗由特定的基因或基因组的异常表达所引起的疾病症状方面是有用的。关于肺纤维症相关基因，也进行了使用siRNA来尝试抑制该基因的表达的报告(专利文献1～4、非专利文献1～6)。然而，至今为止报告的技术仅显示了siRNA序列对实验动物(小鼠、大鼠)的疾病相关基因的抑制效果，而对人类基因没有充分地显示出特异的效果。另外，关于siRNA的抑制效果，也仅显示出在200nM(非专利文献1)、20～500nM(非专利文献5)的效果，并没有示出在低浓度下可效率良好抑制肺纤维症相关基因的表达的核酸分子。关于以TGF-β1基因为靶的siRNA，至今为止报告有数十种siRNA(专利文献1、5～7)，但TGF-β1的基因的全长为2346个碱基(GenBank Accession No.NM_000660.3)，从该基因的全长选出约20mer左右的序列的组合存在无数个，因此并不容易从中设计出可效率良好抑制该基因的表达的dsRNA、siRNA分子。专利文献专利文献1：国际公开第2007/109097号小册子专利文献2：国际公开第2003/035083号小册子专利文献3：日本特开2007-119396号公报专利文献4：日本特表2009-516517号公报专利文献5：国际公开第2009/061417号小册子专利文献6：国际公开第2008/109548号小册子专利文献7：国际公开第2007/79224号小册子非专利文献非专利文献1：Wang Z,Gao Z,Shi Y,Sun Y,Lin Z,Jiang H,Hou T,Wang Q,Yuan X,Zhu X,Wu H,Jin Y,J Plast Reconstr Aesthet Surg,1193-1199,60,2007非专利文献2：Hwang M,Kim HJ,Noh HJ,Chang YC,Chae YM,Kim KH,Jeon JP,Lee TS,Oh HK,Lee YS,Park KK,Exp Mol Pathol,48-54,81,2006非专利文献3：Takabatake Y,Isaka Y,Mizui M,Kawachi H,Shimizu F,Ito T,Hori M,Imai E,Gene Ther,965-973,12,2005非专利文献4：Xu W,Wang LW,Shi JZ,Gong ZJ,Hepatobiliary Pancreat Dis Int,300-308,8,2009非专利文献5：Liu XJ,Ruan CM,Gong XF,Li XZ,Wang HL,Wang MW,Yin JQ,Biotechnol Lett,1609-1615,27,2005非专利文献6：福元重太郎,末次彩子,原田知佳,河口知允,滨田直树,前山隆茂,桑野和善,中西洋一,日本呼吸器学会杂志,185,46,2008
技术实现思路
本专利技术涉及提供对治疗纤维症有效的siRNA和使用它的医药品的技术。本专利技术人等为了解决上述课题而进行了深入研究，结果发现以人类TGF-β1基因为靶的特定的siRNA在人体细胞中能够有效地抑制TGF-β1的表达，进而在肺纤维症模型小鼠的肺中，能够在不诱导干扰素反应的情况下，改善肺纤维症的症状。即，本专利技术涉及以下1)～19)的内容。1)一种siRNA，以选自序列号1中的碱基序号为1285～1318号的碱基、1398～1418号的碱基、1434～1463号的碱基、1548～1579号的碱基、1608～1628号的碱基、1700～1726号的碱基、1778～1798号的碱基、1806～1826号的碱基以及1887～1907号的碱基中的连续的17～23个碱基为靶序列，全长为30个核苷酸以下。2)根据上述1)的siRNA，其中，siRNA选自以下(a)～(s)。(a)由序列号2所示的正义序列和序列号3所示的反义序列形成的siRNA(b)由序列号4所示的正义序列和序列号5所示的反义序列形成的siRNA(c)由序列号6所示的正义序列和序列号7所示的反义序列形成的siRNA(d)由序列号8所示的正义序列和序列号9所示的反义序列形成的siRNA(e)由序列号10所示的正义序列和序列号11所示的反义序列形成的siRNA(f)由序列号12所示的正义序列和序列号13所示的反义序列形成的siRNA(g)由序列号14所示的正义序列和序列号15所示的反义序列形成的siRNA(h)由序列号16所示的正义序列和序列号17所示的反义序列形成的siRNA(i)由序列号18所示的正义序列和序列号19所示的反义序列形成的siRNA(j)由序列号20所示的正义序列和序列号21所示的反义序列形成的siRNA(k)由序列号22所示的正义序列和序列号23所示的反义序列形成的siRNA(l)由序列号24所示的正义序列和序列号25所示的反义序列形成的siRNA(m)由序列号26所示的正义序列和序列号27所示的反义序列形成的siRNA(n)由序列号28所示的正义序列和序列号29所示的反义序列形成的siRNA(o)由序列号30所示的正义序列和序列号31所示的反义序列形成的siRNA(p)由序列号32所示的正义序列和序列号33所示的反义序列形成的siRNA(q)由序列号34所示的正义序列和序列号35所示的反义序列形成的siRNA(r)由序列号36所示的正义序列和序列号37所示的反义序列形成的siRNA(s)由序列号54所示的正义序列和序列号55所示的反义序列形成的siRNA3)根据上述1)或2)的siRNA，其中，从上述siRNA的正义链的3’末端的末端侧起除去悬突核苷酸的连续的1～10个核苷酸被转换成DNA。4)根据上述1)～3)的siRNA，其中，从上述siRNA的反义链的5’末端的末端侧起连续的1～10个核苷酸被转换成DNA。5)根据上述1)～4)的siRNA，其中，从上述siRNA的正义链的3’末端的末端侧起除去悬突核苷酸的连续的1～10个核苷酸被转换成DNA，且从反义链的5’末端的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种siRNA，其以选自序列号1中的碱基序号为1285～1318号的碱基、1398～1418号的碱基、1434～1463号的碱基、1548～1579号的碱基、1608～1628号的碱基、1700～1726号的碱基、1778～1798号的碱基以及1887～1907号的碱基中的连续的17～23个碱基为靶序列，全长为30个核苷酸以下。

【技术特征摘要】
2010.10.14 JP 2010-2319461.一种siRNA，其以选自序列号1中的碱基序号为1285～1318号的碱基、1398～1418号的碱基、1434～1463号的碱基、1548～1579号的碱基、1608～1628号的碱基、1700～1726号的碱基、1778～1798号的碱基以及1887～1907号的碱基中的连续的17～23个碱基为靶序列，全长为30个核苷酸以下。2.siRNA在制造肺纤维症或肺癌的预防或者治疗剂中的应用，其中，所述siRNA选自以下(a)～(s)：(a)由序列号2所示的正义序列和序列号3所示的反义序列形成的siRNA(b)由序列号4所示的正义序列和序列号5所示的反义序列形成的siRNA(c)由序列号6所示的正义序列和序列号7所示的反义序列形成的siRNA(d)由序列号8所示的正义序列和序列号9所示的反义序列形成的siRNA(e)由序列号10所示的正义序列和序列号11所示的反义序列形成的siRNA(f)由序列号12所示的正义序列和序列号13所示的反义序列形成的siRNA(h)由序列号16所示的正义序列和序列号17所示的反义序列形成的siRNA(i)由序列号18所示的正义序列和序列号19所示的反义序列形成的siRNA(j)由序列号20所示的正义序列和序列号21所示的反义序列形成的siRNA(k)由序列号22所示的正义序列和序列号23所示的反义序列形成的siRNA(m)由序列号26所示的正义序列和序列号27所示的反义序列形成的siRNA(n)由序列号28所示的正义序列和序列号29所示的反义序列形成的siRNA(p)由序列号32所示的正义序列和序列号33所示的反义序列形成的siRNA(r)由序列号36所示的正义序列和序列号37所示的反义序列形成的siRNA(s)由序列号54所示的正义序列和序列号55所示的反义序列形成的siRNA。3.根据权利要求1所述的siRNA，其中，所述siRNA是从正义链的3’末端的末端侧起除去悬突核苷酸的连续的1～10个核苷酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：埃斯特班·C·加巴扎，小林哲，丰福秀一，福田绫子，长谷川哲也，
申请(专利权)人：国立大学法人三重大学，大塚制药株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP