富硒虫草菌及其培养方法、富硒黄酒及其制备方法技术

本发明专利技术提供了一种富硒虫草菌的培养方法，是在虫草菌发酵培养过程采用两次加入无机硒的方式进行虫草菌的富硒培养，通过限定两次加入无机硒的时间和加入量，解决了无机硒的毒性对富硒量的限制瓶颈，显著提高虫草菌的富硒量，以获得富含有机硒的虫草菌。另外，本发明专利技术还提供了一种富硒黄酒的制备方法，将富含有机硒的虫草菌与大枣、枸杞复配成复合虫草菌营养液，再与熟黍米混合，通过传统的黄酒酿造工艺，酿造出一款色泽呈橙黄色、清亮透明、有光泽，且香气协调的富硒虫草保健酒，获得的酒体丰满协调、醇和爽口，具有黄酒和虫草菌的典型香气，同时兼具了虫草菌和有机硒的营养、功效，是一款具有保健功能的新型富硒黄酒。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及富硒
，特别涉及一种富硒虫草菌，以及该富硒虫草菌的培养方法，同时，还涉及由该富硒虫草菌制得的富硒黄酒及制备方法。
技术介绍
硒(Se)是人和动物生命活动所必需的微量元素之一，多存在于人体的肝、肾、胰、心、脾、牙釉质和指甲中，硒在自然界中以无机硒和有机硒两种形式存在，无机硒毒性较大，对动植物及微生物细胞有一定的毒害作用，因此通常在食物中补充的硒以有机硒形式存在，目前，有机硒多是利用生物转化的方法获得。冬虫夏草(Cordyceps sinensis)，又名中华虫草，主产于四川、西藏、云南等海拔在4000～5000米的高山草甸土中。现代药理学研究结果证实，青海冬虫夏草中含有虫草酸约7％，碳水化合物约28.9％，脂肪约8.4％，蛋白质约25％，脂肪中82.2％为不饱和脂肪酸，此外还含有虫草多糖、多种氨基酸、核苷及多种碱基、麦角甾醇及其氧化物、甘露醇、硬脂酸、挥发油以及多种矿物质元素。虫草性甘温平，是著名的滋补强壮药，适用于治疗肺气虚和肺肾两虚、改善心肌缺血、扩张支气管、祛痰平喘，另外对中枢神经系统能起镇静、抗惊厥、降温作用，是一味不可多得的珍贵药材。然而，由于虫草药源紧张，价格昂贵，远不能满足国内外市场的需要，近年来，人们采用以天然虫草真菌发酵法获得人工虫草菌，并研究证明，人工虫草菌与天然冬虫夏草具有相似的化学成分、药理作用和临床疗效，且毒性比天然者小，因此虫草菌及相关产品得到不断发展，如虫草菌发酵制剂、虫草菌发酵酒等。利用虫草菌发酵液进行硒的生物转化、富集获得富硒虫草菌，对于开发虫草功能性食品、药品具有重要意义，但由于无机硒的毒性，在虫草菌发酵培养过程，无机硒的加量会受到限制，无机硒量超出则会对菌丝体产生抑制或毒害作用，使菌丝生长缓慢或停止，因此限制了菌丝体中有机硒的含量，影响硒的功能性发挥。
技术实现思路
为解决现有技术中存在的不足，本专利技术提供了一种富硒虫草菌的培养方法，可以显著提高无机硒的加入量，以获得高有机硒含量的富硒虫草菌。为实现上述目的，本专利技术的富硒虫草菌的培养方法，是在虫草菌的发酵培养过程采用两次加入无机硒的方式进行富硒培养，第一次加入无机硒的时间为虫草菌进入对数生长期初期，加入量为140～150μg/mL；第二次加入无机硒的时间为虫草菌处于对数生长期旺盛期，加入量为50～60μg/mL。本专利技术通过将无机硒加入到虫草菌的深层液态发酵培养基中，利用虫草菌的高效生物转化作用对微量元素硒进行富集，以获得富含有机硒的虫草菌。根据虫草菌菌丝体在不同生长阶段对硒的耐受性能、吸收性能及转化性能等影响，确定在虫草菌的发酵培养过程采用两次加入无机硒的方式进行富硒培养，其中第一次加入无机硒是在虫草菌进入对数生长期初期，利用此生长阶段的虫草菌菌丝体基本适应了发酵环境，对无机硒具有较强的抗性，以及菌体的富硒能力得到较好驯化的基础上，加入140～150μg/mL的无机硒，使第一次获得较大的富硒量，同时避免无机硒过量造成的毒性影响；继续发酵培养，在虫草菌菌丝体进入对数生长期旺盛期，菌体生长较快，富硒能力较佳，此时第一次加入的无机硒已基本转化、消耗完全，可以继续吸收、转化无机硒，再加入50～60μg/mL的无机硒，使虫草菌进一步富硒，大大促进有机硒的生成，从而获得高有机硒含量的富硒虫草菌。通过本专利技术的富硒培养方式，可以显著提高富硒量，解决了无机硒的毒性对富硒量的限制瓶颈，进而提高虫草菌的功能性。该富硒培养方法中，无机硒的加入时间与加入量是与虫草菌菌丝体的生长性能相互关联、相互对应的，从而进行高效富硒。作为对上述方式的限定，所述第一次加入无机硒的时间为发酵培养7～8h，所述第二次加入无机硒的时间为发酵培养48～50h。明确无机硒加入操作对应的发酵时间，确定更优的富硒培养过程。作为对上述方式的限定，所述富硒虫草菌的培养方法包括以下步骤：a、斜面培养虫草菌；b、培养虫草菌种子液；c、将虫草菌种子液进行发酵培养，发酵进行到7～8h加入无机硒140～150μg/mL，搅拌均匀后继续发酵培养，进行到48～50h再加入无机硒50～60μg/mL，搅拌均匀后继续发酵到结束，分离得到富硒虫草菌的菌丝体。作为对上述方式的限定，所述步骤a中斜面培养基为马铃薯琼脂培养基；所述步骤b中种子培养基包括葡萄糖40g/L，蛋白胨10.0～12.0g/L，磷酸二氢钾0.5～0.7g/L，硫酸镁0.5～0.7g/L；所述步骤c中发酵培养基包括葡萄糖53.0～54.0g/L，蛋白胨26.0～27.0g/L，硫酸镁2.0～3.0g/L，磷酸二氢钾0.5～0.7g/L；虫草菌种子液的接种量为每1L发酵培养基接种1.25～1.50mL虫草菌种子液；所述步骤a、b、c中虫草菌的培养温度均为32～35℃。按常规真菌培养方法，对虫草菌依次进行斜面培养、种子培养和发酵培养，在发酵培养过程中进行富硒，通过两次加硒培养，显著提高富硒量。在虫草菌的培养中，优化各培养阶段的培养基组成，利于虫草菌的生长繁殖、及对硒的生物转化。富硒虫草菌菌丝体的分离可通过常规分离手段实现，其中采用离心机分离操作效果较优，以离心转速3000～5000r/min，离心时间10～15min，重复3次进行分离，得到菌丝体。同时，本专利技术还提供了一种富硒虫草菌，由如上所述的富硒虫草菌的培养方法获得，所述富硒虫草菌的菌丝体中硒含量为0.150～0.159mg/g。通过本专利技术的培养方法获得的富硒虫草菌中硒含量达到0.150～0.159mg/g，相较于常规有机硒含量0.061～0.094mg/g，得到显著提高。此外，本专利技术还提供了一种富硒黄酒的制备方法，包括以下步骤：(一)、将由如上所述的富硒虫草菌的培养方法获得的富硒虫草菌菌丝体进行细胞壁破碎处理，得到富硒虫草菌菌浆；(二)、配制复合虫草菌营养液，所述复合虫草菌营养液包括以下重量份组分：富硒虫草菌菌浆5份、枸杞干粉1～2份、大枣干粉2～3份、水1份。(三)、将熟黍米、复合虫草菌营养液与水混合，接种酒曲，进行糖化发酵，得到富硒黄酒。黄酒(Chinese rice wine)又称老酒，是以稻米、黍米、玉米、小米、小麦等谷物为主要原料，经蒸煮、加曲、糖化发酵、压榨、过滤、煎酒、贮存、勾兑而成的酿造酒，酿造中以麦曲或小曲做糖化发酵剂。将本专利技术的富硒虫草菌，与黄酒相结合，经传统制作工艺，酿造出一款色泽呈橙黄色、清亮透明、有光泽，且香气协调的富硒虫草保健酒，其酒体丰满协调、醇和爽口，具有黄酒和虫草菌的典型香气，同时兼具了虫草菌抗菌、抑制肿瘤细胞生长、降低血压、扩张气管等作用和有机硒的抗肿瘤、提高机体免疫力、具有抗衰老和预防心血管疾病、克山病和骨节病等功效，是一款具有保健功能的新型富硒虫草黄酒。在富硒虫草黄酒的酿造过程，将复合虫草菌营养液与熟黍米混合后进行糖化发酵，一方面利用复合虫草菌营养液有效掩盖虫草菌带来的特殊味道，另一方面通过加入枸杞、大枣得到的复合虫草菌营养液可以增加虫草菌营养与有机硒之间的相须、相配伍的关系，再一方面利用枸杞、大枣还可改善酒的口感和营养价值。由于红枣味甘性温、归脾胃经，有补中益气、养血安神、缓和药性的功能，还能提高体内吞噬细胞系统的吞噬功能，有保护肝脏、增强体力的作用；枸杞性平和，味甘甜，有滋补本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种富硒虫草菌的培养方法，其特征在于：在虫草菌的发酵培养过程采用两次加入无机硒的方式进行富硒培养，第一次加入无机硒的时间为虫草菌进入对数生长期初期，加入量为140～150μg/mL；第二次加入无机硒的时间为虫草菌处于对数生长期旺盛期，加入量为50～60μg/mL。

【技术特征摘要】
1.一种富硒虫草菌的培养方法，其特征在于：在虫草菌的发酵培养过程采用两次加入无机硒的方式进行富硒培养，第一次加入无机硒的时间为虫草菌进入对数生长期初期，加入量为140～150μg/mL；第二次加入无机硒的时间为虫草菌处于对数生长期旺盛期，加入量为50～60μg/mL。2.根据权利要求1所述的富硒虫草菌的培养方法，其特征在于：所述第一次加入无机硒的时间为发酵培养7～8h，所述第二次加入无机硒的时间为发酵培养48～50h。3.根据权利要求1所述的富硒虫草菌的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：a、斜面培养虫草菌；b、培养虫草菌种子液；c、将虫草菌种子液进行发酵培养，发酵进行到7～8h加入无机硒140～150μg/mL，搅拌均匀后继续发酵培养，进行到48～50h再加入无机硒50～60μg/mL，搅拌均匀后继续发酵到结束，分离得到富硒虫草菌的菌丝体。4.根据权利要求1所述的富硒虫草菌的培养方法，其特征在于：所述步骤a中斜面培养基为马铃薯琼脂培养基；所述步骤b中种子培养基包括葡萄糖40g/L，蛋白胨10.0～12.0g/L，磷酸二氢钾0.5～0.7g/L，硫酸镁0.5～0.7g/L；所述步骤c中发酵培养基包括葡萄糖53.0～54.0g/L，蛋白胨26.0～27.0g/L，硫酸镁2.0～3.0g/L，磷酸二氢钾0.5～0.7g/L；虫草菌种子液的接种量为每1L发酵培养基接种1.25～1.50mL虫草菌种子液；所述步骤a、b、c中虫草菌的培养温度均为32～35℃。5.一种富硒虫草菌，其特征在于：由权利要求1～4中任一项所述的富硒虫草菌的培养方法获得，所述富硒虫草菌的菌丝体中硒含量为0.150～0.159mg/g。6.一种富硒黄...

【专利技术属性】
技术研发人员：李艳，周立华，孙凯，牟德华，
申请(专利权)人：河北科技大学，
类型：发明
国别省市：河北;13