一种竹叶兰组培快繁的方法，其特征在于：步骤1外植体材料选择与消毒：选取高位芽为外植体，消毒备用；步骤2不定芽的诱导培养：高位芽顶部切除，接种到不定芽诱导培养基上，诱导出不定芽；步骤3丛生芽的增殖培养：将不定芽接种到丛生芽诱导培养基上，获得丛生芽；再将丛生芽接种到增殖培养基上，获得丛生芽团块；步骤4壮苗和生根培养：将步骤3获得的丛生芽大团块分切成小团块，再与步骤3获得的丛生芽小团块接种到壮苗和生根培养基上，丛生芽小团块生长粗壮并长出新根。步骤5炼苗与驯化移栽：当苗长至株高4-8厘米，根1-3条时，进行炼苗培养，然后取出，浸泡在甲基托布津药液中，最后用苔藓移栽；降低了竹叶兰继代增殖培养中发生变异的几率。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术设及植物组织培养
，特别是。
技术介绍
竹叶兰（Alumina graminifolia化。虹）系兰科竹叶兰属多年生草本植物，主要分 布于东南亚地区，在我国产于福建、江西、浙江、广东、海南、广西、四川、贵州、湖南、云南等 地。其花朵美丽清雅，有淡香味，花期长，观赏价值高，可盆栽，也可用于庭院绿化。竹叶兰还 具有很高的药用价值，全草入药.具有调补气血、清热解毒、桂风湿、消炎、利尿之功效。可 用于治疗风湿性腰腿痛、胃痛、尿路感染、毒蛇咬伤、食物中毒等。因此，充分开发和利用竹 叶兰的观赏和药用价值具有广阔的市场前景。 竹叶兰种子发育不全，无胚乳，直播不萌发，在野外需与共生菌共生才能萌发且发 芽率极低。因此，传统的竹叶兰人工繁殖手段只能采取分株繁殖、杆插繁殖和高位芽繁殖。 其中，高位芽繁殖可采用W下两种方法：;D待开花结实的茎枝或受损的老枝上长出高位芽 长至10厘米左右时，将其摘下并插入育苗基质的苗床中，待根长出后便可移栽；也可让 高位芽与母株一起生长，待长出气生根后再摘下移栽。传统的人工繁殖方法一年繁殖1-2 次且需要大量栽培2-3年的母株，故其繁殖成本高，效率低，无法满足生产需要。当前，已有 利用植物组织培养技术繁育竹叶兰种苗的报道。陈之林等（2006年)利用竹叶兰种子进行离 体培养，成功获得竹叶兰原球茎和试管苗。张文珠等（2011年)W竹叶兰种子为外植体进行 无菌播种，也成功诱导出原球茎并获得再生植株，建立了 W种子为外植体的组培快繁体系。 但是，种子无菌播种获得的试管苗是实生苗，其性状易发生分离，不能获得遗传物质一致的 种苗。且W原球茎发生方式组培快繁种苗，经过脱分化和再分化过程，种苗易发生遗传变 异，通常变异率为8%左右。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对W上现有技术的不足，提供一种利用竹叶兰高位芽作为外植 体，采用丛生芽发生方式进行。 本专利技术的技术方案是：其特征在于： 步骤1外植体材料选择与表面消毒： W高位芽距离栽培基质上表面10厘米W上且长度3-5厘米饱满的高位芽为选取材料， 切下高位芽作为外植体，先在自来水下冲洗干净，之后在无菌条件下，用70-75%酒精消毒 30-60秒，无菌水冲洗一次，再用0. 1%升隶消毒8-12分钟，最后无菌水冲洗3-5次，无菌滤 纸吸干备用； 步骤2不定芽的诱导培养： 在无菌条件下，先将消毒好的高位芽顶部1-3厘米部位切除，再把剩下部分按照基部 朝下方式接种到含植物生长调节剂6-BA2. 0-3. Omg/L +NAAO. 1 mg/L组合或TDZO. 2-0. 3mg/ L +NAAO. I mg/L组合的MS不定芽诱导培养基上，在培养室内光照培养，保持光照强度 1500-2000LX，光照时间每天12小时，溫度24-26°C，45-60天后，切除顶部的高位芽基部诱 导出不定芽； 步骤3丛生芽的增殖培养： 在无菌条件下，将步骤2获得的产物接种到含植物生长调节剂6-BA2. 0 mg/L +NAAO. 1 mg/L组合或TDZO. 2mg/L +NAAO. 1 mg/L组合的MS丛生芽诱导培养基上，在培养室内光照培 养，保持光照强度2000-2500LX,光照时间每天12小时，溫度24-26°C，45-50天后，获得 丛生芽；再将上述丛生芽接种到含植物生长调节剂6-BA0. 5-1. 0 mg/L +NAAO. 1 mg/L组合 或TDZ0.0 5-0.1 mg/L+NAAO. 1 mg/L组合的MS丛生芽增殖培养基上，在培养室内光照培养， 保持光照强度2000-2500LX,光照时间每天12小时，溫度24-26°C，45-50天后，获得大量 的丛生芽团块. 步骤4壮苗和生根培养： 在无菌条件下，先将步骤3获得的苗4株W上的丛生芽大团块分切成苗2-4株的丛生 芽小团块，再与步骤3直接获得的苗2-4株的丛生芽小团块一起接种到含IBAO. 5mg/L或 NAAO. Img/L的MS+香蕉泥50g/L+活性碳1. Og/L壮苗和生根培养基上，在培养室内光照培 养，保持光照强度2000-2500LX,光照时间每天16小时，溫度24-26°C，45-60天后，苗 2-4株的丛生芽小团块生长粗壮并长出新根； 步骤5组培苗的炼苗与驯化移栽： 当步骤4获得的苗2-4株的丛生芽小团块中苗长至株高4-8厘米，根1-3条时即可移 入炼苗室进行7-14天炼苗培养，W提高其环境适应能力。炼苗结束后，先从培养瓶中取出 上述丛生芽团块，洗净根部培养基，再浸泡在稀释800倍的甲基托布津药液中15-20分钟， 最后用苔薛基质进行移栽。[000引本专利技术优点在于： 由于本专利采用高位芽作为外植体，能够确保外植体材料遗传物质均一性，从而保证 了竹叶兰组培快繁种苗的遗传稳定性。且高位芽再生能力强，受栽培基质中微生物影响小， 表面消毒效果好，容易建立无菌系；由于本专利采用丛生芽发生方式组培快繁竹叶兰种苗， 不经过脱分化和再分化过程，从而降低了竹叶兰继代增殖培养中发生变异的几率。 本专利技术通过W高位芽为外植体、采用丛生芽发生方式、缩短诱导时间、简化培养过 程等技术措施，可降低组培苗变异率，节约组培苗生产成本，提高生产效率和利润，因此本 专利技术的竹叶兰组培快繁的方法繁殖速度快，种苗变异率低，生产成本低。【具体实施方式】 [000引实施例一： 本专利技术竹叶兰组培快繁的方法包括W下步骤： 步骤1外植体材料选择与表面消毒： W高位芽距离栽培基质上表面10厘米W上且长度3-5厘米饱满的高位芽为选取材料， 切下高位芽作为外植体，先在自来水下冲洗干净，之后在无菌条件下，用70-75%酒精消毒 30-60秒，无菌水冲洗一次，再用0. 1%升隶消毒8-12分钟，最后无菌水冲洗3-5次，无菌滤 纸吸干备用。 步骤2不定芽的诱导培养： 在无菌条件下，先将消毒好的高位芽顶部1-3厘米部位切除，再把剩下部分按照基部 朝下方式接种到含植物生长调节剂6-BA3.0 mg/L +NAAO. 1 mg/L组合的MS培养基上，在培 养室内光照培养，保持光照强度1500-2000L)(，光照时间每天12小时，溫度24-26°C，45-60 天后，切除顶部的高位芽基部可诱导出不定芽。 步骤3丛生芽的增殖培养： 在无菌条件下，将步骤2获得的产物接种到含植物生长调节剂6-BA2. 0 mg/L +NAAO. 1 mg/L组合的MS培养基上，在培养室内光照培养，保持光照强度2000-2500LX,光照时间每 天12小时，溫度24-26°C，45-50天后，获得丛生芽；再将上述丛生芽接种到到含植物生长 调节剂6-BA1.0 mg/L +NAAO. 1 mg/L组合的MS培养基上，在培养室内光照培养，保持光照 强度2000-2500LX,光照时间每天12小时，溫度24-26°C，45-50天后，平均增殖系数可达 3. 2左右。 步骤4壮苗和生根培养： 在无菌条件下，先将步骤3获得的苗4株W上的丛生芽大团块分切成苗2-4株的丛生 芽小团块，再与步骤3直接获得的苗2-4株的丛生芽小团块一起接种到含IBAO. 5mg/L或 NAAO. Img/L的MS+香蕉泥50g/L+活性碳1. Og/L培养基上，在培养室内光照培养，保持光 照本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种竹叶兰组培快繁的方法，其特征在于：其特征在于：步骤1外植体材料选择与表面消毒：以高位芽距离栽培基质上表面10厘米以上且长度3‑5厘米饱满的高位芽为选取材料，切下高位芽作为外植体，先在自来水下冲洗干净，之后在无菌条件下，用70‑75%酒精消毒30‑60秒，无菌水冲洗一次，再用0.1%升汞消毒8‑12分钟，最后无菌水冲洗3‑5次，无菌滤纸吸干备用；步骤2不定芽的诱导培养：在无菌条件下，先将消毒好的高位芽顶部1‑3厘米部位切除，再把剩下部分按照基部朝下方式接种到含植物生长调节剂6‑BA2.0‑ 3.0mg/L +NAA0.1 mg/L组合或TDZ0.2‑0.3mg/L +NAA0.1 mg/L组合的MS不定芽诱导培养基上，在培养室内光照培养,保持光照强度1500‑2000LX,光照时间每天12小时，温度24‑26℃,45‑60天后，切除顶部的高位芽基部诱导出不定芽；步骤3丛生芽的增殖培养：在无菌条件下，将步骤2获得的产物接种到含植物生长调节剂6‑BA2.0 mg/L +NAA0.1 mg/L组合或TDZ0.2mg/L +NAA0.1 mg/L组合的MS丛生芽诱导培养基上，在培养室内光照培养,保持光照强度2000‑2500LX, 光照时间每天12小时,温度24‑26℃,45‑50天后，获得丛生芽；再将上述丛生芽接种到到含植物生长调节剂6‑BA0.5‑1.0 mg/L +NAA0.1 mg/L组合或TDZ0.05‑0.1mg/L+NAA0.1 mg/L组合的MS丛生芽增殖培养基上，在培养室内光照培养,保持光照强度2000‑2500LX, 光照时间每天12小时,温度24‑26℃,45‑50天后，获得大量的丛生芽团块；步骤4壮苗和生根培养：在无菌条件下，先将步骤3获得的苗4株以上的丛生芽大团块分切成苗2‑4株的丛生芽小团块，再与步骤3直接获得的苗2‑4株的丛生芽小团块一起接种到含IBA0.5mg/L或NAA0.1mg/L的MS+香蕉泥50g/L+活性碳1.0g/L壮苗和生根培养基上，在培养室内光照培养,保持光照强度2000‑2500LX, 光照时间每天16小时,温度24‑26℃,45‑60天后，苗2‑4株的丛生芽小团块生长粗壮并长出新根；步骤5组培苗的炼苗与驯化移栽：当步骤4获得的苗2‑4株的丛生芽小团块中苗长至株高4‑8厘米，根1‑3条时即可移入炼苗室进行7‑14天炼苗培养，以提高其环境适应能力。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：周辉明，林辉锋，尚伟，陈昌铭，江秋萍，邓才生，林发壮，叶榕妹，王雪凤，夏朝水，魏柳萍，梁泉生，姚凤琴，
申请(专利权)人：三明市农业科学研究院，
类型：发明
国别省市：福建;35
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