System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种罗非鱼IgT单克隆抗体及其应用制造技术_技高网
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一种罗非鱼IgT单克隆抗体及其应用制造技术

技术编号:41255543 阅读:6 留言:0更新日期:2024-05-11 09:15
本发明专利技术公开了一种罗非鱼IgT单克隆抗体及其应用,涉及生物技术领域。本发明专利技术具体公开了罗非鱼IgT重链恒定区CH2基因序列、氨基酸序列、重组蛋白免疫小鼠制备罗非鱼IgT单克隆抗体的方法。所述罗非鱼IgT单克隆抗体由杂交瘤细胞株2B11(保藏号为CCTCC NO:C2023390)分泌所得,该单抗可特异性识别罗非鱼黏液中大小约为42kDa条带,与天然IgT分子量大小一致,表明成功制备鼠抗罗非鱼IgT单克隆抗体,为罗非鱼黏膜免疫研究奠定基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物,具体涉及一种罗非鱼igt单克隆抗体及其应用。


技术介绍

1、罗非鱼(oreochromis mossambicus)具有生长块、适应性强、营养价值高等特点,是我国重要的经济鱼种之一,也是硬骨鱼免疫学研究的热门物种。脊椎动物免疫系统分为先天性免疫和适应性免疫,适应性免疫是抵御病原微生物入侵最主要的防线,免疫球蛋白是适应性免疫的关键效应分子。

2、典型的免疫球蛋白由两条重链和两条轻链组成,通过二硫键连接形成“y”型四聚体结构。哺乳动物的免疫球蛋白主要分成5类:igg、igm、iga、ige和igd,分别在体液免疫和细胞免疫行使特异功能。硬骨鱼是最古老脊椎动物,主要的免疫球蛋白分为3种,即igm、igd和igt/igz。不同类型免疫球蛋白在体内具有特定的功能,igm是硬骨鱼中发现最早的免疫球蛋白,早期研究认为是系统和黏膜免疫中唯一的免疫球的蛋白。直到2005年hanse和danilova分别在虹鳟(oncorhynchus mykiss)和斑马鱼(barchydanio rerio var)中发现igt。在硬骨鱼中igm是血清主要免疫球蛋白,igt类似于哺乳动物的iga在黏膜免疫中发挥主要作用。随着硬骨鱼免疫球蛋白分子研究的迅速发展,不同种属的硬骨鱼igt基因相继备被克隆出来,如:虹鳟、斑马鱼、大口黑鲈(micropterus salmoides)、大黄鱼(larimichthyscrocea)和罗非鱼等,但关于igt蛋白结构及其在不同鱼类中产生和分布仍有很大不足。igt功能的研究是基于制备成功的抗igt多克隆抗体和单克隆抗体,由于缺乏抗体,目前对igt功能研究非常有限,且主要集中在虹鳟和斑马鱼。因此抗罗非鱼igt抗体的制备显得十分必要。单克隆抗体因具有特异性强、亲和力和高度均一性等特性,而成为免疫学方法研究的有力工具。制备抗罗非鱼igt单克隆抗体能为罗非鱼评估感染及疫苗接种抗体的产生提供有利的工具,也为罗非鱼黏膜免疫应答研究奠定了基础。


技术实现思路

1、本专利技术的目的是为了解决现有技术存在的上述问题,提供一种罗非鱼igt单克隆抗体及其应用。本专利技术通过制备罗非鱼igt单克隆抗体不仅可以用于免疫细胞的鉴定,还能评估感染和疫苗接种的抗体的产生以及对疾病的早期诊断具有重要意义。

2、为实现上述目的,本专利技术提供如下技术方案:

3、第一方面,本专利技术提供一种罗非鱼igt单克隆抗体,所述罗非鱼igt重链恒定区ch2基因序列如seq id no.1所示,所述罗非鱼igt重链恒定区ch2氨基酸序列如seq id no.2所示。

4、进一步的,所述罗非鱼igt重链恒定区ch2的上游引物序列为igt-f,如seq idno.3所示,所述罗非鱼igt重链恒定区ch2的下游引物序列为igt-r,如seq id no.4所示。

5、进一步的,所述罗非鱼igt单克隆抗体重链为igg3型,轻链为kappa型。

6、第二方面,本专利技术提供产生所述罗非鱼igt单克隆抗体的杂交瘤细胞株,所述杂交瘤细胞株为杂交瘤细胞株2b11,该杂交瘤细胞株的保藏编号为cctcc no:c2023390。

7、第三方面,本专利技术提供所述的罗非鱼igt单克隆抗体在制备试剂盒或检测试剂中的应用。

8、进一步的,所述试剂盒或检测试剂用于检测罗非鱼黏液中的特异性抗体。

9、生物材料保藏信息说明:本专利技术所述的杂交瘤细胞株2b11 hybridoma ce11 line2b11,保藏号为cctcc no:c2023390,已于2023年12月7日保藏于中国典型培养物保藏中心,地址:湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内。

10、本专利技术的有益效果:

11、本专利技术公开了罗非鱼igt重链恒定区ch2基因序列、氨基酸序列、重组蛋白免疫小鼠制备罗非鱼igt单克隆抗体的方法。所述罗非鱼igt单克隆抗体由杂交瘤细胞株2b11分泌所得,该单抗可特异性识别罗非鱼黏液中大小约为42kda条带,表明成功制备鼠抗罗非鱼igt单克隆抗体,与天然igt分子量大小一致,为罗非鱼黏膜免疫研究奠定基础。

12、单克隆抗体具有高度的特异性和亲和力,是免疫学方法的重要工具。本专利技术通过制备罗非鱼igt单克隆抗体不仅可以用于免疫细胞的鉴定,还能评估感染和疫苗接种的抗体的产生以及疾病的早期诊断具有重要意义。

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【技术保护点】

1.一种罗非鱼IgT单克隆抗体,其特征在于:所述罗非鱼IgT重链恒定区CH2基因序列如SEQ ID NO.1所示,所述罗非鱼IgT重链恒定区CH2氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

2.如权利要求1所述的一种罗非鱼IgT单克隆抗体,其特征在于:所述罗非鱼IgT重链恒定区CH2的上游引物序列为IgT-F,如SEQ ID NO.3所示,所述罗非鱼IgT重链恒定区CH2的下游引物序列为IgT-R,如SEQ ID NO.4所示。

3.如权利要求1所述的一种罗非鱼IgT单克隆抗体,其特征在于:所述罗非鱼IgT单克隆抗体重链为IgG3型,轻链为Kappa型。

4.产生权利要求1所述罗非鱼IgT单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其特征在于:所述杂交瘤细胞株为杂交瘤细胞株2B11,该杂交瘤细胞株的保藏编号为CCTCC NO:C2023390。

5.权利要求1-4任一项所述的罗非鱼IgT单克隆抗体在制备试剂盒或检测试剂中的应用。

6.如权利要求5所述的应用,其特征在于:所述试剂盒或检测试剂用于检测罗非鱼黏液中的特异性抗体。

【技术特征摘要】

1.一种罗非鱼igt单克隆抗体,其特征在于:所述罗非鱼igt重链恒定区ch2基因序列如seq id no.1所示,所述罗非鱼igt重链恒定区ch2氨基酸序列如seq id no.2所示。

2.如权利要求1所述的一种罗非鱼igt单克隆抗体,其特征在于:所述罗非鱼igt重链恒定区ch2的上游引物序列为igt-f,如seq id no.3所示,所述罗非鱼igt重链恒定区ch2的下游引物序列为igt-r,如seq id no.4所示。

3.如权利要求1所述的一种罗非鱼...

【专利技术属性】
技术研发人员:吴文德陈林
申请(专利权)人:广西大学
类型:发明
国别省市:

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