粗梗黄堇有效部位及其制备方法和应用技术

粗梗黄堇有效部位及其制备方法和应用，属于植物提取物技术领域。选自粗梗黄堇乙酸乙酯部位、粗梗黄堇正丁醇部位、粗梗黄堇水相萃取部位中的一种或两种以上的任意质量比的混合物。将粗梗黄堇全草粉碎，加入体积百分比浓度65%~95%乙醇溶液回流提取，将所得提取液浓缩、干燥，得浸膏；将浸膏加蒸馏水分散，得浸膏分散液，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇作为溶剂萃取浸膏分散液，挥去溶剂后得粗梗黄堇乙酸乙酯部位、粗梗黄堇正丁醇部位；将萃取后的浸膏分散液浓缩、干燥，得粗梗黄堇水相萃取部位。本发明专利技术的粗梗黄堇有效部位在制备抑制CDC25酶药物方面的应用，能够用于制备抗肿瘤药物。

【技术实现步骤摘要】

粗梗黄堇有效部位及其制备方法和应用，属于植物提取物

技术介绍
粗梗黄堇（Corydalis pachypoda （Franch.）Hand.-Mazz.）为罂粟科紫堇属植物，多年生草本，产云南西北部（洱源、丽江、中甸、维西、德钦）、四川西南部（木里、冕宁）、西藏东部（错那），生于海拔（2300~）3000~4600（~4700）米的石缝或沙石地。尼泊尔可能有分布 [参见：中国植物志.第三十二卷.北京:科学出版社,1999，32：304]。粗梗黄堇是一种常用中药, 为中华本草记载，全草药用，清热解毒，主痈肿疮疖。主治：痈肿疮疖。恶性肿瘤是严重危害人类健康的重大疾病之一，已成为人类致死的首要原因。恶性癌细胞的防治已成为医学界所关注的重要课题。但是，恶性肿瘤发病隐匿，病因复杂，病理变化多样，对其治疗仍局限于癌症疾病的多样性及反复性。然而，尽管不同的癌症的致癌原因可能不尽相同，但其组织观察均表现出相似的细胞周期紊乱以及迅速不可控制的细胞生长及转移。因此，对参与细胞周期调控的一些家族蛋白的研究在推动癌症治疗中成为重要因素。其中，细胞分裂周期激酶（Cdk/cyclins）作为真核细胞周期的主要调控蛋白，负责推动相应阶段的细胞分裂。CDC25 磷酸蛋白酶（CDC25 phosphatases）作为细胞分裂周期蛋白激酶家族（Cdk/cyclins）的活化蛋白酶，在真核细胞的分裂周期中起了十分重要的调节作用。目前临床研究表明，这一家族的蛋白酶在多种癌症组织中均表现出过量的表达，且往往与较差的癌症早期预测有关，这些均使CDC25磷酸蛋白酶成为具有巨大潜力的癌症治疗药物靶标。近年来，许多关于CDC25磷酸蛋白酶家族的酶学研究为相关抑制剂及癌症药物的研发提供了相当重要的信息。申请人在研究中发现：目前抗肿瘤药物的原料较少，特别是用于制备抑制CDC25酶药物的中药原料较为匮乏，发现新药的原料是迫切需要解决的问题。现有技术中粗梗黄堇主要有清热解毒之功。目前，尚未见到关于粗梗黄堇抑制CDC25酶的活性方面的研究和应用的报道。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是：克服现有技术的不足，提供粗梗黄堇有效部位及其制备方法和应用，该粗梗黄堇有效部位能有效抑制CDC25A酶和CDC25B酶的活性，用于制备抑制CDC25酶药物，具有较好的抗肿瘤作用。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：该粗梗黄堇有效部位，其特征在于：选自粗梗黄堇乙酸乙酯部位、粗梗黄堇正丁醇部位、粗梗黄堇水相萃取部位中的一种或两种以上的任意质量比的混合物。该粗梗黄堇有效部位，其特征在于：选自粗梗黄堇乙酸乙酯部位，或者粗梗黄堇乙酸乙酯部位和粗梗黄堇水相萃取部位任意质量比的混合物。该粗梗黄堇有效部位的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：将粗梗黄堇全草粉碎，加入体积百分比浓度65%~95%乙醇溶液回流提取，将所得提取液浓缩、干燥，得浸膏；将浸膏加蒸馏水分散，得浸膏分散液，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇作为溶剂萃取浸膏分散液，挥去溶剂后得粗梗黄堇乙酸乙酯部位、粗梗黄堇正丁醇部位；将萃取后的浸膏分散液浓缩、干燥，得粗梗黄堇水相萃取部位。优选的，所述的回流提取为超声波辅助回流提取，超声波辅助回流提取的具体操作为：将粉碎后的粗梗黄堇全草加入体积百分比浓度65%~95%乙醇溶液超声波提取0.5~3小时，过滤，滤渣加入体积百分比浓度65%~95%乙醇溶液回流提取1~3次，合并提取液，即得。该粗梗黄堇有效部位的应用，其特征在于：在制备抑制CDC25酶药物方面的应用。所述抑制CDC25酶药物是通过粗梗黄堇乙酸乙酯部位、粗梗黄堇正丁醇部位、粗梗黄堇水相萃取部位中的一种或两种以上的任意质量比的混合物，与药用辅料混合制成的口服制剂或注射制剂。所述的注射制剂为脂质体注射剂、纳米粒注射剂或微球注射剂。所述的口服制剂为散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂或溶液剂。申请人对于本专利技术的说明如下：现有技术中，粗梗黄堇常规用途为清热利胆、解毒的功效，未见其有抗肿瘤功效的相关报道。申请人通过大量研究发现：粗梗黄堇中的部分提取物还具有抗肿瘤的作用，但是其功效不明显，不能确定其具体的有效部位。因此通过怎样的溶剂、采用怎样制备方法，才能获得抑制CDC25酶活性效果最好的有效部位，是必须要解决的问题。申请人通过研究发现：采用本专利技术制备方法，筛选出的粗梗黄堇乙酸乙酯部位、粗梗黄堇正丁醇部位、和粗梗黄堇水相萃取部位，其抑制CDC25酶效果较好。经申请人进一步分析，粗梗黄堇乙酸乙酯部位和粗梗黄堇水相萃取部位对于CDC25A酶和CDC25B酶的抑制效果最优。制备方法中，优选采用超声波辅助回流提取。超声波辅助回流提取的具体操作为：超声波提取后，过滤获得超声波提取液和滤渣，向滤渣中加体积百分比浓度65%~95%乙醇水溶液回流提取，合并超声波提取液和回流提取液。进一步的说明，回流提取的具体操作为：向回流加热装置中直接加入粉碎后的药材或加入超声波提取后的滤渣，加入体积百分比浓度65%~95%乙醇水溶液，加热提取，放冷过滤得一次提取液和滤渣；再向滤渣中加入体积百分比浓度65%~95%乙醇水溶液，加热、进行第二次回流提取，放冷过滤得二次提取液和滤渣（以上为回流提取2次）；合并多次提取液，即得回流提取液。优选的，每次回流提取0.5~2小时；每次回流提取时所加乙醇溶液没过药材表面1cm~2cm。回流提取的温度为乙醇回流提取的常规温度，需高于乙醇的沸点，优选为80℃~100℃。制备方法中，浸膏为粗提取物，采用不同的溶剂萃取浸膏分散液，指的是依次将石油醚加入浸膏分散液萃取分离获得石油醚萃取液、将乙酸乙酯加入浸膏分散液萃取分离获得乙酸乙酯萃取液、将正丁醇加入浸膏分散液萃取分离获得正丁醇萃取液；取乙酸乙酯萃取液和正丁醇萃取液分别挥发去除溶剂后，所得即选自粗梗黄堇乙酸乙酯部位和粗梗黄堇正丁醇部位；将萃取后剩余的浸膏分散液（溶剂为水），挥发去除溶剂即得粗梗黄堇水相萃取部位。水相萃取部位也可以称作水相萃取物，水相萃取部位易溶于水；而相对的，石油醚、乙酸乙酯和正丁醇为有机相，石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位对应易溶于石油醚、乙酸乙酯和正丁醇。其中，粗梗黄堇乙酸乙酯部位含有游离生物碱、黄酮类化合物；粗梗黄堇正丁醇部位含有黄酮苷和酚类化合物；粗梗黄堇水相萃取部位含有多糖和有机酸类化合物。挥去溶剂即挥发去除溶剂。挥去溶剂可以采用常压加热使溶剂（石油醚、乙酸乙酯和正丁醇）挥发。优选的，挥去溶剂采用减压浓缩，该方法效率高，并且能避免热敏性成分因高温丧失药性。优选的，制备的抑制CDC25酶药物，为口服制剂或注射制剂。口服制剂和注射制剂为最佳给药途径，此处所述口服制剂为经肠胃道给药制剂，优选的，口服制剂为缓释、控释型口服制剂。也可以为非肠胃给药的其他，如呼吸道给药制剂（喷雾剂、气雾剂、粉雾剂）；皮肤给药制剂（外用溶液剂、洗剂、搽剂、软膏剂、硬膏剂、糊剂、贴剂）；膜给药制剂（滴眼剂、 滴鼻剂、眼用软膏、含漱剂、舌下片剂）；腔道给药制剂（栓剂）。注射制剂可以为常规注射制剂。根据药物传递系统进行分类，优选的，本专利技术的注射制剂为脂质体注射剂、纳米粒注射剂或微球注射剂；其他的，本专利技术的注射剂还可以为微囊注射剂、聚合物胶束注射剂、微乳或亚微乳注射剂、亚微粒注射剂或凝胶注本文档来自技高网...

【技术保护点】
粗梗黄堇有效部位，其特征在于：选自粗梗黄堇乙酸乙酯部位、粗梗黄堇正丁醇部位、粗梗黄堇水相萃取部位中的一种或两种以上的任意质量比的混合物。

【技术特征摘要】
1.粗梗黄堇有效部位，其特征在于：选自粗梗黄堇乙酸乙酯部位、粗梗黄堇正丁醇部位、粗梗黄堇水相萃取部位中的一种或两种以上的任意质量比的混合物。2.根据权利要求1 所述的粗梗黄堇有效部位，其特征在于：选自粗梗黄堇乙酸乙酯部位，或者粗梗黄堇乙酸乙酯部位和粗梗黄堇水相萃取部位任意质量比的混合物。3.权利要求1 所述的粗梗黄堇有效部位的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：将粗梗黄堇全草粉碎，加入体积百分比浓度65%~95%乙醇溶液回流提取，将所得提取液浓缩、干燥，得浸膏；将浸膏加蒸馏水分散，得浸膏分散液，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇作为溶剂萃取浸膏分散液，挥去溶剂后得粗梗黄堇乙酸乙酯部位、粗梗黄堇正丁醇部位；将萃取后的浸膏分散液浓缩、干燥，得粗梗黄堇水相萃取部位。4.根据权利要求3 所述的粗梗黄堇有效部位的制备方法，其特征在于：所述的回流提取为超声波辅助回流提取；...

【专利技术属性】
技术研发人员：林鹏程，吴疆，却生，曾擎屹，高世宝，
申请(专利权)人：青海民族大学，
类型：发明
国别省市：青海;63