一种超高效液相色谱法测定藿香正气滴丸中7种成分含量的方法技术

本发明专利技术涉及一种超高效液相色谱法测定藿香正气滴丸中7种成分含量的方法。本方法可在20min内完成一次色谱分析，被测定的7种成分色谱峰均有良好的分离度，方法精密度、重复性的RSD均小于2.0％；在室温条件下24h内稳定；各成分均有较宽的线性范围和良好的线性关系(r≥0.9995)；平均加样回收率97.5-101.4％，RSD均小于2.0％。本发明专利技术的方法操作简便，测定结果准确可靠，可用于藿香正气滴丸的质量控制。

【技术实现步骤摘要】

：本专利技术涉及一种药物成分的检测方法，特别涉及一种超高效液相色谱法测定藿香正气滴丸中7种成分含量的方法，所述方法包括制备藿香正气滴丸供试品溶液，将其注入超高效液相色谱仪，采用梯度洗脱，得到橙皮苷、甘草酸、欧前胡素、和厚朴酚、异欧前胡素、厚朴酚和苍术素7个种成分的含量。
技术介绍
藿香正气滴丸是天津天士力制药股份有限公司生产的独家品种，该制剂包括广藿香油、苍术、陈皮、厚朴等10味药材组成的复方制剂，具有解表化湿，理气和中的功效，用于头痛昏重、脘腹胀痛、呕吐泄泻、胃肠型感冒等。作为天士力研发的现代中药代表剂型，具有药物稳定性高、不易水解氧化、起效快、无异味、口感好、携带方便等特性。现有藿香正气滴丸的质量标准是采用高效液相色谱法同时测定橙皮苷、厚朴酚及和厚朴酚，作为检测和控制陈皮及厚朴的含量指标，现已申请专利(专利申请号为CN201110269071.8)。为了能够更加严格的控制该制剂的质量并且提高质量检测标准，本专利技术应用超高效液相色谱法(UPLC)同时测定藿香正气滴丸中橙皮苷、甘草酸、欧前胡素、和厚朴酚、异欧前胡素、厚朴酚和苍术素7种成分含量。本方法可在20min内完成一次色谱分析，被测定的7种成分色谱峰均有良好的分离度，方法精密度、重复性的RSD均小于2.0％；在室温条件下24h内稳定；各成分均有较宽的线性范围和良好的线性关系(r≥0.9995)；平均加样回收率97.5-101.4％，RSD均小于2.0％。本专利技术的方法操作简便，测定结果准确可靠，可用于藿香正气滴丸的质量控制。
技术实现思路
本专利技术涉及一种超高效液相色谱法测定藿香正气滴丸中7种成分含量的方法，该方法包括以下步骤：步骤1：供试品溶液的制备：将藿香正气滴丸溶解于甲醇，过滤，得到滤液步骤2：用超高效液相色谱仪测定供试品溶液：将供试品溶液注入超高效液相色谱仪，得到色谱图；步骤3：根据色谱图计算供试品溶液中7种成分的含量：以外标法计算供试品溶液中7种成分的含量，其中所述的7种成分为橙皮苷、甘草酸、欧前胡素、和厚朴酚、异欧前胡素、厚朴酚、苍术素。所述超高效液相色谱仪，色谱条件如下：色谱柱：C18色谱柱(100mm×2.1mm，1.7μm)；流动相为乙腈-0.1-0.3％甲酸水溶液，流动相优选乙腈-0.2％甲酸水溶液梯度洗脱程序如表1所示；表1梯度洗脱程序时间(min)乙腈(％)0-610-356-935-509-1450-6014-1660-7516-187518-1975-1019-2010流速为0.2～0.6mL/min，优选为0.4mL/min；紫外检测波长：甘草酸、欧前胡素、异欧前胡素为250nm；橙皮苷为284nm；厚朴酚、厚朴酚为290nm；苍术素为336nm；；优选双通道紫外检测器，通道A：甘草酸、欧前胡素、异欧前胡素为250nm；通道B：0-10min，橙皮苷为284nm；10.01-15min，和厚朴酚、厚朴酚为290nm；15.01-20min，苍术素为336nm；柱温：25℃～35℃，优选为30℃；进样量：1μL～10μL，优选为2μL。其中，步骤1：供试品溶液的制备；方法如下：取0.5-1.5g藿香正气滴丸，精密称定，精密加入甲醇10-30mL，称定重量，超声处理15-25min，放至室温后，用甲醇补足减失的重量，用0.2-0.3μm微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。优选的，步骤1：供试品溶液的制备；方法如下：取约1.0g藿香正气滴丸，精密称定，精密加入甲醇20mL，称定重量，超声(500W，40kHz)处理20min，放至室温后，用甲醇补足减失的重量，用0.22μm微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。其中，步骤3、计算供试品溶液中橙皮苷、甘草酸、欧前胡素、和厚朴酚、异欧前胡素、厚朴酚、苍术素的含量，使用事先制备的标准对照图谱；所述标准对照图谱的制备，方法如下：分别精密称取橙皮苷、甘草酸、欧前胡素、和厚朴酚、异欧前胡素、厚朴酚、苍术素对照品适量，加甲醇溶解并定容，制得质量浓度分别为橙皮苷0.6000mg/mL、甘草酸0.2024mg/mL、欧前胡素0.0806mg/mL、和厚朴酚0.4032mg/mL、异欧前胡素0.0230mg/mL、厚朴酚0.3016mg/mL、苍术素0.0416mg/mL的混合对照品储备液。精密量取混合对照品储备液1.00mL，置10mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得混合对照品溶液。将混合对照品溶液注入超高效液相色谱仪，得到色谱图；即为标准对照图谱。本专利技术的核心在于色谱条件的选择，如何解决同时测定7种有效成分的含量的色谱条件，是一大挑战，本专利技术为此进行了大量的筛选工作，最终得到本专利技术的色谱条件。另外，本专利技术对供试品溶液的配制也进行了筛选，结果适用性极好。本专利技术所选用的仪器与材料如下：ACCURICYUPLCHCLASS系统(包括二元超高压溶剂系统、自动进样恒温样本管理器、TUV检测器、Empower2色谱工作站，美国waters公司)；MettlerToledoXS105分析天平(瑞士MettlerToledo公司)；KQ-500DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；MilliporeSimplicity超纯水系统。对照品橙皮苷(批号:110721-201115)、欧前胡素(批号:110826-201214)、和厚朴酚(批号:110730-201313)、异欧前胡素(批号:110827-201109)、厚朴酚(批号:110729-200412.)、苍术素(批号:11924-201303)均购于中国食品药品检定研究院，供含量测定用，甘草酸(批号：17239-64，纯度98.0％)购于NACALAITESOUE，INC。甲醇(色谱纯，美国Merck公司)，乙腈(色谱纯，美国Merck公司)，甲酸(色谱纯，瑞士Fluke公司)，冰乙酸(色谱纯，天津康科德有限公司)，磷酸(色谱纯，天津市光复精细化工研究所)。藿香正气滴丸(天津天士力制药股份有限公司生产11批，批号分别为2014C08、131128、131201、131202、131203、131204、131205、131206、131207、131208、131209)；藿香正气滴丸为市售或应用申请号为CN03145667.7中的方法制备所得。本专利技术优选的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种超高效液相色谱法测定藿香正气滴丸中7种成分含量的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：步骤1：供试品溶液的制备：将藿香正气滴丸溶解于甲醇，过滤，得到滤液；步骤2：用超高效液相色谱仪测定供试品溶液：将供试品溶液注入超高效液相色谱仪，得到色谱图；步骤3：根据色谱图计算供试品溶液中7种成分的含量：以外标法计算供试品溶液中7种成分的含量，其中所述的7种成分为橙皮苷、甘草酸、欧前胡素、和厚朴酚、异欧前胡素、厚朴酚、苍术素。

【技术特征摘要】
1.一种超高效液相色谱法测定藿香正气滴丸中7种成分含量的方法，其特
征在于，所述方法包括以下步骤：
步骤1：供试品溶液的制备：将藿香正气滴丸溶解于甲醇，过滤，得到滤液；
步骤2：用超高效液相色谱仪测定供试品溶液：将供试品溶液注入超高效液
相色谱仪，得到色谱图；
步骤3：根据色谱图计算供试品溶液中7种成分的含量：以外标法计算供试
品溶液中7种成分的含量，其中所述的7种成分为橙皮苷、甘草酸、欧前胡素、
和厚朴酚、异欧前胡素、厚朴酚、苍术素。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2超高效液相色谱
仪的色谱条件如下：
色谱柱：C18色谱柱；
流动相为乙腈-0.1-0.3％甲酸水溶液；
梯度洗脱程序
流速为0.2～0.6mL/min；
紫外检测器设定波长：甘草酸、欧前胡素、异欧前胡素为250nm；橙皮苷为
284nm；和厚朴酚、厚朴酚为290nm；苍术素为336nm；
柱温：25℃～35℃；
进样量：1μL～10μL。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述检测器为双通道紫外检
测器，通道A：甘草酸、欧前胡素、异欧前胡素为250nm；通道B：0-10min，

\t橙皮苷为284nm；10.01-15min，和厚朴酚、厚朴酚为290nm；15.01-20min，苍
术素为336nm。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述超高效液相色谱仪的色
谱条件如下：
流动相为乙腈-0.2％甲酸水溶液；
流速为0.4mL/min；
柱温：30℃；
进样量：2μL。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，其中，步骤1：供试品溶液
的制备；方法如下：取0.5-1.5g藿香正气滴丸，精密称定，精密加入甲醇10-30mL，
称定重量，超声处理15-25min，放至室温后，用甲醇补足减失的重量，用0.2-0.3μm
微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，其中步骤1：供试品溶液的
制备方法如下：取约1.0g藿香正气滴丸，精密称定，精密加入甲醇20mL，称
定重量，500W，40kHz超声处理2...

【专利技术属性】
技术研发人员：佟玲，李云飞，李东翔，孟文婷，张永志，
申请(专利权)人：天士力制药集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：天津;12