一株甲基营养型芽孢杆菌ZY3A及其在促进油麦菜生长上的应用制造技术

技术编号:13675376 阅读:55 留言:0更新日期:2016-09-08 01:04
本发明专利技术公开了一株甲基营养型芽孢杆菌ZY3A及其应用,该菌株的分类命名为甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)ZY3A,已保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC,保藏编号:CCTCC NO:M2015547。本发明专利技术的甲基营养型芽孢杆菌ZY3A可以在LB培养基上良好的生长。经过测量油麦菜株高可知甲基营养型芽孢杆菌ZY3A稀释溶液能促进油麦菜生长。实验室拮抗实验表明,ZY3A具有明显的拮抗效果,可见,甲基营养型芽孢杆菌ZY3A可以开发为微生物肥料,在促进油麦菜生长的以及抗病虫害中具有广泛的应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物肥料
,具体涉及一株甲基营养型芽孢杆菌ZY3A及其在促进油麦菜生长上的应用
技术介绍
芽孢杆菌是一种革兰氏阳性,产芽孢的细菌。芽孢杆菌属于细菌界(Bacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)、芽孢杆菌和乳杆菌组(Bacilli and Lactobacilli)、芽孢杆菌纲(Bacilli)、芽孢杆菌目(Bacillales)、芽孢杆菌科(Bacillaceae)、芽孢杆菌属(Bacillus)以及其他21个近似属,其中仅芽孢杆菌属就包含200多种菌。而目前广泛研究的芽孢杆菌指的即是芽孢杆菌属(Bacillus)的各种菌种。芽孢杆菌产生的芽孢抗逆性极强,芽孢杆菌本身营养需求简单,对植物发育安全,更可以产生多种活性代谢物质,对土壤中多种病原细菌,病原真菌等具有拮抗作用,所以芽孢杆菌是开发微生物肥料和微生物农药的重要菌种来源。甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)是一类广泛存在于土壤当中的好氧性细菌。它最先发现于水稻根系的土壤中。近期的研究表明,甲基营养型芽孢杆菌是解淀粉芽孢杆菌植物亚种(Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum)的同义词。根据目前的研究,许多甲基营养性细菌不仅可以促进土壤矿物及有机物的分解,为植物提供营养;同时还可以分泌IAA,Butanidiol等植物激素以及小分子气调物质;此外,甲基营养性细菌还可以诱导植物提高自身抗病害能力(ISR),并可以通过合成脂肽类,细菌素,抗菌蛋白等抑菌物质,以及形成生物菌膜(Biofilm)等物理屏障,而直接帮助植物抵御病原微生物。总的来讲,甲基营养型芽孢杆菌(解淀粉芽孢杆菌植物亚种)是目前国内外公认的无毒安全的植物促生土壤细菌,也是目前我国使用量最为广泛的微生物肥料菌种来源之一。甲基营养型芽孢杆菌不仅能够促进植物生长,还可以帮助植物抵御病害,因此,分离筛选具有高效植物促生抗病活性的甲基营养型芽孢杆菌菌株,进而开发为微生物肥料,对于减少我国化学肥料,化学农药的使用量,提升我国土壤质量,促进我国农林业的可持续发展来讲,具有十分重要的意义。油麦菜(Lactuca sativa var longifoliaf. Lam)也称莜麦菜、生菜或者苦菜,是一年生或二年草本植物,属于菊科莴苣属的植物。油麦菜嫩芽和嫩梢均可食用而且味道鲜美,是常见的食叶蔬菜。油麦菜植株高25-100厘米。油麦菜的茎是单生直立,在茎的上部是圆锥状花序的分枝,茎枝为白色。油麦菜的基生叶片和下部茎叶片比较大,叶片不分裂呈倒披针形、椭圆形或椭圆状倒披针形;油麦菜叶片长6-15厘米,宽1.5-6.5厘米,叶片顶端为急尖、短渐尖或圆形,没有叶柄;油麦菜叶片的边缘呈波状或者有细锯齿并且向上的渐渐变小,油麦菜的圆锥花序分枝下部的叶片和圆锥花序分枝上的叶片非常小,叶片呈卵状心形并且没有叶柄,叶片的基部为心形或箭头状抱茎,边缘全缘,叶片的上下两面没有毛。油麦菜的头状花序为多数或者极多数,在茎枝顶端排成圆锥花序。油麦菜的种植历史悠久。在公元50年就有了关于油麦菜的描述,中世纪时期一些作品中有许多关于油麦菜的描写,其中包括草药方面的应用。油麦菜最早可能来源于古埃及人从一些杂草中筛选出来优良的种植品种,由于油麦菜有肥大的肉质叶片,所以古埃及人将油麦菜用作食用蔬菜,并用其种子榨油。后来油麦菜被引种到了希腊和古罗马地区,当地人将它命名为“莴苣”。从16-18世纪,油麦菜在欧洲发展出许多品种,通过18世纪中期的作品描述可以知道在当时油麦菜在花园中也有种植。后来油麦菜成为了欧洲和北美洲地区的蔬菜市场的主导者。到了20世纪末,油麦菜成为在全世界都大规模种植和消费的蔬菜品种。
技术实现思路
专利技术目的:针对现有技术中存在的不足,本专利技术的目的是提供一株甲基营养型芽孢杆菌ZY3A,具有促进油麦菜生长中的应用能力。本专利技术的另一目的是提供上述甲基营养型芽孢杆菌ZY3A在促进油麦菜生长中的应用。技术方案:为了实现上述专利技术目的,本专利技术采用的技术方案为:一株甲基营养型芽孢杆菌ZY3A,其分类命名为甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)ZY3A,已保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC,保藏编号:CCTCC NO: M2015547;保藏时间2015.09.16,保藏地址为中国典型培养物保藏中心(中国.武汉.武汉大学)。所述的甲基营养型芽孢杆菌ZY3A在促进油麦菜生长中的应用。所述的甲基营养型芽孢杆菌ZY3A在抗油麦菜病害中的应用。所述的甲基营养型芽孢杆菌ZY3A的培养物在促进油麦菜生长中的应用。所述的甲基营养型芽孢杆菌ZY3A的培养物在抗油麦菜病害中的应用。该甲基营养型芽孢杆菌ZY3A,于2011年9月中旬从南京菜园土壤中筛选分离所得,其主要生物学特征:浅白色,不透明,菌落平坦而不隆起,略显干燥,菌落边缘不整齐;细菌呈杆状,革兰氏染色结果阳性。主要生理生化特性:在牛肉膏蛋白胨培养基上生长良好;接触酶实验呈阳性;过氧化氢酶活性测试呈阳性。甲基营养型芽孢杆菌ZY3A菌株的16S rRNA 基因序列如SEQ ID NO.1所示,采用BLAST(http:/www.ncbi.nlm.nih.gov)将菌株16S rRNA 基因序列与GenBank 中序列进行比对,并选择代表性的模式种构建系统发育树。结果表明,ZY3A与Bacillus sp.Pc3和Bacillus methylotrophicus strain YJ11-1-4相近度最高,确定该菌株为甲基营养型芽孢杆菌Bacillus methylotrophicus ZY3A。有益效果:与现有技术相比,本专利技术的甲基营养型芽孢杆菌ZY3A可以在LB培养基上良好的生长。经过测量油麦菜株高可知甲基营养型芽孢杆菌ZY3A稀释溶液能促进油麦菜生长。实验室拮抗实验表明,ZY3A具有明显的拮抗效果,可见,甲基营养型芽孢杆菌ZY3A可以开发为微生物肥料,在促进油麦菜生长的以及抗病虫害中具有广泛的应用。附图说明图1是甲基营养型芽孢杆菌ZY3A的菌落形态图;图2是甲基营养型芽孢杆菌ZY3A革兰氏染色结果图;图3是甲基营养型芽孢杆菌ZY3A促进油麦菜生长结果图;图4是甲基营养型芽孢杆菌ZY3A拮抗病原真菌实验结果图;上左:甲基营养芽孢杆菌ZY3A 对峙镰刀菌;上右:解淀粉芽孢杆菌 AK03对峙镰刀菌;下左:甲基营养芽孢杆菌ZY3A对峙拟丝核菌;下右:解淀粉芽孢杆菌 AK03对峙拟丝核菌;图5是甲基营养型芽孢杆菌ZY3A拮抗细菌实验结果图。具体实施方式下面的具体实施例,可以使本领域技术人员更好地理解本专利技术。实施例所描述的仅用于说明本专利技术,而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本专利技术。实施例1:甲基营养型芽孢杆菌ZY3A的活化培养 用接种环取少量甲基营养型芽孢杆菌ZY3A菌种划线于LB平板(胰蛋白胨 10g, 酵母粉 5g,氯化钠 5g,琼脂粉15g,去离子水1000mL)上,待表面菌液干后,倒置于37℃温箱培养过夜,平板上长出菌落,菌落形态图如图1所示,浅白色,不透明,菌落平坦而不隆起,略显干燥,菌落边缘不整齐;细菌呈杆状。检测其重要理化性质,具体为:革兰氏染本文档来自技高网
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【技术保护点】
一株甲基营养型芽孢杆菌ZY3A,其分类命名为甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)ZY3A,已保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC,保藏编号:CCTCC NO: M2015547;保藏时间2015.09.16,保藏地址为中国典型培养物保藏中心(中国.武汉.武汉大学)。

【技术特征摘要】
1.一株甲基营养型芽孢杆菌ZY3A,其分类命名为甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)ZY3A,已保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC,保藏编号:CCTCC NO: M2015547;保藏时间2015.09.16,保藏地址为中国典型培养物保藏中心(中国.武汉.武汉大学)。2.权利要求1所述的甲基营养型芽孢杆菌ZY3A在促进油麦菜生长中的应用。3.权利要求1所述的甲基营养型芽孢杆菌ZY3A在抗油麦菜病害中的应用。4.权利要求1所述的甲基营养型芽...

【专利技术属性】
技术研发人员:樊奔李昱龙陈晟陆一鸣
申请(专利权)人:南京林业大学
类型:发明
国别省市:江苏;32

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