【技术实现步骤摘要】
本专利技术设及基因工程领域，具体而言，设及一种抗草甘麟EPSPS基因的筛选方法及 其应用。
技术介绍
民oundup"是目前世界上使用的最为广泛的除草剂之一，至今已使用了近四十 年，草甘麟是其主要的活性成分。草甘麟是憐酸締醇式丙酬酸(PEP)的类似物，与PEP竞争5- 締醇丙酬莽草酸-3-憐酸合成酶化PSPS)的活性位点，进而抑制EPSPS的活性。EPSPS在莽草 酸途径（shikimate pathway)中催化阳P和莽草酸-3-憐酸醋合成EPSP，草甘麟最终导致莽 草酸代谢途径的合成受阻，使其不能持续合成芳香族胺基酸如色氨酸、苯丙氨酸和酪氨酸 等，让许多二次代谢物，诸如木质素、叶黄素类、生物碱等，因缺少芳香族胺基酸而无法合 成，进而影响植物正常生长，终致死亡。 廉价、高效、低残留使草甘麟得W广泛应用，但是草甘麟没有选择性，它在杀死杂 草的同时对农作物也具有同样的毒害作用。因此若想要在农作物种植时选择性的杀死杂 草，则需要使农作物获得抗草甘麟的能力。 使农植物获得抗草甘麟能力有Ξ种主要途径:EPSPS过量表达、引进草甘麟降解酶 或者引进对草甘麟有抗...
【技术保护点】
一种抗草甘膦EPSPS基因的筛选方法，其特征在于，包括如下步骤：1)、将含有草甘膦抗性微生物的多种微生物在含有草甘膦的抗性的筛选培养基中进行筛选培养，得到抗性菌种，并对其纯化培养获得单克隆；2)、以所述单克隆的基因组为模板扩增该单克隆的EPSPS基因的开放阅读框序列，将扩增产物连入质粒中并于细菌中进行原核表达，得到重组菌株；3)、对重组菌株的草甘膦抗性进行验证，获得抗草甘膦EPSPS基因。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：邓龙群，王博雅，陈容，胥南飞，
申请(专利权)人：四川天豫兴禾生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51
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