一种岩黄连的离体保存方法技术

本发明专利技术公开了一种岩黄连的离体保存方法，包括岩黄连的组培两步成苗，再利用组培两步成苗得到的具有4~6片叶的试管苗，接种到保存培养基进行离体保存，本发明专利技术保存培养基为1/2MS+PPP3331.0mg/l +AC0.3%+蔗糖4.5%+琼脂0.4%。培养基的pH值为5.8，温度为21±1°C，光照强度1400~1600lx，光照时间为8~10小时/天。利用本发明专利技术的方法可在短期内提供大量岩黄连的优质种苗，同时减少了配制培养基和转瓶的步骤，节约了大量人力物力，因此简单易行、生产成本降低，并且，有效解决了岩黄连种质资源保存及规模化育苗问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物组织培养
，具体地，涉及岩黄连的离体保存方法。
技术介绍
岩黄连(CorydalissaxicolaBunting)是罂粟科植物，为多年生草本植物，分布于我国广西、广东、福建、湖南等省。全草入药，是著名的壮瑶药品种，全草含脱氢卡维丁(岩黄连碱)等活性成分；具有显著的抗菌、消炎、镇痛和强安定作用，并观察到有抑制肿瘤细胞作用；主治疮疖肿毒、肝炎、肝硬化、肝癌等症岩黄连植物分布局限于石灰岩山区，属石山特有种。由于生境条件恶劣，其自然繁殖率很低，加上其种子细小，繁殖比较困难，种群发展障碍，资源蕴藏量十分有限。近年来人们大量采挖和收购，导致了野生资源的供不应求，野生岩黄连资源濒临枯竭，同时在引种栽培时较难成活，给种质保存与利用带来较大的困难。随着大量采挖和收购导致野生资源濒临枯竭，市场供不应求，人工栽培种植成本高且不成规模，开展节约型组织培养工厂化生产是形势所需。采用生物技术组织培养技术，可以有效快速地提高岩黄连种苗的繁殖速度和质量，实现岩黄连优质种苗的工厂化育苗，以满足<本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种岩黄连的离体保存方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）不定芽诱导培养：取岩黄连茎尖作为外植体，在75%乙醇中浸泡30~45s，无菌水冲洗2~3次，投入添加2滴吐温的0.1%升汞4min，再用无菌水冲洗2~3次，再次投入添加2滴吐温的0.1%升汞4min，最后用无菌水冲洗2~3次后剪切为0.5~1.0cm长接种在诱导培养基上，培养10~14天，茎尖分化形成嫩黄绿色丛生芽；（2）丛生芽壮苗生根培养：经25~35天，丛生芽长至2~3cm，转入壮苗生根培养基培养1个月后，长成具根和4~6片叶的试管苗；（3）试管苗离体保存：将由丛生芽分化产生的具有4~6片叶的试管苗，接种到保存培养基进行离体保存。

【技术特征摘要】
1.一种岩黄连的离体保存方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）不定芽诱导培养：取岩黄连茎尖作为外植体，在75%乙醇中浸泡30~45s，无菌水冲洗
2~3次，投入添加2滴吐温的0.1%升汞4min，再用无菌水冲洗2~3次，再次投入添加2滴吐温的
0.1%升汞4min，最后用无菌水冲洗2~3次后剪切为0.5~1.0cm长接种在诱导培养基上，培养
10~14天，茎尖分化形成嫩黄绿色丛生芽；
（2）丛生芽壮苗生根培养：经25~35天，丛生芽长至2~3cm，转入壮苗生根培养基培养1个
月后，长成具根和4~6片叶的试管苗；
（3）试管苗离体保存：将由丛生芽分化产生的具有4~6片叶的试管苗，接种到保存培养
基进行离体保存。
2.如权利要求1所述的岩黄连的离体保存方法，其特征在于，步骤（1）中所述的诱导培
养基为：MS+6-BA1.5mg/l+NAA0.5mg/l+KT0.4...

【专利技术属性】
技术研发人员：张占江，李翠，郭晓云，赵以民，李林轩，缪剑华，韦莹，韦坤华，
申请(专利权)人：广西壮族自治区药用植物园，
类型：发明
国别省市：广西;45