本发明专利技术公开了以阿比多尔为主要成分的药物及其在药学上可接受的盐在抗中东呼吸系统综合征冠状病毒感染方面的应用。本发明专利技术首次发现盐酸阿比多尔对中东呼吸道病毒有抗病毒作用，可阻断中东呼吸系统综合征冠状病毒感染宿主细胞，可用作治疗抗中东呼吸系统综合征冠状病毒感染方面的疾病治疗。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术是关于盐酸阿比多尔在抗中东呼吸系统综合征冠状病毒感染方面的应用，属于医药
技术介绍
中东呼吸综合征(Middle East Respiratory Syndrome，MERS)，又称新沙士，2012年首次在伦敦发现，并命名为1号新型冠状病毒[Lodon1 novel CoV 2012]，其结构和SARS的病毒相似，源于中东。2013年5月23日，世界卫生组织将新型冠状病毒感染命名为“中东呼吸综合征”。冠状病毒在系统分类上属冠状病毒科(Coronaviridae)冠状病毒属(Coronavirus)。冠状病毒属的病毒是具外套膜(envelope)的正链单股RNA病毒，直径约80～120nm，其遗传物质是所有RNA病毒中最大的，只感染人、鼠、猪、猫、犬、禽类脊椎动物。冠状病毒的一个变种是引起非典型肺炎的病原体，属于RNA病毒。冠状病毒最先是1937年从鸡身上分离出来，病毒颗粒的直径60-200nm，平均直径为100nm，呈球形或椭圆形，具有多形性。病毒有包膜，包膜上存在棘突，整个病毒像日冕，不同的冠状病毒的棘突有明显的差异。在冠状病毒感染细胞内有时可以见到管状的包涵体[Nederlands Tijdschrift Voor Geneeskunde,2014,158(158):A8119-A8119]。中东呼吸系统综合征冠状病毒(MERS-CoV)与其它冠状病毒类似，其形态结构为圆形或卵圆形，病毒颗粒直径大约60～220nm，核心为单股正链RNA，病毒的衣壳外面包含有糖蛋白组成的刺突样的结构，因其覆盖表面而使得整个病毒粒子在电镜下如皇冠样的形状，因而得名冠状病毒。中东呼吸系统综合征冠状病毒的宿主源于中东单峰骆驼，其全基因组大小约为301Kb，至少包含有10个开放阅读框(open reading frame,ORF)，分别编码一个大的复制酶多聚蛋白、表面刺突糖蛋白、小包膜蛋白、外膜蛋白、核衣壳蛋白、及5个非结构蛋白等。其中由ORF1a/ORF1b编码的复制酶多聚蛋白包含两个多聚蛋白pp1a和pp1ab，然后由蛋白酶剪切为15或16个非结构蛋白产物NSP1-NSP16，而NSP12即为RNA依赖的RNA聚合酶[New England Journal of Medicine,2013,369(5):407-416]。自2012年下半年开始，沙特阿拉伯最先开始零星出现患有急性呼吸系统综合征并伴随肾功能衰竭的病人，病原体检测显示这些患者均染有一种新病毒。它与人们熟知的非典病毒同属冠状病毒，但类型不同，其传染性弱于非典病毒，但病死率比非典高，达40％。此后，约旦、卡塔尔、阿联酋、突尼斯乃至法国、德国、英国、美国先后发现该病确诊病例。世界卫生组织将这一新型冠状病毒命名为“中东呼吸系统综合征冠状病毒”。值得特别关注的是，这个疾病到现在没有可用的疫苗和药物治疗方法。在针对东呼吸系统综合征冠状病毒(MERS-CoV)病毒药物研发方面，我们试探的去研究盐酸阿比多尔抗MERS-CoV病毒作用。盐酸阿比多尔，已经被证实对多种病毒具有抗病毒广谱作用[Arbidol:a broad-spectrum antiviral compound that blocks viral fusion.Curr Med Chem.2008,15(10):997-1005]。其广谱性的作用机制源于它存在膜融合抑制作用[Membrane fusion.Nature Structural&Molecular Biology.2008,15(7):658-64]。基于他的作用机制，我们假设他对中东呼吸系统综合征冠状病毒依然有抗病毒作用机制。所以我们开展盐酸阿比多尔在中东呼吸系统综合征冠状病毒抗病毒药效的应用性研究。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供盐酸阿比多尔在制备预防或治疗抗中东呼吸系统综合征冠状病毒的药物中的应用。具体而言，为解决的本专利技术的技术问题，采用如下技术方案：本专利技术提供了如结构式(I)所示的盐酸阿比多尔在制备预防和治疗抗中东呼吸系统综合征冠状病毒的药物中的应用。所述的药物是以结构式(I)所示的盐酸阿比多尔作为有效成分的药物。上述的应用中，所述的药物是以结构式(I)所示的盐酸阿比多尔作为有效成分的单体化合物所述药物为结构式(I)所示的盐酸阿比多尔和药学上可接受的载体或赋形剂。所述药物的剂型为丸剂、片剂、胶囊或口服液。本专利技术的化合物的体外半数细胞毒性评价模型为MTT法半数细胞毒性的检测评价模型。本专利技术所述的MTT法半数细胞毒性评价模型是指使用MTT染色剂能与活细胞线粒体结合，可定量检测出细胞的半数细胞毒性浓度(TC50)。本专利技术化合物外抗病毒给药模型分别为预防给药模型，和治疗给药模型及预防与治疗混合模式。本专利技术所述的预防与治疗混合模型是用200μL的倍比稀释的药物长满单层的24孔板细胞板作用24小时。后去除药物，加200μL病毒滴度为100TCID50/0.1mL的病毒液吸附两小时，去病毒液，换200μL的倍比稀释的药物的维持培养基，48小时后，观察细胞病变，收集病毒液，测试各组的TCID50病毒滴度，评价药物抑制率。本专利技术通过运用体外三种抗病毒药效评价模型，评价盐酸阿比多尔化合物对中东呼吸系统综合征冠状病毒抑制作用，首次发现盐酸阿比多尔对中东呼吸道病毒有抗病毒作用，可阻断中东呼吸系统综合征冠状病毒感染宿主细胞，可用作治疗抗中东呼吸系统综合征冠状病毒感染方面的疾病治疗。附图说明图1是盐酸阿比多尔抗中东呼吸系统综合征冠状病毒感染模型。长满单层VERO细胞的24孔细胞板模型，黑色孔代表含孵育病毒及药物药效组，无色孔代表无药药物作用的病毒对照组，阴影线孔代表含无病毒孵育的药物毒性组。具体实施方式实施例1.药物评价原理病毒扩增将非洲绿猴肾细胞(VERO)按3X105个/孔，接种至96孔板中，置37℃，5％CO2培养，待长满单层。将中东呼吸系统综合征冠状病毒临床分离株100倍稀释接种到长满单层细胞的96孔板中,置37℃，5％CO2培养两天(含正常对照组)。两天后，病变程度高达75％以上，置-80℃超低温冰箱，反复冻融一次，收集细胞扩增的病毒液，3000r/min离心30分钟，去沉淀物，分装小管置-80℃超低温冰箱长期保存。中东呼吸系统综合征冠状病毒半数致死滴度(TCID50)测定将非洲绿猴肾细胞(VERO)按3X105个/孔，接种至96孔板中，置37℃，5％CO2培养，待长满单层。加入十倍倍比稀释的MERS-CoV病毒液，100μL/孔，37℃孵育2小时或3000转离心1小时；弃去上清，加入新鲜培养液，100μL/孔，2日后观察结果，记录CPE。并用Reed-Muench计算病毒半数致死滴度(TCID50)[Reed LJ,Muench H.A simple method of estimating fifty percent endpoints.Am J Hyg,1938,27(3):493-497]。盐酸阿比多尔抗中东呼吸系统综合征冠状病毒药效评价96孔板单层细胞以PBS洗涤1次，加入含约100TCID50的病毒稀释液100μL/孔，37℃、5％CO2培养箱中孵育2小时，弃去病毒液，加入2倍梯度稀释的药物本文档来自技高网...
【技术保护点】
如结构式(1)所示的盐酸阿比多尔在制备预防和治疗抗中东呼吸系统综合征冠状病毒的药物中的应用,其中：其中HO‑代表羟基，Br‑代表溴。
【技术特征摘要】
1.如结构式(1)所示的盐酸阿比多尔在制备预防和治疗抗中东呼吸系统综合征冠状病毒的药物中的应用,其中：其中HO-代表羟基，Br-代表溴。2.根据权利要求1的应用，其特征在于，所述的药物是以结构式(I)所示的盐酸阿比多尔作为有效成分的药物,3.根据权利要求1的应用，其特征在于，所述药物为盐酸阿比多尔及其药学可可接受的盐及其在药学上可接受的载体或赋形剂。4.一种用于预...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨子峰，胡文辉，李润峰，赵金存，赵昕，钟南山，
申请(专利权)人：广州医科大学附属第一医院，广州呼吸疾病研究所，中国科学院广州生物医药与健康研究院，
类型：发明
国别省市：广东;44
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