一种脓毒症的分子诊断标志物制造技术

本发明专利技术公开了一种脓毒症的分子诊断标志物，具体地该诊断标志物为CYB561A3，CYB561A3在脓毒症患者中表达下调。本发明专利技术提供了一种诊断脓毒症的产品，使得脓毒症的早期诊断成为可能，降低因诊断不及时而导致的高死亡率，节约医疗资源。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药领域，涉及一种脓毒症的分子诊断标志物，具体地该分子标志物为CYB561A3。
技术介绍
脓毒症是一种感染导致的严重全身性炎症反应为特征的医学状况，在严重的创伤、烧伤、各种休克、大型手术术后等情况下多见，进一步的发展就可能导致感染性休克和多器官功能障碍(MODS)，脓毒症是目前重症监护病房(ICU)患者的主要死亡原因。约28.3％至41％脓毒症患者因多器官功能衰竭进而死亡。脓毒症的相关病理机制被认为错综复杂，免疫促进和抑制在脓毒症中矛盾存在，并与病情发展同步，呈现出相应的变化。机体内病源微生物入侵后，出现炎症性因子的瀑布式释放，免疫能力亢进，机体内由于相关炎症性反应过于强大进而引发免疫源性伤害；而同时机体的相关免疫源性的病例伤害也被过于强大的相关炎症性反应所引发；同期，脓毒症病例的机体内环境发生变化，以淋巴细胞为代表的大量免疫细胞出现凋亡，机体免疫能力的抑制逐渐发展。免疫的相关调控在脓毒症的病理过程中起着关键的作用。脓毒症的临床表现以全身性的炎症性反应(SIRS)初始，随后进展为伴随有MODS的严重脓毒症，进而导致伴有持续性低血压的脓毒性休克。此外，由于最初的炎症反应也可以由非感染性因素，如烧伤、创伤和急性胰腺炎等，脓毒症可能被误诊为SIRS。因此，迫切需要开发出用于诊断脓毒症更精准的生物标志物。目前发现的生物学标记已经有很多，包括脓毒症疾病过程中各个环节的生物学标记物，如凝血，炎症等，包括C反应蛋白，降钙素原等，部分已经应用于临床。另外还有目前临床常用的评分系统，如APACHE II评分和SOFA评分。但是目前应用的这几种标记物，敏感性和特异性均不理想，而评分系统可以用来评估脓毒症患者的预后和病情的严重程度，却不能用于脓毒症的诊断，且不能用作脓毒症治疗的潜在靶点，新的可以用来预测脓毒症预后的生物学标记物和治疗靶点亟待发现。
技术实现思路
为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目的之一，提供一种脓毒症的诊断标志物；本专利技术的目的之二，提供一种诊断产品，实现脓毒症的早期诊断。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术提供了检测CYB561A3基因的试剂在制备诊断脓毒症的产品中的应用。进一步，所述CYB561A3基因在脓毒症患者中表达下调。进一步，所述诊断脓毒症的产品包括：通过RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交或微阵列芯片诊断脓毒症的产品。进一步，所述用RT-PCR诊断脓毒症的产品至少包括一对特异扩增CYB561A3基因的引物；所述用实时定量PCR诊断脓毒症的产品至少包括一对特异扩增CYB561A3基因的引物；所述用免疫检测诊断脓毒症的产品包括：与CYB561A3蛋白特异性结合的抗体；所述用原位杂交诊断脓毒症的产品包括：与CYB561A3基因的核酸序列杂交的探针；所述用微阵列芯片诊断脓毒症的产品包括：蛋白芯片和基因芯片；其中，蛋白芯片包括与CYB561A3蛋白特异性结合的抗体，基因芯片包括与CYB561A3基因的核酸序列杂交的探针。在本专利技术的一个具体实施方式中，所述用实时定量PCR特异扩增CYB561A3基因的引物序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。进一步，所述诊断脓毒症的产品包括芯片和/或试剂盒；其中所述芯片包括基因芯片、蛋白质芯片；所述试剂盒包括基因检测试剂盒和蛋白免疫检测试剂盒。本专利技术提供了一种诊断脓毒症的产品，所述的产品能够通过检测样品中CYB561A3基因的表达水平来诊断脓毒症。进一步，上面所述的产品包括芯片、或试剂盒。其中，所述芯片包括基因芯片、蛋白质芯片；所述基因芯片包括固相载体以及固定在固相载体上的寡核苷酸探针，所述寡核苷酸探针包括用于检测CYB561A3基因转录水平的针对CYB561A3基因的寡核苷酸探针；所述蛋白质芯片包括固相载体以及固定在固相载体上的CYB561A3蛋白的特异性抗体；所述试剂盒包括基因检测试剂盒和蛋白免疫检测试剂盒；所述基因检测试剂盒包括用于检测CYB561A3基因转录水平的试剂；所述蛋白免疫检测试剂盒包括CYB561A3蛋白的特异性抗体。其中，所述基因芯片可用于检测包括CYB561A3基因在内的多个基因(例如，与脓毒症相关的多个基因)的表达水平。所述蛋白质芯片可用于检测包括CYB561A3蛋白在内的多个蛋白质(例如与脓毒症相关的多个蛋白质)的表达水平。通过将多个与脓毒症的标志物同时检测，可大大提高脓毒症诊断的准确率。进一步，所述基因检测试剂盒用于特异性扩增CYB561A3基因引物对。进一步，所述用于扩增CYB561A3基因的引物对的序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。在本专利技术中，“抗体”覆盖单克隆抗体、多克隆抗体、多特异性抗体(例如双特异性抗体)、及抗体片段、组合抗体等，只要它们展现出期望的生物学活性即可。“单克隆抗体”指从一群基本上同质的抗体获得的抗体，即构成群体的各个抗体相同和/或结合相同表位，除了生产单克隆抗体的过程中可能产生的可能变体外，此类变体一般以极小量存在。此类单克隆抗体典型的包括包含结合靶物的多肽序列的抗体，其中靶物结合多肽序列是通过包括从众多多肽序列中选择单一靶物结合多肽序列在内的过程得到的。单克隆抗体还包括“嵌合”抗体，其中重链和/或轻链的一部分与衍生自特定物种或属于特定抗体类别或亚类的抗体中的相应序列相同或同源，而链的剩余部分与衍生自另一物种或属于另一抗体类别或亚类的抗体中的相应序列相同或同源，以及此类抗体的片段，只要它们展现出期望的生物学活性即可。“抗体或抗体片段”指无论自天然生成抗体的任何物种衍生，还是通过重组DNA技术创建；无论自血清、B细胞、杂交瘤、转染瘤、酵母或细菌分离的抗体(例如IgG、IgM、IgA、IgD或IgE)或片段(诸如Fab、F(ab’)2、Fv、二硫化物连接的Fv、scFv、闭合构象多特异性抗体、二硫化物连接的scFv、双抗体)。在本专利技术中，术语“探针”指能与另一分子的特定序列或亚序列或其它部分结合的分子。除非另有指出，术语“探针”通常指能通过互补碱基配对与另一多核苷酸(往往称为“靶多核苷酸”)结合的多核苷酸探针。根据杂交条件的严谨性，探针能和与该探针缺乏完全序列互补性的靶多核苷酸结合。探针可作直接或间接的标记，其范围包括引物。杂交方式，包括，但不限于：溶液相、固相、混合相或原位杂交测定法。在本专利技术中，术语“微阵列”是杂交阵列原件有序排列在基质上，所述杂交阵列原件诸如聚核苷酸探针(例如寡核苷酸)或结合剂(例如抗体)。所述基质可以是固体基质，例如，玻璃或二氧化硅玻片、珠、纤维光学粘结剂或半固态基质，例如硝酸纤维素膜。核苷酸序列可以是DNA、RNA或其中的任何排列。各种探针阵列已经描述在文献中并且可以用于本专利技术上下文中检测可能与本文所述表型相关的标志物。例如，DNA探针阵列芯片或较大的DNA探针阵列晶片(否则，可以通过打断晶片而获得各个体芯片)用于本专利技术的一个实施方案。DNA探针阵列晶片一般包含玻璃晶片，其上放置了高密度DNA探针(短DNA片段)阵列。这些晶片各自可以保持例如约6000万个用于识别较长样品DNA序列(例如，来自个体或群体，例如，包含所关注的标志物)的DNA探针。用玻璃晶片上的DNA探针组识别样品DNA通过DNA杂交进行本文档来自技高网...

【技术保护点】
检测CYB561A3基因的试剂在制备诊断脓毒症的产品中的应用。

【技术特征摘要】
1.检测CYB561A3基因的试剂在制备诊断脓毒症的产品中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述CYB561A3基因在脓毒症患者中表达下调。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述诊断脓毒症的产品包括：通过RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交或微阵列芯片诊断脓毒症的产品。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述用实时定量PCR诊断脓毒症的产品至少包括一对特异扩增CYB561A3基因的引物。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述特异扩增CYB561A3基因的引物序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述诊断脓毒症...

【专利技术属性】
技术研发人员：李婷，董东，
申请(专利权)人：北京泱深生物信息技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11