复方龙葵消炎片的高效液相色谱检测方法技术

本发明专利技术公开了一种复方龙葵消炎片的高效液相色谱检测方法，所述的复方龙葵消炎片主要由龙葵、天胡荽、猴耳环制成，主要检测复方龙葵消炎片中的没食子酸、槲皮素、山柰素、澳洲茄碱、澳洲茄边碱的含量。本发明专利技术根据所述消炎片中没食子酸、槲皮素、山柰素等酚酸类物质和澳洲茄边碱、澳洲茄碱等生物碱类物质这两类进行分步检测，这种检测方法检测精确度和检测速率高，并将其用于所述消炎片的含量测定，该方法保证所述消炎片质量检测标准的准确性和先进性，可作为所述消炎片质量控制的重要指标。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及药物检测领域。更具体地说，本专利技术涉及一种复方龙葵消炎片的高效 液相色谱检测方法。
技术介绍
复方中药是中医临床用药的主要形式，是中医药学特色与精髓。中药是一个由多 成分、多因素构成的复杂体系，其化学成分多样性与复杂性是其疗效物质基础，建立符合中 医药特点的现代质量控制体系，攻克中药质量分析与评价难题，改进中药现有质量控制方 法已成为人们积极研究课题。 建立对中药的质量控制体系必须立足于中药特色。复方中药整体作用特点决定了 中药不同于西药。中药质量控制方法应对多个有效成分进行控制。只有这样，所建立的质 量控制体系才能真正达到控制中药质量、保证中药用药安全有效目的。中药质量控制应从 简单的单个成分含量测定转向以先进技术为手段，多成分、多指标含量测定。 复方龙葵消炎片主要由龙葵、天胡荽、猴耳环制成，其药用活性成分有没食子酸、 槲皮素、山柰素、澳洲茄碱、澳洲茄边碱等，具有清热解毒、止咳祛痰、消肿散结止痛功效，加 强抗菌、抗病毒、抗炎效果，提高免疫力，利尿止泻，主治体表、呼吸系统、消化系统、泌尿系 统等感染及炎症。 复方龙葵消炎片作为复方中药，仅从外观性状、简单鉴别和单一成分含量测定等 角度对复方龙葵消炎片进行质量控制，显然不能全面准确说明其内在质量，不能保证其疗 效。要控制其功效，必须根据中药多组分、多靶点、多途径作用特点，对其物质整体予以控 制，从整体上有效地表征中药的质量，建立安全、有效、稳定的质量标准体系。 复方龙葵消炎片是新研发处理的药物，且复方龙葵消炎片的原料包含3味中药且 中药成分之间存在复杂的相互作用，导致建立全面、有效地反映复方龙葵消炎片内在质量 和疗效的有效成分检测方法存在较大难度，因此，目前本领域存在对能够全面表征复方龙 葵消炎片这种药物的检测方法的需求。
技术实现思路
为了解决上述问题，本专利技术的目的是提供一种复方龙葵消炎片的检测方法，该方 法能够较全面检测复方龙葵消炎片的药物活性组分的含量，从而表征和控制其内在质量。 为了实现上述目的，本专利技术提供了一种复方龙葵消炎片的高效液相色谱检测方 法，所述的复方龙葵消炎片主要由龙葵、天胡荽、猴耳环制成，所述检测方法包括采用高效 液相色谱法检测所述复方龙葵消炎片中的没食子酸、槲皮素、山柰素、澳洲茄碱、澳洲茄边 碱。 优选的是，采用所述的检测方法检测复方龙葵消炎片中的没食子酸、槲皮素、山柰 素的含量包括以下步骤： 1)色谱条件： 色谱柱：采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂； 流动相：甲醇和磷酸溶液的混合液，磷酸溶液的体积分数为0.4%，甲醇和磷酸水 的体积比为55:45 ; 流速：lmL/min; 柱温：25°C; 梯度波长检测：0~15min，检测波长为270nm;15~30min，检测波长为362nm; 2)制备混合对照溶液：精密称取没食子酸对照品、槲皮素对照品、山奈素对照品 适量，加甲醇制成含没食子酸〇. 5mg/mL，槲皮素lmg/mL、山奈素0. 5mg/mL的对照品混合溶 液； 3)制备供试品溶液：取本品粉末约2g，精密称定，精密加入甲醇100ml，称定重量， 回流提取lh，放冷，补足减失重量，过滤，精密量取滤液50mL，加盐酸15mL，水浴回流加热和 水解处理2h，过滤，滤液置1OOmL量瓶中，用少许甲醇洗涤，洗液并入同一量瓶内，加甲醇至 刻度，摇匀，用0. 45nm微孔滤膜滤过，取其滤液； 4)测定：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20yL，注入高效液相色谱仪 后进彳丁测定； 5)计算：理论塔板数按槲皮素峰计算，应不低于5000。记录峰面积，采用外标法计 算没食子酸、槲皮素、山柰素的含量。 优选的是，采用所述的检测方法检测复方龙葵消炎片中的澳洲茄碱、澳洲茄边碱 含量包括以下步骤： 1)色谱条件： 色谱柱：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂； 流动相：乙腈和.即04溶液的混合液，Na2即04为2mol/L，乙腈和Na2HP04溶液的 体积比为39:61 ; 流速：lmL/min;检测波长：205nm; 柱温：25°C; 2)制备混合对照溶液：精密称取澳洲茄碱对照品、澳洲茄边碱对照品适量，加甲 醇制成含澳洲前碱lmg/mL、澳洲前边碱lmg/mL的对照品混合溶液； 3)制备供试品溶液：精密称定复方龙葵消炎片粗粉2g，精密加入100mL甲醇，精密 称定，回流提取lh，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液50mL，蒸干， 加1 %盐酸溶液50mL溶解，蒸干，用少许甲醇洗涤，洗液并入10mL量瓶内，加甲醇至刻度，摇 匀，用0. 45nm微孔滤膜滤过，取其滤液； 4)测定：分别精密吸取对照品混合溶液和供试品溶液各20yL，注入高效液相色 谱仪后进行测定； 5)计算：理论塔板数按澳洲茄碱峰计算，应不低于5000。记录峰面积，采用外标法 计算澳洲茄碱、澳洲茄边碱的含量。 优选的是，采用所述的检测方法检测复方龙葵消炎片中的没食子酸、槲皮素、山柰 素的含量的步骤1)所述的等梯度波长检测还可以采用等波长检测，波长为254nm。 优选的是，采用所述的检测方法检测复方龙葵消炎片中的没食子酸、槲皮素、山柰 素的含量的步骤1)所述的流动相还可以是：流动相A为甲醇，流动相B为0. 4%磷酸溶液， 进行梯度洗脱，所述梯度洗脱程序如下，其中流动相比例均为体积百分比： 0~13min，流动相A为：2%，流动相B为：88% ; 13~14min，流动相A为：2%~52%，流动相B为：48%~88% ; 14~30min，流动相A为：52%，流动相B为：48% ; 30min以上，流动相A为：55%，流动相B为：45%。 优选的是，采用所述的检测方法同时检测复方龙葵消炎片中的澳洲茄碱、澳洲茄 边碱含量的步骤1)所述磷酸溶液可以选用冰醋酸、甲酸、三氯乙酸中的任意一种酸性物质 来代替。 优选的是，采用所述的检测方法同时检测复方龙葵消炎片中的澳洲茄碱、澳洲茄 边碱含量的步骤1)所述的流动相还可以是：流动相A为乙腈，流动相B为1 %体积分数磷 酸溶液，进行梯度洗脱，所述梯度洗脱程序如下，其中流动相比例均为体积百分比： 0~5min，流动相A为：22%，流动相B为：78% ; 5~20min，流动相A为：22%~25%，流动相B为：78%~75% ; 20~25min，流动相A为：25%，流动相B为：75% ; 25min以上，流动相A为：20%，流动相B为：80%。 优选的是，采用所述的检测方法同时检测复方龙葵消炎片中的澳洲茄碱、澳洲茄 边碱含量的步骤1)所述的Na2HP04可以选用氨水、二乙胺、三乙胺、NaH丨04和Na 3P04中的任 意一种物质来代替。 本专利技术根据所述消炎片中没食子酸、槲皮素、山柰素等酚酸类物质和澳洲茄边碱、 澳洲茄碱等生物碱这两类进行分步检测，这种检测方法检测结果精确度高，而且还可以提 高检测速率。并将其用于所述消炎片的含量测定，该方法保证所述消炎片质量检测标准的 准确性和先进性，可作为所述消炎片质量控制的重要指标。在检测复方龙葵消炎片中的没 食子酸、槲皮素、山柰素等酚酸类物质的时候，采用甲醇和磷酸溶液的混合液进行洗脱。由 于甲醇的洗脱能力较强，加入〇. 4%体积分数的磷酸溶液以后，在检测复方龙葵消本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种复方龙葵消炎片的高效液相色谱检测方法，其特征在于，所述的复方龙葵消炎片主要由龙葵、天胡荽、猴耳环制成，所述检测方法包括采用高效液相色谱法检测所述复方龙葵消炎片中的没食子酸、槲皮素、山柰素、澳洲茄碱、澳洲茄边碱。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王捷，蒋伟哲，叶勇，苏志恒，蒋敏捷，黄增琼，
申请(专利权)人：广西医科大学制药厂，
类型：发明
国别省市：广西;45