一种基于NIR光谱技术的灵芝多糖定量方法技术

技术编号:14274038 阅读:118 留言:0更新日期:2016-12-23 18:40
本发明专利技术公开了一种基于NIR光谱技术的灵芝多糖定量方法,制备灵芝菌丝体干粉;对灵芝菌丝体干粉建立校正集和验证集;对于校正集的灵芝菌丝体干粉,利用硫酸蒽酮法进行多糖测定;对校正集和验证集的灵芝菌丝体干粉进行NIR检测;进行矢量归一化后,选定一阶导数作为建模预处理方式;利用校正集的硫酸蒽酮法测量结果和测量光谱构建定量模型,选择波数范围为4900~4667cm‑1和4553~4000cm‑1,将验证集的测量的光谱导入上述多糖分析模型,对照利用硫酸蒽酮法测定的结果,利用所构建的模型进行结果预测。本发明专利技术利用NIR光谱技术,结合硫酸蒽酮法测定的结果,对液体发酵的灵芝菌丝体多糖含量构建数学模型,以便建立基于NIR光谱技术的灵芝菌丝体发酵多糖定量方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种农业发酵技术,尤其涉及的是一种基于NIR光谱技术的灵芝多糖定量方法
技术介绍
灵芝(Ganoderma Lucidum)为担子菌亚门、层菌纲、多孔菌目、非褶菌科、灵芝属的子实体,为比较名贵的传统中草药。其中,灵芝多糖对肿瘤、免疫性疾病、高血糖、细胞衰老有治疗能力。灵芝中分离出来的灵芝三萜类物质及其衍生物有80多种,现代药理研究表明,灵芝三萜类化合物具有保肝、抗肿瘤、抗氧化、抑制血管紧张素、抗HIV病毒活性等作用。灵芝多糖具有抗肿瘤,调节免疫,保肝,调节血糖等作用。灵芝多糖因其具有的药用功能,一直受到广泛关注。其中常用的灵芝多糖生产方法为发酵法。通过发酵获得大量的灵芝菌丝体,从中提取获得灵芝多糖。对灵芝多糖测定的常用方法为分光光度法,如硫酸蒽酮法和硫酸苯酚法。但无论上述哪种方法都涉及大量化学试剂的使用,易造成环境污染;实验操作相对复杂;只能对单一成分进行检测。无法实现快速、多成分、无污染的实时检测。相比之下,NIR光谱法检测具有多方面的优势,适于灵芝多糖的快速定量分析。近红外光是指波长在780~2526nm的电磁波。应用近红外(Near Infrared,NIR)本文档来自技高网...
一种基于NIR光谱技术的灵芝多糖定量方法

【技术保护点】
一种基于NIR光谱技术的灵芝多糖定量方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)利用发酵方式获得灵芝菌丝体,并制备灵芝菌丝体干粉;(2)对于灵芝菌丝体干粉,利用硫酸蒽酮法进行多糖测定;(3)并对灵芝菌丝体干粉进行NIR检测,波数范围为12500~4000cm‑1,并收集光谱数据;(4)将测量光谱在12500~9000cm‑1范围内截除,保留9000~4000cm‑1光谱范围,进行矢量归一化后,选定一阶导数作为建模预处理方式;(5)建立校正集和验证集,利用校正集的硫酸蒽酮法测量结果和测量光谱构建定量模型,对灵芝多糖进行提取和纯化,并对灵芝浸提沉淀、灵芝浸提后上清液、灵芝上清液浓缩后粗多糖、醇沉复溶后的...

【技术特征摘要】
1.一种基于NIR光谱技术的灵芝多糖定量方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)利用发酵方式获得灵芝菌丝体,并制备灵芝菌丝体干粉;(2)对于灵芝菌丝体干粉,利用硫酸蒽酮法进行多糖测定;(3)并对灵芝菌丝体干粉进行NIR检测,波数范围为12500~4000cm-1,并收集光谱数据;(4)将测量光谱在12500~9000cm-1范围内截除,保留9000~4000cm-1光谱范围,进行矢量归一化后,选定一阶导数作为建模预处理方式;(5)建立校正集和验证集,利用校正集的硫酸蒽酮法测量结果和测量光谱构建定量模型,对灵芝多糖进行提取和纯化,并对灵芝浸提沉淀、灵芝浸提后上清液、灵芝上清液浓缩后粗多糖、醇沉复溶后的灵芝多糖粗提液、除蛋白后的灵芝多糖粗提液和透析后的灵芝多糖粗提液六种冻干样品分别进行NIR测定,根据光谱谱线收敛情况选择波数范围为4900~4667cm-1和4553~4000cm-1,建立基于偏最小二乘的多糖分析模型;(6)将验证集的测量的光谱导入上述多糖分析模型,对照利用硫酸蒽酮法测定的结果,利用所构建的模型进行结果预测。2.根据权利要求1所述的一种基于NIR光谱技术的灵芝多糖定量方法,其特征在于,所述步骤(1)中,制备灵芝菌丝体干粉的具体过程如下:将灵芝菌种取0.5cm2小块,接种于灭菌的马铃薯葡萄糖液体培养基中,28℃,180rpm摇床发酵培养,至菌丝体长满培养液,将菌丝体取出,4000rpm离心5min,弃上清,保留沉淀,即菌丝体,用无菌ddH2O清洗菌丝体,并离心2次,将菌丝体置于60℃下干燥,干燥后用研钵研磨成均匀干粉末,备用。3.根据权利要求2所述的一种基于NIR光谱技术的灵芝多糖定量方法,其特征在于,利用发酵方式获得灵芝菌丝体提取灵芝多糖的具体过程如下:取样品粉末2g,置于烧瓶中,加水60ml,80℃水浴加热1h,加热提取3h,5000rpm离心8min,保留上清,沉淀搅开,加水60ml,80℃水浴加热2小时,5000rpm离心8min,合并上清,置于水浴上蒸干,残渣加5ml ddH2O溶解,边搅拌边缓慢滴加无...

【专利技术属性】
技术研发人员:黄青马玉涵
申请(专利权)人:中国科学院合肥物质科学研究院
类型:发明
国别省市:安徽;34

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