两种水稻纵卷叶螟幼虫的分子生物学区分方法技术

本发明专利技术涉及水稻生产上的两种水稻纵卷叶螟(Cnaphalocrocis medinalis和Marsamia patnalis)幼虫的分子生物学区分方法，分别以两种水稻纵卷叶螟幼虫基因组DNA为模板，用特异性引物进行PCR扩增，扩增产物进行测序，利用基因分析软件GENEDOC对二者进行分析，获得具有明显差异的一对序列，分别定义为检验序列A和检验序列B；将待检测水稻纵卷叶螟幼虫样本的基因组DNA扩增产物序列分别与已知检验序列A与检验序列B比较，与检验序列A一致的为Cnaphalocrocis medinalis，与检验序列B一致的为Marsamia patnalis。该方法稳定性高、灵敏度高，专用于两种水稻纵卷叶螟幼虫的高灵敏度准确检测区分。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及水稻生产上两种水稻纵卷叶螟Cnaphalocrocis medinalis和Marsamia patnalis幼虫的分子生物学区分方法，属于生物

技术介绍
水稻纵卷叶螟Cnaphalocrocis medinalis和Marsamia patnalis是水稻生产上的两种重要害虫，均取食为害水稻叶片并纵向形成卷叶，影响叶片光合作用，造成水稻减产。两种水稻纵卷叶螟(Cnaphalocrocis medinalis和Marsamia patnalis)的幼虫形态和危害方式相似，幼虫均先在水稻叶尖危害，后往水稻叶片中部危害，吐丝将叶片纵卷，并取食。对水稻造成的危害状态也相似，都会形成白叶。根据田间危害状况很难判断是哪种水稻纵卷叶螟。这两种水稻纵卷叶螟幼虫均呈黄绿色，两者的细微差别肉眼很难分辨。再者，当虫体受到微生物感染，虫体会完全丧失原有的形态特征，导致无法判断是何种水稻纵卷叶螟。目前，对于这两种水稻纵卷叶螟幼虫的鉴定，通常借助形态学特征来区分，因其形态极为相似而很容易混淆。区分时还必须保证待测样本的关键形态特征保存完整，但当形态特征丧失或变形后，则无法准确区分这两本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用分子生物学方法准确检测水稻纵卷叶螟Marsamia patnalis幼虫的方法，其中，该方法包括：提取待检测的水稻纵卷叶螟幼虫样本的基因组DNA作为PCR的模板，利用所设计的引物对模板DNA进行PCR扩增，对扩增产物进行测序，并把获得的序列与检验序列B进行分析，与检验序列B吻合的是Marsamia patnalis；不与检验序列B吻合的不是Marsamia patnalis；其中，检验序列B为SEQ ID NO:2所示的序列。

【技术特征摘要】
1.一种利用分子生物学方法准确检测水稻纵卷叶螟Marsamia patnalis幼虫的方法，其中，该方法包括：提取待检测的水稻纵卷叶螟幼虫样本的基因组DNA作为PCR的模板，利用所设计的引物对模板DNA进行PCR扩增，对扩增产物进行测序，并把获得的序列与检验序列B进行分析，与检验序列B吻合的是Marsamia patnalis；不与检验序列B吻合的不是Marsamia patnalis；其中，检验序列B为SEQ ID NO:2所示的序列。2.根据权利1要求所述的方法，用于水稻纵卷叶螟幼虫待检测样本基因组DNA扩增的特异性引物为上游引物F：5’-ATGAACATCGACATTTCGAACGCACAT-3’和下游引物R：5'TTCTTTTCCTCCGCTTAGTAATATGCTTAA-3'。3.根据权利2要求所述的方法，所述的PCR扩增产物的系统为：2...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨亚军，吴志红，郑许松，吕仲贤，徐红星，田俊策，鲁艳辉，
申请(专利权)人：浙江省农业科学院，
类型：发明
国别省市：浙江;33