【技术实现步骤摘要】
一种通过绒毛白蜡体胚诱导获得再生植株的方法
本专利技术属于白蜡属组织培养繁育
,特别涉及一种通过绒毛白蜡体胚诱导获得再生植株的方法。
技术介绍
绒毛白蜡(FraxinusvelutinaTorr.)为木犀科(oleaceae)白蜡属(Fraxinus)落叶乔木,根系发达,耐盐碱,抗逆性强,适应范围广,是开发利用盐碱地的先锋树种。全世界已有白蜡属植物70余种,我国30余种,全国各省各地区均有栽植。近年来,国内有关绒毛白蜡的繁殖主要以播种育苗为主,播种育苗培育出的苗木长势不好、参差不齐、且随着育苗繁殖代数的增加,产生了变异,白蜡良种潜力尚未能得到充分利用,使得白蜡优良种质的供应无法满足市场的需求。对于大多数植物来说,体细胞胚诱导是组织培养方法中最好的无性繁育技术(Merkleetal.,2005;Ohetal.,2010;胡峰等,2014),具有高度的遗传稳定性,能保持无性系母本的优良性状,有利于白蜡优良无性系苗木的大规模化生产(Arnoldetal.,2002),也可用于人工种子生产,在种质资源繁殖方面应用前景广泛。因此,通过体细胞胚诱导途径建立绒毛白蜡组织培 ...
【技术保护点】
一种通过绒毛白蜡体胚诱导获得再生植株的方法,步骤是:(1)选取颗粒饱满的种子剥除外种皮后置于三角瓶中,流水冲洗2–3小时,用75%乙醇浸泡1分钟,再用0.1%的升汞消毒8–10分钟,无菌水冲洗4–5次后,将消毒后的种子在超净工作台上接种到MS种子萌发培养基上,萌发2–6天;(2)取萌发的胚根为外植体,接种在体细胞胚诱导培养基上,暗培养后,获得胚性愈伤组织;(3)将暗培养后的胚性愈伤组织转移到体胚萌发培养基上,进行光照培养,诱导出体胚苗;(4)将体胚苗转移到试管苗复壮培养基,光照培养10–14天后,转入生根培养基继续光照培养;(5)将步骤(4)获得的生根植株炼苗,移栽;其特征 ...
【技术特征摘要】
1.一种通过绒毛白蜡体胚诱导获得再生植株的方法,步骤是:(1)选取颗粒饱满的种子剥除外种皮后置于三角瓶中,流水冲洗2–3小时,用75%乙醇浸泡1分钟,再用0.1%的升汞消毒8–10分钟,无菌水冲洗4–5次后,将消毒后的种子在超净工作台上接种到MS种子萌发培养基上,萌发2–6天;(2)取萌发的胚根为外植体,接种在体细胞胚诱导培养基上,暗培养后,获得胚性愈伤组织;其中:所述暗培养是指在培养瓶上覆盖黑布,于昼温度25±2℃,夜温度18±2℃条件下,培养18–22天;(3)将暗培养后的胚性愈伤组织转移到体胚萌发培养基上,进行光照培养,诱导出体胚苗;(4)将体胚苗转移到试管苗复壮培养基,光照培养10–14天后,转入生根培养基继续光照培养;(5)将步骤(4)获得的生根植株炼苗,移栽;上述种子萌发、体胚诱导培养、体胚萌发培养、试管苗复壮、生根培养各阶段光照培养的条件为:14小时光照/10小时黑暗,光密度为100–120μmol·m-2·s-1;其特征在于:步骤(2)中所述的体细胞胚诱导培养基配方为:MS盐分+B5有机+1.8–2.2mg·L–16-苄基腺嘌呤(BA)+0.08–0.12mg·L–1萘乙酸(NAA)+30g·L–1葡萄糖+5.0g·L–1琼脂,pH值5.2–5.4;步骤(3)中所述的体胚萌发培养基为MS盐分+B5有机+30g·L–1葡萄糖+5.0g·L–1琼脂,pH值5.7–5.9;其中,上述MS盐分+B5有机的组分为:KNO31900mg·L-1,NH4NO31650m...
【专利技术属性】
技术研发人员:燕丽萍,刘翠兰,吴德军,李丽,王开芳,藏真荣,
申请(专利权)人:山东省林业科学研究院,
类型:发明
国别省市:山东;37
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