本发明专利技术公开了一种用于组织活检的石蜡切片前处理方法，属于生物病理组织检测领域，包含以下步骤：在相应的温度、压力、时间以及转速条件下，对固定好的组织依次进行10%的中性缓冲福尔马林固定、90%的甲醛乙醇固定、乙醇梯度脱水、二甲苯透明及石蜡浸蜡。本发明专利技术的有益效果在于，通过上述最佳试剂组合，优化脱水、透明及浸蜡的各项条件，提高石蜡切片前处理部分的效率，将组织活检脱水、透明及浸蜡的时间从传统方法所需的近十个小时缩短至两个多小时，缩短了活检周期，并且大大提升了设备的使用率。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物病理组织检测领域，具体涉及。
技术介绍
石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构，也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法。石蜡切片法包括取材、固定、洗涤和脱水、透明、浸蜡、包埋、切片与粘片、脱蜡、染色、脱水、透明、封片等步骤，其中脱水和透明两步骤最为耗时，一般的组织从取材固定到封片制成玻片标本需要数日，使组织活检流程周期长、效率不高。中国专利申请CN201010282261.9公开了一种生物组织脱水机及其应用，该脱水机的脱水方式是采用将生物病理组织固定在样品槽中，连续通入浓度从低到高持续变化的脱水剂进行脱水，通过连续通入脱水剂加快了组织的脱水速度，但脱水过程中脱水剂消耗过大，造成浪费，不利于控制成本。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供，通过控制脱水时的环境温度、加压、搅拌及时间等条件，优化脱水、透明及浸蜡的各项条件，将组织活检脱水、透明及浸蜡的时间控制在两个多小时。为了达到上述目的，本专利技术采用如下的技术方案: ，进行脱水前将组织用10%中性缓冲福尔马林固定，固定时间不少于4小时，后续的操作包含以下步骤: 1)温度60°C、加压35KPa下，将固定好的组织用10%的中性缓冲福尔马林浸渍11分钟，脱水温度为60同时使用搅拌器对所述福尔马林溶液进行800转每分钟的搅拌； 2)温度65度、加压35KPa下，经10%的中性缓冲福尔马林浸渍11分钟后的组织用90%的甲醛乙醇浸渍16分钟，同时使用搅拌器对所述甲醛乙醇溶液进行800转每分钟的搅拌； 3)温度65度、加压35KPa下，经90%的甲醛乙醇浸渍后的组织用95%的乙醇浸渍5分钟，同时使用搅拌器对所述乙醇溶液进行800转每分钟的搅拌； 4)温度65度、加压35KPa下，经95%的乙醇浸渍5分钟后的组织用100%的乙醇浸渍5分钟，同时使用搅拌器对所述乙醇溶液进行800转每分钟的搅拌； 5)温度65度、加压35KPa下，经100%的乙醇浸渍5分钟后的组织用100%的乙醇浸渍7分钟，同时使用搅拌器对所述乙醇溶液进行800转每分钟的搅拌； 6)温度65度、加压35KPa下，经100%的乙醇浸渍7分钟后的组织用100%的乙醇浸渍16分钟，同时使用搅拌器对所述乙醇溶液进行800转每分钟的搅拌； 7)温度65度、加压35KPa下，经100%的乙醇浸渍16分钟后的组织用100%的乙醇浸渍17分钟，同时使用搅拌器对所述乙醇溶液进行800转每分钟的搅拌； 8)温度65度、加压35KPa下，经100%的乙醇浸渍17分钟后的组织用二甲苯浸渍4分钟，同时使用搅拌器对所述二甲苯溶液进行800转每分钟的搅拌； 9)温度65度、加压35KPa下，经二甲苯浸渍4分钟后的组织用二甲苯浸渍5分钟，同时使用搅拌器对所述二甲苯溶液进行800转每分钟的搅拌； 10)温度65度、加压35KPa下，经二甲苯浸渍5分钟后的组织用二甲苯浸渍11分钟，同时使用搅拌器对所述二甲苯溶液进行800转每分钟的搅拌； 11)温度77度、加压35KPa下，经二甲苯浸渍11分钟后的组织用石蜡浸渍4分钟，同时使用搅拌器对浸蜡溶液进行800转每分钟的搅拌； 12)温度77度、加压35KPa下，经石蜡浸渍4分钟后的组织用石蜡浸渍5分钟，同时使用搅拌器对浸蜡溶液进行800转每分钟的搅拌； 13)温度77度、加压35KPa下，经石蜡浸渍5分钟后的组织用石蜡浸渍10分钟，同时使用搅拌器对浸蜡溶液进行800转每分钟的搅拌。优选地，进行脱水前将组织用10%中性缓冲福尔马林固定4~10小时。优选地，直径大于10mm的组织需每隔10mm切开固定，并在每个切口放置分隔海棉。优选地，组织的厚度不大于3mm，组织的面积小于15mmX 15mm。本专利技术的有益效果在于，在用乙醇进行脱水之前，用90%的甲醛乙醇浸渍组织，进一步加强对组织的固定，保护组织在后续的脱水中不轻易损坏；通过优化脱水、透明及浸蜡的各项条件，提高组织脱水、透明的效率，将组织活检脱水、透明及浸蜡的时间从传统方法所需的近十个小时缩短至两个多小时，并不会影响最终的切片质量；各个步骤进行的时间长度精确，便于掌控流程、调配生产；本专利技术提供的脱水、透明及浸蜡方法不会增加生产成本，优化了组织活检流程，缩短了活检周期，并且大大提升了设备的使用率。【附图说明】图1是常温常压条件下制得的石蜡切片图； 图2是常规方法固定后加温加压条件下制得的石蜡切片图； 图3是本专利技术的流程图。【具体实施方式】下面结合附图和具体实施例对本专利技术作进一步说明。实施例1 将厚度小于3mm，面积小于15mmX 15mm的组织用10%中性缓冲福尔马林固定固定6小时后，在常温常压条件下对组织进行脱水、透明和浸蜡，其步骤为: 1)将固定好的组织用95%的乙醇浸渍5分钟，同时使用搅拌器对脱水溶液进行800转每分钟的搅拌； 2)经95%的乙醇浸渍5分钟后的组织用100%的乙醇浸渍5分钟，同时使用搅拌器对脱水溶液进行800转每分钟的搅拌； 3)经100%的乙醇浸渍5分钟后的组织用100%的乙醇浸渍7分钟，同时使用搅拌器对脱水溶液进行800转每分钟的搅拌； 4)经100%的乙醇浸渍7分钟后的组织用100%的乙醇浸渍16分钟，同时使用搅拌器对脱水溶液进行800转每分钟的搅拌； 5)经100%的乙醇浸渍16分钟后的组织用100%的乙醇浸渍17分钟，同时使用搅拌器对脱水溶液进行800转每分钟的搅拌； 6)经100%的乙醇浸渍17分钟后的组织用二甲苯浸渍4分钟，同时使用搅拌器对透明溶液进行800转每分钟的搅拌； 7)经二甲苯浸渍4分钟后的组织用二甲苯浸渍5分钟，同时使用搅拌器对透明溶液进行800转每分钟的搅拌； 8)经二甲苯浸渍5分钟后的组织用二甲苯浸渍11分钟，同时使用搅拌器对透明溶液进行800转每分钟的搅拌； 9)经二甲苯浸渍11分钟后的组织用石蜡浸渍4分钟，同时使用搅拌器对浸蜡溶液进行800转每分钟的搅拌； 10)经石蜡浸渍4分钟后的组织用石蜡浸渍5分钟，同时使用搅拌器对浸蜡溶液进行800转每分钟的搅拌； 11)经石蜡浸渍5分钟后的组织用石蜡浸渍10分钟，同时使用搅拌器对浸蜡溶液进行800转每分钟的搅拌。如图1所示，经过上述步骤脱水、透明和浸蜡的组织最终制得的石蜡切片染色情况较差、不清晰。可见在常温常压条件下，组织的脱水、透明及浸蜡速度较慢，若无精确合适的辅助条件，需要较长的浸渍时间来保证组织的脱水、透明及浸蜡质量，不利于效率的提尚ο实施例2 将厚度小于3mm，面积小于15mmX 15mm的组织用10%中性缓冲福尔马林固定固定6小时后，在加温加压条件下对组织进行脱水、透明和浸蜡，其步骤为: 1)温度65度、加压35KPa下，将固定好的组织用95%的乙醇浸渍5分钟，同时使用搅拌器对脱水溶液进行800转每分钟的搅拌； 2)温度65度、加压35KPa下，经95%的乙醇浸渍5分钟后的组织用100%的乙醇浸渍5分钟，同时使用搅拌器对脱水溶液进行800转每分钟的搅拌； 3)温度65度、加压35KPa下，经100%的乙醇浸渍5分钟后的组织用100%的乙醇浸渍7分钟，同时使用搅拌器对脱水溶液进行800转每分钟的搅拌； 4)温度本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种用于组织活检的石蜡切片前处理方法，其特征在于，包含以下步骤：1）温度60℃、加压35KPa下，将固定好的组织用10%的中性缓冲福尔马林浸渍11分钟，脱水温度为60同时使用搅拌器对所述福尔马林溶液进行800转每分钟的搅拌；2）温度65度、加压35KPa下，经10%的中性缓冲福尔马林浸渍11分钟后的组织用90%的甲醛乙醇浸渍16分钟，同时使用搅拌器对所述甲醛乙醇溶液进行800转每分钟的搅拌；3）温度65度、加压35KPa下，经90%的甲醛乙醇浸渍后的组织用95%的乙醇浸渍5分钟，同时使用搅拌器对所述乙醇溶液进行800转每分钟的搅拌；4）温度65度、加压35KPa下，经95%的乙醇浸渍5分钟后的组织用100%的乙醇浸渍5分钟，同时使用搅拌器对所述乙醇溶液进行800转每分钟的搅拌；5）温度65度、加压35KPa下，经100%的乙醇浸渍5分钟后的组织用100%的乙醇浸渍7分钟，同时使用搅拌器对所述乙醇溶液进行800转每分钟的搅拌；6）温度65度、加压35KPa下，经100%的乙醇浸渍7分钟后的组织用100%的乙醇浸渍16分钟，同时使用搅拌器对所述乙醇溶液进行800转每分钟的搅拌；7）温度65度、加压35KPa下，经100%的乙醇浸渍16分钟后的组织用100%的乙醇浸渍17分钟，同时使用搅拌器对所述乙醇溶液进行800转每分钟的搅拌；8）温度65度、加压35KPa下，经100%的乙醇浸渍17分钟后的组织用二甲苯浸渍4分钟，同时使用搅拌器对所述二甲苯溶液进行800转每分钟的搅拌；9）温度65度、加压35KPa下，经二甲苯浸渍4分钟后的组织用二甲苯浸渍5分钟，同时使用搅拌器对所述二甲苯溶液进行800转每分钟的搅拌；10）温度65度、加压35KPa下，经二甲苯浸渍5分钟后的组织用二甲苯浸渍11分钟，同时使用搅拌器对所述二甲苯溶液进行800转每分钟的搅拌；11）温度77度、加压35KPa下，经二甲苯浸渍11分钟后的组织用石蜡浸渍4分钟，同时使用搅拌器对浸蜡溶液进行800转每分钟的搅拌；12）温度77度、加压35KPa下，经石蜡浸渍4分钟后的组织用石蜡浸渍5分钟，同时使用搅拌器对浸蜡溶液进行800转每分钟的搅拌；13）温度77度、加压35KPa下，经石蜡浸渍5分钟后的组织用石蜡浸渍10分钟，同时使用搅拌器对浸蜡溶液进行800转每分钟的搅拌。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：刘柱新，
申请(专利权)人：广州金域检测科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44
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