本发明专利技术公开一种耐盐细菌T5S2及其在微生物肥料中的应用，通过新疆准噶尔盆地盐碱地区盐爪根际土壤样品中分离一株耐盐细菌新种T5S2，能耐受1‑15%浓度的NaCl，在30℃‑37℃生长良好，在生长过程中无须诱导即可产生ACC脱氨酶和IAA吲哚乙酸，利用菌种制备微生物肥料应用到盐碱地棉花、玉米等经济作物中，能够保证盐碱地棉花的发芽率达到77.8%，成活率达到65.4%，株高、株数和单铃株数要明显高于常规处理棉花，盐碱地玉米出苗率均从64.5%增加到80%以上，亩产玉米达600kg/亩，使得0‑30cm土层土壤总盐含量下降了60‑70%，具有明显的降盐增产作用，具有广泛的应用价值。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物菌种应用
，具体的涉及一种耐盐细菌及其在制备微生物肥料中应用的
技术介绍
盐单胞菌(Halomonas)是一类耐盐性很强的细菌，大多可在0.1％-20％NaCl浓度下生长，有的在0.1％-32.5％浓度下也能生长，通常分布于盐湖、盐场等处，属于中度嗜盐菌(moderatehalophiles)。它们和极端嗜盐古菌(extrem eha lophiles)都属于极端微生物，但比嗜盐古菌分布更广泛，对营养要求低，更易于适应环境。盐单胞菌独特的生物学特性、生理机制和遗传机制逐渐引起研究人员的兴趣。目前由于灌溉不当和其它不合理垦殖所引起的土壤次生盐渍化相当普遍，是造成作物减产减收的主要障碍因子，可谓是“旱、涝、盐、碱、瘦”五害俱全，对作物的生长发育影响极大，在盐胁迫下，棉花叶片发软、色暗、功能期短，脱落早，侧根发生少、发生区黄褐色，干物质积累减少，生长停滞，甚至死苗。目前改善土壤盐渍化的方法主要是化学方法，但是化学肥料和农药的过量施用带来了日益严重的环境问题和食品安全问题，随着人们对保护环境的日益重视，为了改良生态环境、改善人们生活，采用生物方法解决这些问题是目前的发展趋势。微生物肥料具有低投入、高产出、高效益、高质量、原料充足、制作工艺简单，容易推广等优点，微生物肥料在农业生产中将充分发挥其应有的经济效益和生态效益，因此，生物肥料的技术开发与应用推广，是农业生产和肥料发展的必然趋势，微生物肥料的开发非常符合现代生态农业和农业可持续发展的要求。申请号为201410623410.1的专利技术专利《一种耐盐碱微生物菌群及其应用》公开了一种耐盐碱复配微生物活性菌群，披露了现有常见的异希瓦氏菌、假单胞菌和盐单胞菌，但是该耐盐碱复配微生物活性菌群主要用于处理高盐碱含量的废弃钻井泥浆和含油污泥。申请号为201210572369.0的专利技术专利《黄河盐单胞菌BJGMM-B45及其应用》公开了一株具有优良的盐耐受性的细菌—黄河盐单胞菌(Halomonas huanghegensis)BJGMM-B45，文中披露了该菌株具有抗生素抗性，可以作为新的转基因生物的基因供体，但是并未详细记载其他特殊的功效。申请号为201310466328.8的专利技术专利《一种微生物改良盐碱土壤的方法》公开了一种利用伸长盐单胞菌、木素芽孢杆菌和碱性芽孢杆菌混合的菌剂改良盐碱土壤的方法，但是该技术方案包含的三种菌种为现有常见菌种，且只披露了该微生物制剂菌粉能够提高大豆、番茄的发芽率，并未记载更多的有益效果。由于新疆广阔的地域环境，蕴藏着丰富的微生物。研究新疆极端微生物不仅有助于扩大极端微生物资源库，也有利于新疆特殊环境微生物的开发和利用。现有技术研究表明，有关盐单胞菌在生物防治和微生物肥料方面研究较为少见，因此，研究利用极端微生物新菌种特性及其应用具有现实的意义。
技术实现思路
针对现有技术中有关盐单胞菌在微生物肥料方面的研究记载较少的技术现状，本专利技术旨在提供一种新菌种耐盐细菌T5S2及其在微生物肥料中的应用。本专利技术通过在新疆准噶尔盆地盐碱地区盐爪爪根际土壤样品中分离筛选出一株盐单胞菌新种(Halomonas sp.)T5S2CGMCC No.12642，利用分离出的菌种作为微生物肥料，应用到盐碱地棉花、玉米等经济作物中，可明显提高农作物出苗率、成活率等生长特性，使得土层土壤总盐含量下降了60-70％，具有明显的降盐增产作用，在微生物肥料
具有广泛的应用价值。本专利技术采用的主要技术方案：本专利技术通过从新疆准噶尔盆地盐碱地区盐爪爪根际土壤样品中分离得到。样品采取梯度稀释法，称取1g土壤样品悬浮于含PAF培养液的三角瓶中，30℃、150r/min振荡培养24h后经DF培养液、ADF培养液两次转接，进行梯度稀释，涂布于ADF固体平板恒温培养。从中筛选出一株可应用于微生物肥料方面的盐单胞菌新种T5S2。利用本专利技术分离筛选出的编号为T5S2的细菌菌株制备微生物肥料，应用到盐碱地棉花、玉米等经济作物中，可明显提高盐碱地作物出苗率、成活率等生长特性，同时有效降低土壤含盐量，将本专利技术提供的微生物肥料应用于罗布麻、向日葵和甜菜等经济作物中具有明显的降盐增产作用，可见，利用本专利技术提供的盐单胞菌新种T5S2制备微生物肥料的开发应用具有非常大的应用前景。本专利技术具体提供一种盐单胞菌新种(Halomonas sp.)T5S2CGMCC No.12642。通过从新疆准噶尔盆地盐碱地区盐爪爪根际土壤样品中分离得到取样，筛选出一株耐盐细菌盐单胞菌(Halomonas sp.)T5S2，该菌具有较高的耐盐特性，在生长过程中无须诱导即可产生ACC脱氨酶和IAA吲哚乙酸，该菌株通过常规发酵技术获得的微生物肥料具有良好的促生长、降盐的功效。本专利技术根据新疆地理环境的特殊性和新疆极端环境微生物资源的富集地特点，通过从新疆准噶尔盆地盐碱地区盐爪爪根际土壤样品中进行微生物菌种的培养、分离与筛选一批优良菌种，并从中分离筛选出一株编号为T5S2的盐单胞菌(Halomonas sp.)，经微生物学分类与鉴定，属于盐单胞菌属，能耐受1-15％浓度的NaCl，在30℃-37℃生长良好，45℃生长明显受抑制，可在含有1.0％NaCl的LB固体培养基上生长，细菌生长圆形，微凸起，奶油色，粘液状菌落，可见，盐单胞菌(Halomonas sp.)T5S2能耐受1-15％浓度的NaCl，在30℃-37℃生长良好，具有在生长过程中无须诱导即可产生ACC脱氨酶和IAA吲哚乙酸鲜明的特点，参照《伯杰氏细菌鉴定手册》及《常见细菌鉴定手册》等对菌株进行形态学、生理生化测定，确定T5S2菌株为盐单胞菌属中成员；序列参见附后提供的SEQUENCE LISTING，经16SRNA同源分析、系统发育分析，通过BLAST同源比对，确定与实验菌株亲缘关系最近的种属。从数据库获得相关种属的序列，并结合细菌生物多样性研究中心数据库，进行聚类分析和系统进化树构建。T5S2菌株归属于盐单胞菌(Halomonas sp.)，菌株T5S2与该属模式菌株序列比对同源性分别为96.7％(Halomonas ventosae Al12T)、96.4％(Halomonas jebtebsis AIR-2T)、96.4％(Halomonas desisderata FB2T)、96.2％(Halomonas rifensis HK31T)，暂命名为盐单胞菌(Halomonas sp.)T5S2。该菌株已于申请日前保藏于布达佩斯条约微生物国际保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)；地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编：100101；保藏日期是2016年06月20日，菌种保藏号为CGMCC No.12642，经微生物学鉴定暂命名为盐单胞菌(Halomonas sp.)T5S2。盐单胞菌(Halomonas sp.)T5S2的生理生化特性：革兰氏染色呈阴性、好氧、杆菌，单独或成对出现，在过氧化氢酶和氧化酶测试中呈阳性，糖发酵不产酸；吲哚、甲基红反应阴性；以Biolog Microstation系统的GN 2测定卡进行测试，菌株T5S2可以利用乙酸，柠檬酸、D-半乳糖、D-葡本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种盐单胞菌（Halomonas sp.）T5S2，其特征在于，所述的盐单胞菌（Halomonas sp.）T5S2的菌种保藏号为CGMCC No.12642。
【技术特征摘要】
1.一种盐单胞菌（Halomonas sp.）T5S2，其特征在于，所述的盐单胞菌（Halomonas sp.）T5S2的菌种保藏号为CGMCC No.12642。2.一种利用盐单胞菌（Halomonas sp.）T5S2 CGMCC No.12642制备液体微生物肥料的方法，具体方法如下：（1）将盐单胞菌（Halomonas sp.）T5S2 CGMCC No.12642接种于LB固体斜面培养基，33℃培养3d，即得到斜面菌种；斜面试管中加5 mL无菌水剧烈振荡后，使用双层灭菌纱布过滤， 滤液经稀释制备成含有106 个孢子悬浮液；吸取上述孢子悬浮液1mL， 接种于 LB液体培养基中，33℃、150rpm振荡培养3d，得到种子液；（2）液体微生物肥料的制备方法：吸取上述种子液，按3%接种量接种于发酵培养基，33℃、150rpm培养6d，收获菌体及发酵液，制备获得相应的液体微生物肥料；采用的发酵培养基为：按照每100ml发酵培养基中蛋白胨 5g、酵母浸出粉2g、葡萄糖 20g、磷酸氢二...
【专利技术属性】
技术研发人员：王晓桦，张謇，汪玲，许咏梅，杨金钰，冯新玉，邝作玉，唐鹏，王蓓蓓，崔艺凡，王春燕，唐天成，
申请(专利权)人：新疆山川秀丽生物有限公司，
类型：发明
国别省市：新疆;65
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