一种测定IL-12对因放射产生的骨髓损伤的修复的方法技术

本发明专利技术涉及一种测定IL‑12对因放射产生的骨髓损伤的修复的方法，IL‑12在修复因放射损伤产生的骨髓损伤的用途中，利用核磁共振方法检测脊椎骨T1WI/T2WI强度，判断骨髓损伤的恢复情况。采用此方法简单，快捷，直观准确地观察IL‑12对放射病患者骨髓的修复情况。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医药领域，具体的涉及一种检测方法，利用核磁共振方法判断IL-12对因放射产生的骨髓损伤的修复情况。
技术介绍
目前，对于肿瘤癌症等的治疗过程中，化学治疗和放射治疗已经成为主要的辅助治疗手段，传统的常规治疗肿瘤或癌症的方法一般是手术后切除肿瘤，再进行放疗或化疗。但是，由于在放射治疗中，需要应用穿透力极强的γ射线或β射线等，难以避免的产生副作用，从而对人体造成损害，其中最主要的伤害就是对人体骨髓中的造血干细胞的损害。另一方面，在对急性辐射损伤研究实验中，人们发现，急性辐射损伤常表现为多系统性损伤，其中骨髓造血功能抑制是常见的病理病变，而且贯穿于放射损伤的始终，是造成患者死亡的主要原因。传统的公知常识中已经明确：人体的骨髓主要分为红骨髓和黄骨髓两种，其中黄骨髓主要由脂肪填充构成，而只有红骨髓由于其含有造血干细胞起到了主要的造血作用。正常成年人在成年之后，体内的红骨髓逐渐转变为黄骨髓，而只有在盆腔和脊柱中还保留一部分红骨髓。而急性辐射或放疗所引起的人体组织的损伤，统称为放射病。目前，人们在治疗放射病时，最根本的是为了能够让病人生存下去。在对放射病病理学研究中显示，辐射对人体骨髓伤害的主要原因是影响骨髓中的红骨髓，当病人因辐射所引起的放射病情严重时，骨髓中的红骨髓完全转变为红骨髓，从而失去造血功能，引起感染和出血，甚至导致死亡。近年来，国内外有许多关于放射病研究的报道，已经发现一系列细胞因子，如IL-3、G-CSF、GM-CSF、M-CSF、SCF和FL等，可作用于各分化发育阶段的造血细胞，在辐射所致的造血功能抑制的恢复中均具有一定的作用。在《细胞因子与急性辐射损伤的防护和治疗》一文中，人们发现，IL-12能协同其他因子刺激造血干细胞的生长，保护放、化疗中的造血干细胞，即将骨髓中已经变成黄骨髓的那部分骨髓协同转化为红骨髓，从而保护骨髓中的红骨髓免 受辐射的伤害，达到治疗和救命的目的。在临床应用中，这一研究结果已经被广泛接受并成功的应用。但是，目前在检测IL-12对因辐射所造成的骨髓损伤的修复的方法，一般是根据外周血细胞的恢复情况来判断的，即需要定时的抽取病人的骨髓或血液样本进行检查。一方面使病人产生极大的痛苦，另一方面外周血细胞的观察并不能准确客观的反映骨髓的修复情况。另一方面，在放射治疗宫颈癌过程中，人们发现，核磁共振能够清晰的观察出骨髓的变化情况。但在现有技术中，没有报道过将核磁共振应用于判断IL-12对辐射损伤中骨髓的修复的检测。
技术实现思路
本专利技术的其中一个目的是提供一种检测IL-12对辐射损伤中骨髓的修复情况的方法。为实现本专利技术的目的，本专利技术的技术方案如下：IL-12在修复因放疗产生的骨髓损伤的用途中，IL-12用于修复因放疗产生的骨髓损伤，利用核磁共振方法检测脊椎骨T1WI和T2WI的强度，判断骨髓损伤恢复情况。其中，所述的检测方法可以用于检测IL-12在修复因不同剂量的放疗产生的骨髓损伤。所述检测方法可以用于检测IL-12在修复因不同剂量的放疗产生的骨髓损伤之前，之中和之后。优选的，所述IL-12可以为重组人白细胞介素-12。本专利技术的有益效果是：1.采用核磁共振的方法，能够直观准确的观察IL-12对放射病患者骨髓的修复情况，减轻治疗中因其他方法带来的痛苦。2.采用本专利技术的检测方法，不会对放射病人产生其他额外的副作用。3.本专利技术所采用的检测方法，更加直观，更加准确，在IL-12治疗因放疗产生的辐射损伤时，凡是能够通过核磁共振癌症部位，都可以采用本专利技术方法进行检测，应用范围更加广泛。附图说明图1.受照食蟹猴30天内白细胞数量变化；图2.受照食蟹猴30天内血小板数量变化，注：与照射对照组比较，*，P<0.05。具体实施方式实施例1：急性放射骨髓损伤模型的建立食蟹猴40只，体重4.0～6.0kg，健康雄性，动物检疫合格，由军科院动物中心大动物室提供。照射剂量5.0Gy、双侧照射。实施例2：rhIL-12对放射病的治疗将实施例1中的40只动物，分为3组，正常对照组8只、照射对照组8只、rhIL-12(重组人白细胞介素-12)治疗组24只。正常对照组：不照射注射灭菌注射用水；照射对照组：照射后注射灭菌注射用水；rhIL-12治疗组，分三个剂量，每剂量8只，照射后24h单次皮下分别注射188、250、333ng/kg。照射后观察时间为30天。照射后动物一般活动良好，照射后第3天动物活动减少，各辐照组动物均出现不同程度的腹泻、稀便等消化道症状。死亡情况见表1。表1.各组动物死亡情况rhIL-12治疗组与照射对照组比较，P＝0.002，表明rhIL-12治疗组30天 生存率和生存时间显著优于照射对照组。结果显示出rhIL-12对治疗急性放射性损伤的有效性。比较例1：急性放射组动物检测方法的选择(1)骨髓抽取方法：骨髓有核细胞(BMNC)造血集落培养 正常对照组、照射对照组、rhIL-12治疗组实验猴在辐射后第29天分别采集2只猴的骨髓液，麻醉后抽取股骨端骨髓液2ml，无菌条件下常规方法制备单个核细胞，计数细胞后配制成细胞悬液，铺24孔板中，0.55ml/孔，细胞终浓度为1×105个/孔，边缘孔填充0.55ml无菌生理盐水，于37℃，5％CO2培养6-12天，倒置显微镜下观察计数各系造血细胞的集落(CFU)生成情况,包括CFU-E(红细胞集落生成单位)、CFU-GM(粒细胞-单核细胞集落生成单位)以及CFU-mix(混合集落生成单位)，结果见表2。表2rhIL-12对受照射损伤后的猴骨髓造血干/祖细胞的集落形成作用(n＝2，)由以上结果可知，rhIL-12治疗组与照射对照组比较，rhIL-12治疗组对造血细胞的集落生成情况优于照射对照组，结果显示出rhIL-12能够有效的促进造血功能的恢复。(2)抽血检测方法：白细胞数量的动态变化三个辐照实验组食蟹猴的白细胞(WBC)总数在受照后第3天均明显降低，在第6天已下降至低点并维持于较低水平，持续到第20天，其后逐渐开始恢复。各治疗组间没有统计学意义，见图1。三个辐照实验组血小板(PLT)计数在照后的第8天快速下降。在第18天，rhIL-12 188ng/kg治疗组的血小板水平明显高于照射对照组，P值均小于0.05。见图2。由图2可知，rhIL-12治疗组与照射对照组比较，rhIL-12治疗组对血小板的恢复显著优于照射对照组，结果显示出rhIL-12能够有效的促进血小板的恢 复。(3)核磁共振检测方法：核磁共振在骨髓放射损伤中的应用常规方法麻醉实验猴，进行核磁共振检查，检查的目标是脊椎骨，结果见表3。MRI(磁共振成像)检查采用1.5T单位(GE Medical Systems，Milwaukee，Wis)，包括T1、T2加权像、STIR(short time inversion recovery)，短时间反转恢复序列，与FLAIR(fluid attenuated inversion recovery)同为MRI成像技术的序列技术中的反转恢复序列。层厚5mm，层间距2.5mm，矩阵256*192，FOV 36cm。以肌肉信号为参照，信号低于肌肉的为低信号，与肌肉相同的为等信号，高于肌肉且低于脂肪组织的为高信号，等于或高于脂肪组织的为明本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种测定IL‑12对因放射产生的骨髓损伤的修复的方法，其特征在于：IL‑12用于修复因放疗产生的骨髓损伤，利用核磁共振方法检测脊椎骨T1WI和T2WI的强度，判断骨髓损伤恢复情况。

【技术特征摘要】
2015.05.18 CN 201510251657X1.一种测定IL-12对因放射产生的骨髓损伤的修复的方法，其特征在于：IL-12用于修复因放疗产生的骨髓损伤，利用核磁共振方法检测脊椎骨T1WI和T2WI的强度，判断骨髓损伤恢复情况。2.根据权利要求1所述的方...

【专利技术属性】
技术研发人员：张宜俊，粟宽源，叶倩君，赵峰，夏书奇，罗群芳，宋阳，
申请(专利权)人：国科丹蓝生物科技北京有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11