一种抗血小板聚集的川麦冬皂苷组合物制造技术

本发明专利技术涉及的川麦冬皂苷组合物的制备方法包括如下：取川麦冬，加水浸泡6-18h，打碎，再加水煎煮0.5-6h，两次，提取液过滤，静置放凉后，离心，弃去不溶物，上清液、过D-101树脂柱吸附，重复上样一次，静置6-18h，先以水洗脱至洗脱液molish反应呈阴性，再以30％的乙醇溶液洗脱，最后用85％的乙醇溶液洗脱，洗脱液分别回收溶剂，将30％乙醇部位和85％乙醇部位混合，冻干，得川麦冬皂苷组合物。本发明专利技术涉及的川麦冬皂苷组合物具备抗血栓、抗凝血、缩短凝血时间、抗血小板聚集、抗肺血栓、保护缺氧复氧损伤细胞的活性。

【技术实现步骤摘要】

：本专利技术属于中药领域，具体涉及一种川麦冬皂苷组合物及其制备方法，以及该组合物在抗血栓、抗血小板聚集、延长凝血时间上的应用。
技术介绍
：血栓性疾病(thromboticdisease)是由各种原因导致的血液在血管内或心脏中，从流动状态变为凝固状态，从而造成血管不同程度的栓塞(embolism)而形成的一系列综合征。故血栓性疾病又称为血栓栓塞性疾病。大量的研究资料表明，血栓栓塞性疾病已成为危害人群健康的重要因素。血栓栓塞可遍及大小动脉、静脉、甚或毛细血管，由此导致的心肌梗死、脑梗死、肺梗死等，死亡率与致残率极高，为各种病因之首。血栓形成的基本条件：1、血管壁损伤(主要为血管内皮损伤)2、血流变化(血流瘀滞与涡旋)3、血液成分的改变(凝血因子改变与血小板数量增多或功能亢进)，而血管内皮受损是最重要和最常见的。目前所用的抗血栓药物主要分为三类：一是抗血小板药物，二是抗凝药物，三是溶栓药物。血小板是一种多功能细胞，是由骨髓中成熟的巨核细胞的细胞质脱落而成，平均分布在血液中，具有粘附、聚集、释放和分泌颗粒内容物(如5-羟色胺，ADP)的功能。在血栓形成的过程中，血小板的粘附起着重要的始动作用，随之又激发了内源性与外源性的凝血过程。血流缓慢、涡流形成、血液凝固性增高及心血管内膜受损等诸多因素出现时，或以某种因素为主时，靠边的血小板则黏附在裸露的胶原纤维上，并释放ADP和血栓素A2，促使更多的血小板黏附，但当凝血过程启动后，血浆中的纤维蛋白原转变成纤维蛋白，后者使血小板牢固地凝集于受损内膜表面。上述过程反复进行，血小板黏集堆不断增大、增多，构成多个血小板小丘，阻塞血流，从而引起血栓。因此血小板聚集性是预示血栓形成趋势的重要参数，血小板活化聚集可导致或促进这些疾病的发生和发展，所以，对于抗血小板药物的研究具有很重要的意义。临床上，阿司匹林、氯吡格雷和GPIIb/IIIa拮抗剂是当前抗血小板药物的主体，前两者可口服，后者只能静脉注射，且仅适用于疾病急性期。但前两者也常引起不良反应，如阿司匹林常引起紫斑、龈血、消化道出血或术后出血等。氯吡格雷常引起中性粒细胞减少，血栓性血小板减少性紫癜及消化道症状等。抗凝药物，目前常用的有肝素类、水蛭素及其基因重组制剂与维生素K拮抗剂等。前两者均为静脉注射给药，后者为口服抗凝药物。肝素类药物的主要不良反应为出血，也可导致骨质疏松、过敏等。重组水蛭素的不良反应远远低于其他抗凝剂，但由于其作用的不可逆性而使医者慎用。常用的维生素K拮抗剂有华法令(warfarin)和新抗凝(acencoumarol，商品名sintrom)两种。华法令可导致不同程度的出血，且其在临床使用过程中影响因素较多。溶栓药物，主要有尿激酶、链激酶等，可使血栓完全溶解，但多需注射应用，具有一定抗原性，大剂量使用可导致全身出血、出现变态反应等。针对此等现象，研究与开发安全、有效的抗血栓药物显得尤为重要。麦冬为百合科植物麦冬的干燥块根，其味甘、微苦，微寒，归心、肺、胃经，具有养阴润肺、益胃生津、清心除烦之功效，临床用于治疗支气管炎、肺炎等炎症性疾病以及心律失常及心肌缺血等心血管疾病。麦冬含有甾体皂苷、高异黄酮、多糖、氨基酸等活性类成分，现代药理实验证明麦冬中所含的单体成分具有明确的药理活性，如麦冬皂苷D具有抗氧化活性，短葶山麦冬皂苷C具有明确的抗肿瘤细胞转移的作用和麦冬皂苷B可以抑制肺癌细胞的生长等。但单体类成分制备过程较繁琐，得率很低，且成本较高。所以我们选用含有各个单体的提取物作为出发点，优化其分离及制备提纯方法，目的是可以得到具有治疗效果明确的麦冬提取物，使其可以直接用于医疗领域，并被制作成各种制剂，使其原料得到充分的利用。201310710650.0公开了一种具有抗血小板聚集活性的提取物的制备方法，该方法包括：以麦冬药材为原料，用有机溶剂提取，提取液离心，大孔树脂分离，以乙醇溶液进行洗脱，收集洗脱液，干燥即得提取物。201310710650.0实施例1公开了一种具有抗血小板聚集活性的提取物的制备方法，该方法包括：取麦冬药材，加麦冬原料重量大约15倍量水回流提取。提取液过滤，静置放凉后，离心，弃去不溶物，上清液、过D101型大孔树脂柱分离，先以水洗脱至洗脱液molish反应呈阴性，再以30％的乙醇溶液洗脱，最后用85％的乙醇溶液洗脱，洗脱液回收溶剂，干燥即得麦冬不同洗脱部位。实验数据显示，麦冬的抗血小板聚集作用的主要活性部位为85％乙醇洗脱部位，与阳性药持平。麦冬各洗脱部位对ADP诱导的家兔血小板聚集率的影响结论：实验数据显示，麦冬的抗血小板聚集作用的主要活性部位为85％乙醇洗脱部位，与阳性药持平。所以根据实验优选出麦冬活性部位，即麦冬提取物，并对其提取制备工艺进行进一步的优化。由此可知麦冬具有良好的抗血栓活性，而麦冬的副作用或者不良反应从未见有报道，提示麦冬可以作为安全、有效的抗血栓药物进行研究，具有重大意义。但是究竟哪个产地的麦冬及哪个成分群是其主要的活性部位呢？针对这个疑问，本专利技术采用整体动物模型与体外抗凝血、抗血小板聚集以及细胞实验，筛选麦冬抗血栓活性部位；并对活性部位的制备工艺进行优化，建立稳定可靠的质量控制标准。技术方案本专利技术涉及的麦冬的有效部位及其制药用途包括如下：本专利技术涉及一种抗血栓的川麦冬皂苷组合物。本专利技术涉及一种抗凝血的川麦冬皂苷组合物。本专利技术涉及一种缩短凝血时间活性的川麦冬皂苷组合物。本专利技术涉及一种抗血小板聚集的川麦冬皂苷组合物。本专利技术涉及一种保护缺氧复氧损伤细胞的川麦冬皂苷组合物。本专利技术涉及一种抗肺血栓的川麦冬皂苷组合物。本专利技术涉及的麦冬的种类包括：川麦冬、短葶山麦冬、湖北麦冬；本专利技术涉及的麦冬的药材部位包括：麦冬的块根、麦冬的须根；本专利技术涉及的麦冬的有效部位包括如下：麦冬皂苷组合物；麦冬皂苷组合物的正丁醇的提取物；麦冬皂苷组合物的水解物；本专利技术涉及的麦冬的有效部位包括如下：川麦冬皂苷组合物；本专利技术涉及的麦冬的有效部位包括如下：川麦冬须根皂苷组合物；本专利技术涉及的麦冬的有效部位包括如下：短葶山麦冬皂苷组合物；短葶山麦冬皂苷组合物的正丁醇的提取物；短葶山麦冬皂苷组合物的水解物；本专利技术涉及的麦冬的有效部位包括如下：短葶山麦冬须根皂苷组合物；短葶山麦冬须根皂苷组合物的正丁醇的提取物；短葶山麦冬须根皂苷组合物的水解物；本专利技术涉及的麦冬的有效部位包括如下：湖北麦冬皂苷组合物；本专利技术涉及的麦冬皂苷组合物的制备方法包括如下：取麦冬的药材部位，加水浸泡6-18h，打碎，再加水煎煮0.5-6h，两次。提取液过滤，静置放凉后，离心，弃去不溶物，上清液、过D-101树脂柱吸附，重复上样一次，静置6-18h，先以水洗脱至洗脱液molish反应呈阴性，再以30％的乙醇溶液洗脱，最后用85％的乙醇溶液洗脱，洗脱液分别回收溶剂，将30％乙醇部位和85％乙醇部位混合，冻干，得麦冬皂苷组合物。本专利技术涉及的麦冬皂苷组合物的正丁醇萃取部位的制备方法包括如下：麦冬皂本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗血小板聚集的川麦冬皂苷组合物，其特征在于：本专利技术涉及的川麦冬皂苷组合物的制备方法包括如下：取川麦冬，加水浸泡6‑18h，打碎，再加水煎煮0.5‑6h，两次，提取液过滤，静置放凉后，离心，弃去不溶物，上清液、过D‑101树脂柱吸附，重复上样一次，静置6‑18h，先以水洗脱至洗脱液molish反应呈阴性，再以30％的乙醇溶液洗脱，最后用85％的乙醇溶液洗脱，洗脱液分别回收溶剂，将30％乙醇部位和85％乙醇部位混合，冻干，得川麦冬皂苷组合物。

【技术特征摘要】
1.一种抗血小板聚集的川麦冬皂苷组合物，其特征在于：
本发明涉及的川麦冬皂苷组合物的制备方法包括如下：取川麦冬，加水浸泡6-18h，打碎，再加水煎
煮0.5-6h，两次，提取液过滤，静置放凉后，离心，弃去不溶物，上清液、过D-101树脂柱吸附，重复上
样一次，静置6-18h，先以水洗脱至洗脱液molish反应呈阴性，再以30％的乙醇溶液洗脱，最后用85％的
乙醇溶液洗脱，洗脱液分别回收溶剂，将30％乙醇部位和85％乙醇部位混合，冻干，得川麦冬皂苷组合物。
2.根据权利要求1的川麦冬皂苷组合物在制备抗血栓药物上的应用。
3.根据权利要求1的川麦冬皂苷组合物在制备缩短凝血时间药物上的应用。
4.根据权利要求1的川麦冬皂苷组合物在制备抗血小板聚集药物上的应用。
5.根据权利要求1的川麦冬皂苷组合物在制备抗肺血栓药物上的应用。
6.根据权利要求1的川麦冬皂苷组合物在制备保护缺氧复氧损伤细胞药物上的应用。
7.根据权利要求1的川麦冬皂苷组合物的薄层色谱定性鉴别，其特征在于：
取川麦冬皂苷组合物，1ml甲醇溶解，LC-C18SPE固相萃取小柱吸附，分别用水、40％、75％、85％
甲醇溶液各8ml洗脱，收集75％洗脱部位，挥干溶剂，用少量甲醇溶解，备用；
展开系统如下：
(1)氯仿-甲醇-水(17∶6∶2)
(2)丙酮-乙酸乙酯-水-乙酸(5∶5∶1∶0.2)
(3)水饱和正丁醇系统。
8.根据权利要求1的川麦冬皂苷组合物的HPLC-ELSD色谱，其特征在于：
用HPLC-ELSD进行成分定性测定。
色谱柱：AgilentZORBAXSB-C18，4.6×250mm，5μm；
色谱条件：甲醇-水梯度洗脱，洗脱条件；
总皂苷HPLC-ELSD色谱条件
9.根据权利要求1的川麦冬皂苷组合物的川麦冬多糖含量...

【专利技术属性】
技术研发人员：张剑，董迪，陈维，
申请(专利权)人：哈尔滨泰华药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23