一种测定食用油中3，4-苯并芘的测定方法技术

本发明专利技术公开了一种测定食用油中3，4-苯并芘的测定方法，包括以下步骤：1）食用油与石油醚混匀，连续萃取三次，震荡；2）将收集的萃取液均分成二份，各加3氯化钠水溶液；3）两份溶液依次通过三个盛有石油醚的分液漏斗，震荡2~3分钟，萃取完毕，合并石油醚反萃取液；4）用甲酸溶液洗涤反萃取液两次，再加入硫酸钠，干燥；5）在玻璃层析柱中装入硅胶G60，压顶，通过柱子，再以混合洗脱液洗脱；6）收集洗脱液浓缩，最后吹入氮气浓缩至1.0毫升；7）暗处展开2小时；8）薄板层做定位标记后，用薄层扫描仪做定量测定。本发明专利技术所述的测定方法快速准确，操作简便，灵敏度高，不用剧毒试剂，对环境的污染较小，对人体健康的危害较轻。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及化学产品分析领域，具体是指一种测定食用油中3，4_苯并芘的测定方法。
技术介绍
3,4-苯并芘是早已确认的一种强致癌物质。由于环境和食品加工过程的污染，食品，待别是烟熏的肉类、油脂和水产品常含有超过一般水平的3，4_苯并芘，因而常需进行检验。油脂中3，4_苯并芘和其它多核芳烃的分析常采用萃取分离，净化后再用各种色谱法确定。很多方法采用二甲基亚砜或二甲基酰胺与环己烷或石油醚作液-液分配，但常有乳化现象且分层慢。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种快速准确，操作简便，灵敏度高，不用剧毒试剂，对环境的污染较小，对人体健康的危害较轻的测定食用油中3，4-苯并花的测定方法。本专利技术通过下述技术方案实现:一种测定食用油中3，4_苯并芘的测定方法，包括以下步骤: (I )25克食用油与50毫升石油醚混匀，用萃取液连续萃取三次，每次20毫升，震荡2~3分钟； (2)将三次收集的60毫升萃取液平均分成二份，各加370毫升2%氯化钠水溶液； (3)两份溶液依次通过三个盛有100毫升石油醚的500毫升分液漏斗，每次震荡2~3分钟，萃取完毕，合并石油醚反萃取液，并以少量石油醚洗涤分液漏斗，然后并入反萃取液中； (4)用质量分数35~67%甲酸溶液洗涤反萃取液两次，每次50毫升，充分震荡I分钟，洗涤后的石油醚反萃取液中加入25克无水硫酸钠干燥0.5-2小时； (5)在玻璃层析柱中装入13克硅胶G60，覆1.5厘米无水硫酸钠或0.5厘米海砂压顶，以少量石油醚润湿柱子，干燥过的石油醚萃取液以8~10毫升/分的流速通过柱子，再以140毫升混合洗脱液洗脱，流速8~10毫升/分； (6)收集洗脱液于带有刻度尾管的真空旋转浓缩器中，减压浓缩至2~3毫升，电吹风作加热器，最后吹入氮气浓缩至1.0毫升； (7)取40微升浓缩液置于乙酰化纤维素薄层板上，在同一水平位置，相距1.5厘米，取20微升3，4-苯并芘标准溶液置于板上，展开剂15毫升，在暗处展开2小时；(8)取出薄板层，在空气中晾干，紫外灯下做定位标记后，用薄层扫描仪做定量测定。为了更好地实现本专利技术的方法，进一步地，所述步骤(I)中，萃取液为15%咖啡因-甲酸溶液。为了更好地实现本专利技术的方法，进一步地，所述步骤(4)中，甲酸溶液质量百分数为 44% ο为了更好地实现本专利技术的方法，进一步地，所述步骤(5 )中，玻璃层析柱的高度为35厘米，宽度为2.5厘米。为了更好地实现本专利技术的方法，进一步地，所述步骤(6)中，真空旋转浓缩器的尾管刻度精度为I毫升。本专利技术与现有技术相比，具有以下优点及有益效果: (1)本专利技术方法采用油脂与溶剂的混合比例为1:2，并验证在不影响萃取效率，缩小比例可大大减少萃取，水解和反萃取所需的溶剂用量；降低了测试成本； (2)本专利技术方法将络合物的水解液分成两等份，反萃取第一份水解液用的石油醚再循环对第二份水解液进行反萃取，效采较好； (3)本专利技术方法在流动相中加1~2毫升水，色谱分离好，荧光保持时间长； (4)本专利技术方法分阶段测定回收率的结果表明，回收率低主要是溶剂比例不适当，经过实验比较，调节了溶剂比例，使其有利于萃取，因而提高了方法的回收率。【具体实施方式】下面结合实施例对本专利技术作进一步地详细说明，但本专利技术的实施方式不限于此，在不脱离本专利技术上述技术思想情况下，根据本领域普通技术知识和惯用手段，做出各种替换和变更，均应包括在本专利技术的范围内。实施例: 本实施例的主要实施步骤如下: (I )25克食用油与50毫升石油醚混匀，用萃取液连续萃取三次，每次20毫升，震荡2~3分钟； (2)将三次收集的60毫升萃取液平均分成二份，各加370毫升2%氯化钠水溶液； (3)两份溶液依次通过三个盛有100毫升石油醚的500毫升分液漏斗，每次震荡2~3分钟，萃取完毕，合并石油醚反萃取液，并以少量石油醚洗涤分液漏斗，然后并入反萃取液中； (4)用质量分数35~67%甲酸溶液洗涤反萃取液两次，每次50毫升，充分震荡I分钟，洗涤后的石油醚反萃取液中加入25克无水硫酸钠干燥0.5-2小时； (5)在玻璃层析柱中装入13克硅胶G60，覆1.5厘米无水硫酸钠或0.5厘米海砂压顶，以少量石油醚润湿柱子，干燥过的石油醚萃取液以8~10毫升/分的流速通过柱子，再以140毫升混合洗脱液洗脱，流速8~10毫升/分； (6)收集洗脱液于带有刻度尾管的真空旋转浓缩器中，减压浓缩至2~3毫升，电吹风作加热器，最后吹入氮气浓缩至1.0毫升； (7)取40微升浓缩液置于乙酰化纤维素薄层板上，在同一水平位置，相距1.5厘米，取20微升3，4-苯并芘标准溶液置于板上，展开剂15毫升，在暗处展开2小时； (8)取出薄板层，在空气中晾干，紫外灯下做定位标记后，用薄层扫描仪做定量测定。其中，所述步骤(I)中，萃取液为15%咖啡因-甲酸溶液，所述步骤(4)中，甲酸溶液质量百分数为44% ;所述步骤(5)中，玻璃层析柱的高度为35厘米，宽度为2.5厘米；所述步骤(6)中，真空旋转浓缩器的尾管刻度精度为I毫升。薄层扫描的检测灵敏度为0.1毫微克。本实施采用油脂与溶剂的混合比例为1:2，并验证在不影响萃取效率，缩小比例可大大减少萃取，水解和反萃取所需的溶剂用量；降低了测试成本。络合物水解后容积较大，为保证萃取百分比尽可能增大，反萃取剂石油醚的体积需与之相适应。3，4 一苯并花的浓度是很低的，它被反萃取到石油醚中的浓度大大低于它在石油醚中的溶解度，将络合物的水解液分成两等份，反萃取第一份水解液用的石油醚再循环对第二份水解液进行反萃取，效采较好。薄层色谱条件:固定相为乙酞化纤维素流动相为二氯甲烷一一无水乙醇(1:2)。如呆Rf值较小，影响分离效果，可在流动相中加1~2毫升水，色谱分离好，荧光保持时间长。本实施例分阶段测定回收率的结果表明，回收率低主要是溶剂比例不适当，经过实验比较，调节了溶剂比例，使其有利于萃取，因而提高了方法的回收率。尽管已经示出和描述了本专利技术的实施例，本领域的普通技术人员可以理解:在不脱离本专利技术的原理和宗旨下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本专利技术的范围由权利要求及其等同物限定。【主权项】1.一种测定食用油中3，4_苯并芘的测定方法，其特征在于:包括以下步骤: (I )25克食用油与50毫升石油醚混匀，用萃取液连续萃取三次，每次20毫升，震荡2~3分钟； (2)将三次收集的60毫升萃取液平均分成二份，各加370毫升2%氯化钠水溶液； (3)两份溶液依次通过三个盛有100毫升石油醚的500毫升分液漏斗，每次震荡2~3分钟，萃取完毕，合并石油醚反萃取液，并以少量石油醚洗涤分液漏斗，然后并入反萃取液中； (4)用质量分数35~67%甲酸溶液洗涤反萃取液两次，每次50毫升，充分震荡I分钟，洗涤后的石油醚反萃取液中加入25克无水硫酸钠干燥0.5-2小时； (5)在玻璃层析柱中装入13克硅胶G60，覆1.5厘米无水硫酸钠或0.5厘米海砂压顶，以少量石油醚润湿柱子，干燥过的石油醚萃取液以8~10毫升/分的流速通过柱子，再以140毫升混合洗脱液洗脱，流速8~10毫升/分； (6)收集洗脱液于带有刻度尾管的真空旋转浓缩器中，减压浓缩至2~3毫本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种测定食用油中3，4‑苯并芘的测定方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）25克食用油与50毫升石油醚混匀，用萃取液连续萃取三次，每次20毫升，震荡2~3分钟；（2）将三次收集的60毫升萃取液平均分成二份，各加370毫升2%氯化钠水溶液；（3）两份溶液依次通过三个盛有100毫升石油醚的500毫升分液漏斗，每次震荡2~3分钟，萃取完毕，合并石油醚反萃取液，并以少量石油醚洗涤分液漏斗，然后并入反萃取液中；（4）用质量分数35~67%甲酸溶液洗涤反萃取液两次，每次50毫升，充分震荡1分钟，洗涤后的石油醚反萃取液中加入25克无水硫酸钠干燥0.5~2小时；（5）在玻璃层析柱中装入13克硅胶G60，覆1.5厘米无水硫酸钠或0.5厘米海砂压顶，以少量石油醚润湿柱子，干燥过的石油醚萃取液以8~10毫升/分的流速通过柱子，再以140毫升混合洗脱液洗脱，流速8~10毫升/分；（6）收集洗脱液于带有刻度尾管的真空旋转浓缩器中，减压浓缩至2~3毫升，电吹风作加热器，最后吹入氮气浓缩至1.0毫升；（7）取40微升浓缩液置于乙酰化纤维素薄层板上，在同一水平位置，相距1.5厘米，取20微升3，4‑苯并芘标准溶液置于板上，展开剂15毫升，在暗处展开2小时；（8）取出薄板层，在空气中晾干，紫外灯下做定位标记后，用薄层扫描仪做定量测定。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：何金蓉，周洁，
申请(专利权)人：成都艾比科生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51