用于清除人体有害活性氧的化合组合物、制备方法及其应用技术

本发明专利技术公开一种用于清除人体有害活性氧的化合组合物、制备方法及其应用，该化合组合物由7-羟基香豆素和白藜芦醇按照物质的量的比2～3:1混合组成。该化合组合物的制备方法包括步骤：配制具有抗氧化功能的包含有酚羟基官能团的化合物，将化合物溶解于细胞培养基中得到化合物培养基；从化合物培养基中筛选得到用于清除超氧自由基O2-的7-羟基香豆素；从化合物培养基中筛选得到用于清除过氧化氢H2O2的白藜芦醇；将筛选出来的7-羟基香豆素和白藜芦醇按照物质的量的比2～3:1混合成化合组合物。本发明专利技术所述化合组合物应用于抗氧化功能饮料、抗衰老护肤品或化妆品中，实现人体超氧自由基O2-和过氧化氢H2O2的双清除，从而彻底清除人体有害活性氧物质。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生命健康医学领域，尤其涉及一种用于清除人体有害活性氧的化合组合物、制备方法及其应用。
技术介绍
活性氧(ROS)包括超氧自由基O2-和过氧化氢H2O2的化合物，是生物在线粒体中进行有氧呼吸时产生的一种副产物，其在细胞中的积累会形成氧化胁迫，这将对脂质、蛋白质和核酸等造成损伤，从而毒害细胞，这种长期累积的氧化胁迫是衰老和许多代谢疾病的主要成因。人体内超氧自由基O2-活性很强，过氧化氢H2O2在人体中存在时间较长，两种物质无论哪一种存在，都对人体有很大毒害作用。然而，目前抗氧化的药物，例如添加超氧化物歧化酶(SOD)或SOD激活剂的化妆品，只能清除活性氧ROS中的超氧自由基O2-或过氧化氢H2O2之一种，而无法实现有害物质的彻底清除。由于超氧化物歧化酶SOD是一种蛋白质，无法透过细胞膜，对细胞的保护作用几乎可以忽略。况且SOD会将超氧化物转变为H2O2，其在皮肤表面的存留，对皮肤有一定的伤害。因此有必要提出一种化合组合物，能够清除人体活性氧中的超氧自由基O2-和过氧化氢H2O2。
技术实现思路
本专利技术的主要目的在于提供一种用于清除人体有害活性氧的化合组合物、制备方法及其应用，旨在解决目前抗氧化的药物不能实现人体活性氧中超氧自由基O2-和过氧化氢H2O2的双清除，而无法彻底清除人体有害活性氧物质的问题。为实现上述目的，本专利技术提供了一种用于清除人体有害活性氧的化合组合物，该化合组合物包括用于清除超氧自由基O2-的7-羟基香豆素和用于清除过氧化氢H2O2的白藜芦醇混合组成，其中，所述7-羟基香豆素和白藜芦醇按照物质的量的比2～3:1混合。为实现上述目的，本专利技术还提供了一种用于清除人体有害活性氧的化合组合物的制备方法，该化合组合物的制备方法包括步骤：配制具有抗氧化功能的包含有酚羟基官能团的化合物，将所述化合物溶解于细胞培养基中得到化合物培养基；从化合物培养基中筛选得到用于清除超氧自由基O2-的7-羟基香豆素；从化合物培养基中筛选得到用于清除过氧化氢H2O2的白藜芦醇；将筛选出来的7-羟基香豆素和白藜芦醇按照预定物质的量的比2～3:1混合成化合组合物。优选的，所述从化合物培养基中筛选得到用于清除超氧自由基O2-的7-羟基香豆素的步骤包括：将Hacat人正常皮肤细胞株接种于48孔的细胞板中培养16小时；在细胞培养板的每个孔中添加相同体积的化合物培养基并于二氧化碳培养箱中培养一段预定时间，将细胞培养板中的细胞经过胰酶消化，并通过离心处理得到Hacat人正常皮肤细胞；基于超氧化物特异性指示剂WST-1的显色反应利用分光光度计测定经过所述化合物培养基处理的Hacat人正常皮肤细胞中超氧自由基O2-的浓度；从所述化合物培养基中筛选出所述分光光度计测定的颜色变化明显程度最强的7-羟基香豆素。优选的，所述从化合物培养基中筛选得到用于清除过氧化氢H2O2的白藜芦醇的步骤包括：将Hacat人正常皮肤细胞株接种于48孔的细胞板中培养16小时；在细胞培养板的每个孔中添加相同体积的化合物培养基并于二氧化碳培养箱中培养一段预定时间，将细胞培养板中的细胞经过胰酶消化，并通过离心处理得到Hacat人正常皮肤细胞；基于过氧化氢特异指示剂PF1的荧光强度变化利用荧光仪测定经过所述化合物培养基处理的Hacat人正常皮肤细胞中过氧化氢H2O2的浓度；从所述化合物培养基中筛选出所述荧光仪测定的荧光变化明显程度最强的白藜芦醇。优选的，所述Hacat人正常皮肤细胞株经过磷酸缓冲液PBS清洗。优选的，所述从化合物培养基中筛选得到用于清除超氧自由基O2-的7-羟基香豆素的步骤包括：将人皮肤成纤维细胞株HSF接种于48孔的细胞板中培养16小时；在细胞培养板的每个孔中添加相同体积的化合物培养基并于二氧化碳培养箱中培养一段预定时间，将细胞培养板中的细胞经过胰酶消化，并通过离心处理得到人皮肤成纤维细胞；基于超氧化物特异性指示剂WST-1的显色反应利用分光光度计测定经过所述化合物培养基处理的人皮肤成纤维细胞中超氧自由基O2-的浓度；从所述化合物培养基中筛选出所述分光光度计测定的颜色变化明显程度最强的7-羟基香豆素。优选的，所述从化合物培养基中筛选得到用于清除过氧化氢H2O2的白藜芦醇的步骤包括：将人皮肤成纤维细胞株HSF接种于48孔的细胞板中培养16小时；在细胞培养板的每个孔中添加相同体积的化合物培养基并于二氧化碳培养箱中培养一段预定时间，将细胞培养板中的细胞经过胰酶消化，并通过离心处理得到人皮肤成纤维细胞；基于过氧化氢特异指示剂PF1的荧光强度变化利用荧光仪测定经过所述化合物培养基处理的人皮肤成纤维细胞中过氧化氢H2O2的浓度；从所述化合物培养基中筛选出所述荧光仪测定的荧光变化明显程度最强的白藜芦醇。优选的，所述人皮肤成纤维细胞株HSF经过磷酸缓冲液PBS清洗。优选的，所述的预定时间为4小时或者8小时。本专利技术还提供了一种用于清除人体有害活性氧的化合组合物应用于抗氧化功能饮料、抗衰老护肤品或化妆品中，用于实现人体有害活性氧中的超氧自由基O2-和过氧化氢H2O2的双清除。相较于现有技术，本专利技术所述实现有害超氧自由基和双氧水双清除的方法，能够从具有抗氧化功能的包含有酚羟基官能团的化合物筛选得到清除超氧自由基O2-的7-羟基香豆素以及清除过氧化氢H2O2的白藜芦醇，通过7-羟基香豆素和白藜芦醇的联合使用，实现了超氧化物和过氧化氢的有害活性氧(ROS)双清除。本专利技术所使用的7-羟基香豆素和白藜芦醇均具有双亲性，可以透过人体皮肤表面，能够更好发挥抗氧化作用。附图说明图1是本专利技术用于清除人体有害活性氧的化合组合物的制备方法较佳实施例的方法步骤图；图2是利用本专利技术所述用于清除人体有害活性氧的化合组合物的应用效果说明示意图。本专利技术目的的实现、功能特点及优点将结合实施例，参照附图做进一步说明。具体实施方式为更进一步阐述本专利技术为达成上述目的所采取的技术手段及功效，以下结合附图及较佳实施例，对本专利技术的具体实施方式、结构、特征及其功效进行细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。如图1所示，图1是本专利技术用于清除人体有害活性氧的化合组合物的制备方法的方法步骤图。在本实施例中，所述用于清除人体有害活性氧的化合组合物的制备方法包括步骤如下：步骤S11本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于清除人体有害活性氧的化合组合物，其特征在于，该化合组合物由用于清除超氧自由基O2‑的7‑羟基香豆素和用于清除过氧化氢H2O2的白藜芦醇混合组成，其中，所述7‑羟基香豆素和白藜芦醇按照物质的量的比2～3:1混合。

【技术特征摘要】
1.一种用于清除人体有害活性氧的化合组合物，其特征在于，该化合组
合物由用于清除超氧自由基O2-的7-羟基香豆素和用于清除过氧化氢H2O2的
白藜芦醇混合组成，其中，所述7-羟基香豆素和白藜芦醇按照物质的量的比
2～3:1混合。
2.一种如权利要求1所述的用于清除人体有害活性氧的化合组合物的制
备方法，其特征在于，该制备方法包括步骤：
配制具有抗氧化功能的包含有酚羟基官能团的化合物，将所述化合物溶
解于细胞培养基中得到化合物培养基；
从化合物培养基中筛选得到用于清除超氧自由基O2-的7-羟基香豆素；
从化合物培养基中筛选得到用于清除过氧化氢H2O2的白藜芦醇；
将筛选出来的7-羟基香豆素和白藜芦醇按照预定物质的量的比2～3:1混
合成化合组合物。
3.如权利要求2所述的用于清除人体有害活性氧的化合组合物的制备方
法，其特征在于，所述从化合物培养基中筛选得到用于清除超氧自由基O2-
的7-羟基香豆素的步骤包括：
将Hacat人正常皮肤细胞株接种于48孔的细胞板中培养16小时；
在细胞培养板的每个孔中添加相同体积的化合物培养基并于二氧化碳培
养箱中培养一段预定时间，将细胞培养板中的细胞经过胰酶消化，并通过离
心处理得到Hacat人正常皮肤细胞；
基于超氧化物特异性指示剂WST-1的显色反应利用分光光度计测定经
过所述化合物培养基处理的Hacat人正常皮肤细胞中超氧自由基O2-的浓度；
从所述化合物培养基中筛选出所述分光光度计测定的颜色变化明显程度
最强的7-羟基香豆素。
4.如权利要求2所述的用于清除人体有害活性氧的化合组合物的制备方
法，其特征在于，所述从化合物培养基中筛选得到用于清除过氧化氢H2O2
\t的白藜芦醇的步骤包括：
将Hacat人正常皮肤细胞株接种于48孔的细胞板中培养16小时；
在细胞培养板的每个孔中添加相同体积的化合物培养基并于二氧化碳培
养箱中培养一段预定时间，将细胞培养板中的细胞经过胰酶消化，并通过离
心处理得到Hacat人正常皮肤细胞；
基于过氧化氢特异指示剂PF1的荧光强度变化利用荧光仪测定经过所
述化合物培养基处理的Hacat人正常皮肤细胞中过氧化氢H2O2的浓度；
从所述化合物培养基中筛选出所述荧光仪...

【专利技术属性】
技术研发人员：张贯京，陈兴明，张少鹏，高伟明，李慧玲，潘延超，
申请(专利权)人：深圳市贝沃德克生物技术研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44