利用鱼的CAT活性检测水体污染程度的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用鱼的过氧化氢酶(CAT)活性检测水体污染程度的方法。本方法通过获取需要检测的水域中的鱼，并采用所述鱼的CAT作为敏感生物标记物，实现检测待测水体的污染。本方法利用鱼的CAT作为敏感生物标记物，可敏感地监测镉等重金属污染、菲(Phe)等多环芳烃污染及多氯联苯(PCB)污染的污染程度和危害程度，为水体生态环境监测、毒理诊断、调控和防治提供准确、快速的科学方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及利用生物敏感标志物检测水体污染，更具体地说，本专利技术涉及一种利用鱼的过氧化氢酶(CAT)活性检测水体污染程度的方法。
技术介绍
随着城镇化和工农业的迅猛发展，水体污染日益加剧。水域中的水体污染物也各有不同，有的为单一污染物，也有多种污染物混合污染。对于未知水域中，不管是单一污染物的污染，还是多种污染物的污染，怎样获悉水体是否被污染，甚至知道其污染程度，并能直观判断该水域的污染对生物的危害已达到何种程度。对于水体中受到重金属或菲一种或两种污染时，用化学方法可以定性、定量检测到污染，但是无法检测其危害性和危害程度以及污染程度的准确性。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是解决至少上述问题和/或缺陷，并提供至少后面将说明的优点。本专利技术还有一个目的就是提供一种利用鱼的过氧化氢酶活性检测水体污染程度的方法，本方法利用鱼的CAT作为敏感生物标记物，可敏感地监测镉等重金属污染的污染程度和危害程度，还可以敏感检测菲(Phe)等多环芳烃污染的污染程度和危害程度，为水体生态环境监测、毒理诊断、调控和防治提供准确、快速的科学方法。为了实现根据本专利技术的这些目的和其他优点，提供了一种利用鱼的CAT活性检测水体污染程度的方法。本检测方法为获取需要检测的水域中的鱼，并采用所述鱼的CAT作为敏感生物标记物。其中，CAT是过氧化氢酶的简写。优选的是，所述鱼的CAT活性与水体中重金属镉的浓度呈负相关。优选的是，所述鱼的CAT活性与水体中菲的浓度呈负相关。优选的是，所述鱼的CAT活性与水体中多氯联苯的浓度呈负相关。优选的是，建立鱼的CAT活性与污染物浓度关系的标准曲线，然后将待检测水域中的同种同大小的鱼的CAT活性与所述标准曲线比对，得到待检测水域中水体污染物浓度。优选的是，所述标准曲线为鱼的CAT活性与重金属镉浓度关系的曲线，或者鱼的CAT活性与菲浓度关系的曲线，或者鱼的CAT活性与多氯联苯浓度关系的曲线。优选的是，所述鱼的CAT活性测定包括如下步骤：步骤一、待测样本处理：制备全鱼匀浆，然后离心分层，取上层清液为待测样本；步骤二、待测样本蛋白浓度的测定：分别将等量的双蒸水、蛋白标准品和待测样本加入1、2、3号管中，并分别向各管加入等量的考马斯亮蓝显色剂，分别混匀，静置，预热，用分光光度计并用双蒸水调零后，于1cm光径，在波长595nm处，测定1、2、3号管中物质的光密度(OD)，分别记为1号OD值，2号OD值，3号OD值，然后代入如下公式计算得待测样本蛋白浓度：步骤三、在对照管和测定管中各加入试剂盒的同样量的试剂一和试剂二，然后在所述测定管中加入待测样本，混匀反应50-70秒；步骤四、在所述对照管和测定管中各加入试剂盒的同样量的试剂三和试剂四，然后在所述对照管中加入待测样本，混匀，用分光光度计并用双蒸水调零后，于0.5cm光径，405nm波长处分别测所述对照管和测定管的OD，分别记为对照OD值，测定OD值，其中取样量为加入对照管或测定管的待测样本的量，然后代入如下公式计算得鱼的过氧化氢酶活性：优选的是，所述步骤一中全鱼匀浆为全鱼与浓度0.65％的鱼用生理盐水按质量比为1:9配置，且所述离心分层用冷冻离心机，11028g，4℃，离心10min。优选的是，所述步骤二中等量的双蒸水、蛋白标准品和待测样本均为0.05ml，蛋白标准品的浓度为0.563g/L，分别加入考马斯亮蓝显色剂的量均为3ml，静置10min；所述步骤三中在对照管和测定管中各加入试剂盒的试剂一1ml和试剂二0.1ml，然后在所述测定管中加入浓度为1％的待测样本0.05ml，反应温度为37℃；所述步骤四中在所述对照管和测定管中各加入试剂盒的试剂三1ml和试剂四0.1ml，然后在所述对照管中加入浓度为1％的待测样本0.05ml。优选的是，所述鱼为海水青鳉或淡水青鳉。本专利技术至少包括以下有益效果：本专利技术以水域中鱼的CAT作为敏感生物标记物，通过对比CAT活性就可以检测出水体是否受到污染，不但检测准确和敏感，而且直观反映该水域的污染对生物的危害程度。特别是鱼的CAT活性与水体中重金属镉、菲或多氯联苯的一种或一种以上的浓度均呈负相关，所以检测到鱼的CAT活性越低，其的水域受污染的程度越大，并且明示受到重金属镉、菲或多氯联苯的一种或一种以上的污染。通过建立鱼的CAT活性与重金属镉浓度的标准曲线，鱼的CAT活性与菲浓度关系的曲线，或者鱼的CAT活性与多氯联苯浓度关系的曲线，可以将待检测水域中与建立标准曲线同种同大小的鱼的CAT活性比对，获得水域中重金属镉浓度、菲或多氯联苯浓度或综合污染浓度值，并且能反映出目前的污染程度对生物是否在安全范围或受到危害。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书能够据以实施。实施例1本方案利用鱼的CAT活性检测水体污染程度的方法，获取需要检测的水域中的鱼，并采用所述鱼的CAT作为敏感生物标记物，通过检测鱼的CAT活性，然后比对同类同大小的鱼的CAT活性与某污染物浓度关系的标准曲线，就可以检测出水体是否受到某污染物的污染，不但检测准确，且敏感度高，而且能直观反映该水域的某污染物的污染程度及其对生物的危害程度。实施例2本方案利用鱼的CAT活性检测水体污染程度的方法，获取需要检测的水域中的鱼，并采用所述鱼的CAT作为敏感生物标记物，根据鱼的CAT活性与水体中重金属镉的浓度呈负相关，通过测定鱼的CAT活性，然后比对同类同大小的鱼的CAT活性与镉浓度关系的标准曲线，如果检测样本鱼的CAT活性比正常情况下的同类同大小的鱼的CAT活性低，则判断水域受到镉的污染；CAT活性越低，则判断水域的镉污染越严重，甚至可判断是否达到危害水体生物的程度。实施例3本方案利用鱼的CAT活性检测水体污染程度的方法，获取需要检测的水域中的鱼，并采用所述鱼的CAT作为敏感生物标记物，根据鱼的CAT活性与水体中菲(Phe)等多环芳烃的浓度呈负相关，通过测定鱼的CAT活性，然后比对同类同大小的鱼的CAT活性与菲关系的标准曲线，如果检测样本鱼的CAT活性比正常情况下的同类同大小的鱼的CAT活性低，则判断水域受到菲的污染；鱼的CAT活性越低，则判断水域的菲污染越严重，甚至可判断是否达到危害水体生物的程度。实施例4本方案利用鱼的CAT活性检测水体污染程度的方法，获取需要检测的水域中的鱼，并采用所述鱼的CAT作为敏感生物标记物，根据鱼的CAT活性与水体中多氯联苯的浓度呈负相关，通过测定鱼的CAT活性，然后比对与建立标准曲线的鱼同类同大小的鱼的CAT活性与多氯联苯浓度关系的标准曲线，如果检测样本鱼的CAT活性比正常情况下的同类同大小的鱼的CAT活性低，则判断水域受到多氯联苯的污染；鱼的CAT活性越低，则判断水域的多氯联苯污染越严重，甚至可判断是否达到危害水体生物的程度。实施例5本方案利用鱼的CAT活性检测水体污染程度的方法，获取需要检测的水域中的鱼，并采用所述鱼的CAT作为敏感生物标记物。首先通过实验建立鱼的CAT活性与某污染物浓度的标准曲线，然后将待检测水域中的同种同大小的鱼的CAT活性与所述标准曲线比对，得到待检测水域中某污染物的浓度。通过实验建立鱼的CAT活性与重金属镉浓度关系的标准曲线如下：本实验的检测样本以海水青鳉为例，分十组，每组3个平行进行本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用鱼的CAT活性检测水体污染程度的方法，其特征在于，获取需要检测的水域中的鱼，并采用所述鱼的CAT作为敏感生物标记物。

【技术特征摘要】
1.一种利用鱼的CAT活性检测水体污染程度的方法，其特征在于，获取需要检测的水域中的鱼，并采用所述鱼的CAT作为敏感生物标记物。2.根据权利要求1所述的利用鱼的CAT活性检测水体污染程度的方法，其特征在于，所述鱼的CAT活性与水体中重金属镉的浓度呈负相关。3.根据权利要求1所述的利用鱼的CAT活性检测水体污染程度的方法，其特征在于，所述鱼的CAT活性与水体中菲的浓度呈负相关。4.根据权利要求1所述的利用鱼的CAT活性检测水体污染程度的方法，其特征在于，所述鱼的CAT活性与水体中多氯联苯的浓度呈负相关。5.根据权利要求1-4任一项所述的利用鱼的CAT活性检测水体污染程度的方法，其特征在于，建立鱼的CAT活性与污染物浓度关系的标准曲线，然后将待检测水域中的同种同大小的鱼的CAT活性与所述标准曲线比对，得到待检测水域中水体污染物浓度。6.根据权利要求5所述的利用鱼的CAT活性检测水体污染程度的方法，其特征在于，所述标准曲线为鱼的CAT活性与重金属镉浓度关系的曲线，或者鱼的CAT活性与菲浓度关系的曲线，或者鱼的CAT活性与多氯联苯浓度关系的曲线。7.根据权利要求6所述的利用鱼的CAT活性检测水体污染程度的方法，其特征在于，所述鱼的CAT活性测定包括如下步骤：步骤一、待测样本处理：制备全鱼匀浆，然后离心分层，取上层清液为待测样本；步骤二、待测样本蛋白浓度的测定：分别将等量的双蒸水、蛋白标准品和待测样本加入1、2、3号管中，并分别向各管加入等量的考马斯亮蓝显色剂，分别混匀，静置，预热，用分光光度计并用双蒸水调零后，于1cm光径，在波长595nm处，测定1、2、3号管中物质的光密度，分别记...

【专利技术属性】
技术研发人员：许友卿，丁兆坤，刘阳，李云杰，刘富娟，张仁珍，
申请(专利权)人：广西大学，
类型：发明
国别省市：广西;45