本发明专利技术涉及一种油菜专用溶磷细菌及其菌剂。一种油菜专用溶磷细菌的菌株被命名为YP206，分类命名为葡萄牙双头菌（Labrys portucalensis），2016年5月23日保藏在中国典型培养物保藏中心，地址：中国.武汉.武汉大学；保藏编号为CCTCC M 2016274；将所述油菜专用溶磷细菌扩大培养得到菌剂；将菌剂用于拌种、或包衣、或浇根、或蘸根以实现有效接种，为油菜提供高浓度的速效磷营养。本发明专利技术的油菜专用溶磷细菌可与油菜凝集素发生凝集反应，因此与目标作物具有亲和性，可在油菜根部长期定居存活，发挥促进油菜生长、提高植株含磷量、增加油菜抗逆性。本发明专利技术可以降低油菜栽培磷肥用量，提高磷肥的利用率，改变现有生物肥料专一性不强、使用效果不明显的弊病，有利生态农业的发展。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于微生物
， 具体涉及一种油菜专用溶磷细菌及其应用。
技术介绍
油菜是一种重要的经济作物，磷素影响到油菜产量和质量。磷素是生命重要的组成元素，参与多种代谢途径，对于油菜尤其具有重要意义。磷参与脂肪代谢，促进油菜花芽分化，增加油脂合成量，改善油菜籽的品质，增加油菜籽含油量；缩短油菜生育期，促进植株健壮生长；增强油菜的抗倒伏、抗寒和抗旱能力，抵抗土壤pH的波动；能较好地增强油菜抗御多种病虫害的能力。因此，油菜栽培需要大量施用的化学磷肥。化肥施用促进了油菜的生产，但作物对磷肥的平均利用率只有30～40%左右，约有大量的磷肥流失、或被固定于土壤。因此过量使用磷肥造成大量能源和资源的浪费，并产生严重的环境污染。实际上农田土壤中的总磷含量很高，一般占土壤重量的0.1%～0.25%；但土壤中作物可直接吸收利用的速效磷浓度一般在5mg/kg～50mg/kg之间，只占总磷的0.5%～2%，不能满足作物的需要。土壤中存在一些可溶磷的细菌，这类细菌可将不溶态的磷素转化为作物可吸收利用的水溶性磷素营养，促进植物生长。已有一些研究者利用溶磷细菌制作微生物肥料施到田间，增加土壤中速效磷浓度，减少磷肥的施用量。但是，由于普通使用的溶磷细菌和油菜之间缺乏特异性，不能在作物根部有效地定居，使用效果波动，无法发挥预期促生增产效应，这种困境限制了溶磷细菌肥料制剂的应用。生态环境中可发生相互作用的生物之间都具备一定的亲和性，这样两者才能够相互识别，进而产生稳定互作的关系。欲有效地利用溶磷细菌，必须要筛选到与油菜具有特异亲和性、可以高效促生的菌株，利用这种亲和性菌株才可以制作油菜专用的溶磷细菌制剂。到目前为止尚没有关于对油菜具有特异亲和性的专用溶磷细菌菌株的研究和应用。
技术实现思路
针对上述存在的问题，本专利技术提供一种油菜专用溶磷细菌及其菌剂。本专利技术的具体技术方案如下：一种油菜专用溶磷细菌的菌株被命名为YP206，所述油菜专用溶磷细菌的分类命名为葡萄牙双头菌（Labrys portucalensis），保藏在中国典型培养物保藏中心，地址：中国.武汉.武汉大学；保藏日期为2016年5月23日，保藏编号为CCTCC M 2016274；将所述油菜专用溶磷细菌在牛肉膏蛋白胨液体培养基中扩大培养得到油菜专用溶磷菌剂；将油菜专用溶磷菌剂用于拌种、或包衣、或浇根、或蘸根以实现有效接种，增加土壤中速效磷浓度。油菜专用溶磷菌剂的具体制备操作步骤如下：将1环葡萄牙双头菌（YP206）斜面菌种接种于40 mL～120 mL牛肉膏蛋白胨液体培养基中，温度25～35℃、转速80 r/min～180 r/min条件下，震荡培养18h～60h，即得到液体培养物；所述液体培养物即为油菜专用溶磷液体菌剂；油菜专用溶磷液体菌剂的施用剂量为1L/亩～3L/亩。在40 mL～120 mL所述液体培养物中加入干燥的泥炭50g～150g混匀，即制得油菜专用溶磷固体菌剂；油菜专用溶磷固体菌剂的施用剂量为1kg/亩～3kg/亩。本专利技术的有益技术效果体现在以下方面：1.本专利技术的油菜专用溶磷细菌可与油菜凝集素发生凝集反应，因此与油菜具有特异亲和性，可在油菜根部长期定居存活，发挥促进油菜生长、提高产量的作用。2.采用本专利技术油菜专用溶磷细菌制备的液体菌剂或固体菌剂具有显著的溶磷效果，利用自身的代谢能力将不溶态的磷素释放出来，大幅度提高菌液中、或土壤中速效性磷的含量，为油菜提供高浓度的速效磷养分。3.采用本专利技术油菜专用溶磷细菌制备的液体菌剂或固体菌剂具有多项优良的生理活性，分泌高浓度的铁载体，促进油菜对铁素营养的吸收；合成适当浓度的植物生长激素IAA，促进植物生长。4. 本专利技术的液体菌剂或固体菌剂的施用剂量低，液体菌剂1L/亩～4L/亩、或固体菌剂1kg/亩～5kg/亩。本专利技术施用方法简单，可采用或拌种、或包衣、或浇根、或蘸根等方法进行接种。与其他使用30kg/亩~50kg/亩的大剂量的生物肥料产品相比较，本专利技术可大幅度降低资源和生产成本，节能环保。综上所述，本专利技术的菌剂对油菜具有专一特异性，可在油菜根部长期存活定殖并发挥生理功能。应用本专利技术的菌剂可促进油菜对磷的吸收，提高油菜的生长量；降低磷肥的使用量，提高土壤速效磷的含量，提高油菜的磷肥利用率。应用本专利技术可以改变现有生物肥料专一性不强、使用效果不明显的弊病，有利生态农业的发展。具体实施方式 实施例 1油菜专用溶磷细菌的筛选和鉴定1. 采集在土壤中正常生长的健康油菜植株的幼根根系4g，将根系置于200 mL无菌生理盐水中，添加100μL吐温80，150 r/min震荡1h，采用10倍稀释法，制成10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-5、10-7梯度悬液，分别取10-4、10-5、10-5、10-7稀释悬液100μL涂布于溶磷细菌培养基平板，30℃培养60h；挑取透明圈较大的菌株，在溶磷细菌培养基平板上划线纯化，获得溶磷细菌菌株31株。2. 制备油菜凝集素，采用油菜凝集素对上述获得的31株溶磷细菌进行亲和性凝集试验，获得具有油菜亲和性的溶磷菌株18株。采用钼蓝比色法测定法比较这些菌株的溶磷活性，发现YP206菌株的溶磷活性最高，达到150 μg/mL以上，该菌株即为油菜专用溶磷细菌。3. 根据通用细菌鉴定方法，测定该菌株的生理生化特征和其16S rDNA序列，将该菌株命名为YP206，分类命名为 葡萄牙双头菌（Labrys portucalensis），2016年5月23日保藏在中国典型培养物保藏中心，地址：中国.武汉.武汉大学； 保藏编号为CCTCC M 2016274。实施例 2油菜专用溶磷细菌葡萄牙双头菌YP206菌株（Labrys portucalensis）溶磷活性的测定。1. 菌液制备制备测定溶磷活性液体培养基，所述的培养基配方：蔗糖10g，NaCl 0.3g，MgSO4·7H2O 0.3g，Ca3(PO4)2 5.0g，MnSO4·4H2O 0.03g，琼脂15~20g，KCl 0.3g，（NH4)2SO4 0.5g FeSO4·7H2O 0.03g，蒸馏水1000mL，pH 7.0~7.5。取溶磷活性培养基90 mL装于250 mL三角瓶中，每瓶接入一环YP206菌株菌苔，对照组不接菌种，每组3个平行；30℃，120 r/min摇床培养45h，获得测定溶磷活性的YP206菌株菌液。2. 活性测定采用钼蓝比色法测定YP206菌株的溶磷活性。取一环YP206菌株斜面接种于溶磷培养基中，28 ℃，160 r/min培养10 d。培养结束后，取10 ml菌液6000r/min离心10min；取1mL离心后的上清液于比色管中，加入蒸馏水至6 ml，再加入2 ml 1 mol/L H2SO4溶液，2 mL钼蓝比色液、混匀，静止反应15 min；以空白培养基取代菌液的反应作为对照，测定在OD660的吸光值；根据标准曲线方程求得菌液中可溶性磷的含量。3. 溶磷活性测定结果在上述条件下，以对照为0基准，测定YP206菌株的溶磷活性为158.07 μg/ml，YP206菌株显著地提高了溶液中速效磷的浓度。实施例 3油菜专用溶磷液体菌剂的制备和应用1. 油菜专用溶磷液本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种油菜专用溶磷细菌，其特征在于：一种油菜专用溶磷细菌的菌株被命名为YP206，所述油菜专用溶磷细菌的分类命名为葡萄牙双头菌（Labrys portucalensis），保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2016年5月23日，保藏编号为CCTCC M 2016274。
【技术特征摘要】
1.一种油菜专用溶磷细菌，其特征在于：一种油菜专用溶磷细菌的菌株被命名为YP206，所述油菜专用溶磷细菌的分类命名为葡萄牙双头菌（Labrys portucalensis），保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2016年5月23日，保藏编号为CCTCC M 2016274。2.由权利要求1所述一种油菜专用溶磷细菌制备的菌剂，其特征在于：将所述油菜专用溶磷细菌在牛肉膏蛋白胨液体培养基中扩大培养得到油菜专用溶磷菌剂；将油菜专用溶磷菌剂用于拌种、或包衣、或浇根、或蘸根以实现有效接种，增加土壤中速效磷浓度。3.制备权利要求2所述的油菜专用溶磷菌剂的方法，其...
【专利技术属性】
技术研发人员：周可金，白莉敏，唐欣昀，朱英华，朱宗河，曹媛媛，孙乐妮，陈晓琳，邓瑞宁，
申请(专利权)人：安徽农业大学，
类型：发明
国别省市：安徽;34
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