一种组织工程皮肤的保存方法及组织工程皮肤技术

本发明专利技术涉及组织工程皮肤保存领域，尤其涉及一种组织工程皮肤的保存方法及组织工程皮肤。在对该组织工程皮肤进行保存时，由于所述组织工程皮肤被半包埋在琼脂溶液与基础培养液的混合液中，能够延长组织工程皮肤的保存时间。本发明专利技术实施例提供的一种组织工程皮肤的保存方法，所述组织工程皮肤具有表皮层和真皮层，包括：步骤1)将组织工程皮肤的表皮层朝上置于培养皿中；步骤2)将基础培养液与琼脂溶液的混合液注入所述培养皿中，使所述组织工程皮肤的真皮层包裹在所述混合液中，表皮层裸露在外。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及组织工程皮肤保存领域，尤其涉及一种组织工程皮肤的保存方法及组 织工程皮肤。
技术介绍
近年来，随着组织工程皮肤的研究和开发，目前组织工程皮肤可以分为单层皮肤 与双层皮肤，根据组织工程皮肤中是否含有活细胞又分为含有活细胞的组织工程皮肤和不 含活细胞的组织工程皮肤。由于活细胞能够参与创面修复，因此，在治疗皮肤疾病时，含有 活细胞的组织工程皮肤能够加快创面修复速度，减轻患者疼痛，但是，含有活细胞的组织工 程皮肤苛刻的保存条件成为制约含活细胞的组织工程皮肤应用的主要因素。 在现有技术中，为了进一步提高含有活细胞的组织工程皮肤的保存时间，出现了 多种用于保存组织工程皮肤的制备方法，其中，一件申请号为201410418456. X的专利文件 中公开了一种皮肤模型的低温保存方法，具体为：步骤1)配制基础培养液，所述基础培养 液包括：海藻糖、蔗糖、甘氨酸、丙氨酸、腺苷、生育酸、维生素 C、去铁胺、1，6-二磷酸果糖 等；步骤2)将低熔点（28-32°C成胶，62-68°C熔化）琼脂糖用去离子水溶解，灭菌备用；步 骤3)将基础培养液与琼脂糖溶液以1:1混合，凝固后制成固体培养基；步骤4)将制备好的 组织工程皮肤连同培养器皿一同嵌入所述固体培养基中，冷藏保存。该制备方法所获得的 组织工程皮肤由于完全被包封在所述固体培养基中，因此，表皮层由于不能接触空气而容 易坏死，从而影响所述组织工程皮肤的保存时间，并且，在将制备好的组织工程皮肤连同培 养器皿一同嵌入所述固体培养基中时，容易造成损坏。
技术实现思路
本专利技术的主要目的在于，提供一种组织工程皮肤的保存方法及组织工程皮肤。在 对该组织工程皮肤进行保存时，由于所述组织工程皮肤被半包埋在琼脂溶液与基础培养液 的混合液中，能够保持组织工程皮肤的细胞活力，延长组织工程皮肤的保存时间。 为达到上述目的，本专利技术采用如下技术方案： -方面，本专利技术实施例提供一种组织工程皮肤的保存方法，所述组织工程皮肤具 有表皮层和真皮层，包括： 步骤1)将组织工程皮肤的表皮层朝上置于培养皿中； 步骤2)将基础培养液与琼脂溶液的混合液注入所述培养皿中，使得所述组织工 程皮肤的真皮层包裹在所述混合液中，表皮层裸露在外。 优选的，步骤1)具体为：将组织工程皮肤放置于底部具有通孔的容器中，并将所 述容器放置于所述培养皿中，其中，所述容器的边缘与所述培养皿的侧壁之间具有空隙。 可选的，步骤2)具体为：将预设体积的混合液沿所述培养皿的边沿注入所述空隙 中。 优选的，在所述步骤2)之后还包括：静置，使混合液凝固，并于2-8°C环境下保存。 进一步地，底部具有通孔的容器为皮托。 可选的，所述基础培养液的温度为4-8 °C，所述琼脂溶液的温度为60-68 °C。 优选的，所述琼脂溶液的浓度为1. 0-1. 5%。 进一步地，将所述琼脂溶液在5. 0-10.0 MPa的条件下灭菌。 可选的，所述基础培养液包括：质量浓度为10_30mg/L的维生素 C、质量浓度为 0. 2-1. Omg/L的谷胱甘肽、质量浓度为0. 5-1. Og/L的L-谷氨酰胺、质量浓度为0. 4-1. Og/L 的色氨酸和质量浓度为〇. 1-0. 3g/L的α -酮戊二酸。 进一步地，所述基础培养液还包括：质量浓度为14. 4-15. Og/L的DMEM、质量浓度 为4. 0-5. 6g/L的F12、体积浓度为5% -15%的胎牛血清以及摩尔浓度为30-50mM的4-羟 乙基哌嗪乙磺酸。 优选的，所述基础培养液还包括：质量浓度为5. 0-7. 0g/L碳酸氢钠、质量浓度为 0. 6-6. 0ng/L的碱性成纤维生长因子bFGF、质量浓度为4-16 μ g/L的胰岛素。 进一步地，所述基础培养液还包括：质量浓度为0. 1-0. 3mg/L的氢化的可松、质量 浓度为6-20mg/L的转铁蛋白、质量浓度为20-40mg/L的腺嘌呤和质量浓度为0. 1-1. 0ng/L 的表皮生长因子EGF。 另一方面，本专利技术实施例提供一种组织工程皮肤，所述组织工程皮肤根据上述所 述的方法保存获得。 本专利技术实施例提供的一种组织工程皮肤的保存方法及组织工程皮肤。通过将具有 表皮层和真皮层的组织工程皮肤的表皮层朝上放置在培养皿中，并将琼脂溶液与基础培养 液的混合液注入所述培养皿中，使得组织工程皮肤的表皮层裸露在外，真皮层包裹在所述 混合液中，在对该组织工程皮肤进行保存时，由于所述组织工程皮肤被半包埋在琼脂溶液 与基础培养液的混合液中，所述组织工程皮肤的表皮层能够与空气直接接触，从而能够避 免表皮层坏死，促进表皮层生长，而真皮层保存在所述琼脂溶液与基础培养液的混合液中， 能够吸取基础培养液中的营养物质，因此，采用该方法对所述组织工程皮肤进行保存时，能 够保持组织工程皮肤的细胞活力，延长组织工程皮肤的保存时间。【附图说明】 为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例描述 中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些 实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附 图获得其它的附图。 图1为本专利技术实施例提供的一种组织工程皮肤的保存方法的流程图； 图2为本专利技术实施例提供的另一种组织工程皮肤的保存方法的流程图； 图3为本专利技术实施例提供的另一种组织工程皮肤的保存方法的流程图； 图4为本专利技术实施例提供的再一种组织工程皮肤的保存方法的流程图。【具体实施方式】 现将详细地提供本专利技术实施方式的参考，其一个或多个实例描述于下文。提供每 一实例作为解释而非限制本专利技术。实际上，对本领域技术人员而言，显而易见的是，可以对 本专利技术进行多种修改和变化而不背离本专利技术的范围或精神。例如，作为一个实施方式的部 分而说明或描述的特征可以用于另一实施方式中，来产生更进一步的实施方式。因此，基于 本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他 实施例，都属于本专利技术保护的范围。 本专利技术实施例所涉及的材料均可以通过商业途径或通过申请人获取。 -方面，参见图1，为本专利技术实施例提供一种组织工程皮肤的保存方法的流程图， 所述组织工程皮肤具有表皮层和真皮层，包括： 步骤1)将组织工程皮肤的表皮层朝上放置于培养皿中； 步骤2)将基础培养液与琼脂溶液的混合液注入所述培养皿中，使得所述组织工 程皮肤的真皮层包裹在所述混合液中，表皮层裸露在外。 本专利技术实施例提供的一种组织工程皮肤的保存方法。通过将具有表皮层和真皮层 的组织工程皮肤的表皮层朝上放置在培养皿中，并将琼脂溶液与基础培养液的混合液注入 所述培养皿中，使得组织工程皮肤的表皮层裸露在外，真皮层包裹在所述混合液中，在对该 组织工程皮肤进行保存时，由于所述组织工程皮肤被半包埋在琼脂溶液与基础培养液的混 合液中，所述组织工程皮肤的表皮层能够与空气直接接触，从而能够避免表皮层坏死，促进 表皮层生长，而真皮层保存在所述琼脂溶液与基础培养液的混合液中，能够吸取基础培养 液中的营养物质，因此，采用该方法对所述组织工程皮肤进行保存时，能够保持组织工程皮 肤的细胞活力，延长组织工程皮肤的保存时间。 其中，对所述基础培养液的获取不做限定，所述基础本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种组织工程皮肤的保存方法，所述组织工程皮肤具有表皮层和真皮层，其特征在于，包括：步骤1)将组织工程皮肤的表皮层朝上置于培养皿中；步骤2)将基础培养液与琼脂溶液的混合液注入所述培养皿中，使所述组织工程皮肤的真皮层包裹在所述混合液中，表皮层裸露在外。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘维，凡孝菊，张春燕，张爱兵，
申请(专利权)人：陕西艾尔肤组织工程有限公司，
类型：发明
国别省市：陕西;61