抗光系统Ⅱ抑制剂类除草剂马唐的PCR检测方法技术方案

光系统Ⅱ抑制剂类除草剂是化学除草剂中的一大类别，psbA基因是其靶标作用位点。本发明专利技术提供用于检测抗光系统Ⅱ抑制剂类除草剂马唐的特异性PCR引物对（Seq ID No.1和Seq ID No.2）和含有该引物对的PCR检测试剂盒。本发明专利技术的引物对特异性好，灵敏度高，经PCR试验证明(图1)能够将马唐的psbA基因序列扩增出来，而扩增出的序列含有已报道的所有与抗性相关的位点。该方法敏度和特异性均能够实现对田间疑似抗光系统Ⅱ抑制剂类除草剂马唐的快速鉴定，从而指导生产实践中抗性杂草的科学治理。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及抗除草剂杂草检测领域，具体地说，涉及一种抗光系统Ⅱ抑制剂类除草剂马唐的PCR检测方法及试剂盒。
技术介绍
马唐(Digitaria sanguinalis)是我国黄淮海玉米种植区的主要恶性杂草之一。黄淮海地区玉米田的7个主要杂草群系，有6个群系以马唐为优势种。目前马唐化学防除主要选用莠去津等除草剂。但由于该类除草剂分子靶标单一，长期使用易引起杂草抗药性。近些年来，抗性马唐的问题在我国黄淮海等地的一些玉米田已经非常突出，例如，在个别地域内，以常规剂量喷施莠去津已经无法有效防除马唐。杂草产生抗性，则这些农田不能继续使用该类除草剂。但在生产实践中人们对杂草抗性的认识不足，盲目增大用药剂量，不仅增加了成本，使药害风险加大，严重影响农民收入和国家粮食安全。传统的抗药性杂草检测通常采用室内生物测定法，既对田间采集的疑似抗性的杂草的种子在室内进行培养，在一定叶龄喷施除草剂后，调查株防效和地上部分生物量来计算抗性指数。这种方法能够客观地评价某种杂草对相应除草剂的抗性情况，但也有其局限性，主要表现在以下两方面：一是不能当季、当时进行检测，二是占地多、时间长、工作量大。因此，目前迫切需要本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于检测抗光系统Ⅱ抑制剂类除草剂马唐的特异性PCR引物对，其特征在于：用于特异性扩增马唐psbA基因的引物对，引物序列如下：正向引物MT‑psbA‑F: 5’‑GGTGTAGCTTGTTATATGGGTCGT‑3’反向引物MT‑psbA‑R: 5’‑ GCCCAAGTATTAATAACACGTCC ‑3’其中，psbA 基因的GeneBank登录号为KM453691.1。

【技术特征摘要】
1.用于检测抗光系统Ⅱ抑制剂类除草剂马唐的特异性PCR引物对，其特征在于：用于特异性扩增马唐psbA基因的引物对，引物序列如下：正向引物MT-psbA-F: 5’-GGTGTAGCTTGTTATATGGGTCGT-3’反向引物MT-psbA-R: 5’- GCCCAAGTATTAATAACACGTCC -3’其中，psbA 基因的GeneBank登录号为KM453691.1。2.含有权利要求1的引物对的用于检测抗光系统Ⅱ抑制剂类除草剂马唐的试剂盒。3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于所述试剂盒还包括dNTPS、Taq DNA聚合酶、含有Mg2+的PCR反应缓冲液。4.根据权利要求2或3所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括标准对照模板。5.抗光系统Ⅱ抑制剂类除草剂马唐的PCR检测方法，其特征在于：利用权利要求1所述引物对或权利要求2-4任-项所述试剂盒检测抗光系统Ⅱ抑制剂类除草剂马唐。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：包括以下步骤：1）选取田间待检测植株或以温室自行种植的植株...

【专利技术属性】
技术研发人员：李健，李美，高兴祥，房锋，
申请(专利权)人：山东省农业科学院植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：山东;37