一种体外注射标记营养素代谢率的测定方法及测定装置制造方法及图纸

本发明专利技术公开了一种体外注射标记营养素代谢率的测定方法，包括如下步骤：真空干燥器盛放曝气自来水，三角烧瓶盛放氢氧化钾溶液；对鱼麻醉后进行腹腔注射，待鱼在清水中游动，取水样测定，用于计算注射入鱼体内的放射度，将鱼放入所述真空干燥器中；抽取氢氧化钾溶液，加入液闪液，放入液闪仪测定其放射性强度。本发明专利技术还公开了一种体外注射标记营养素代谢率的测定装置。本发明专利技术通过直接检测标记CO2量反映机体对特定某一营养素的精确代谢率，同时达到实时收集检测。避免了传统测定代谢率装置以测定耗氧率、排氨率和CO2产生率等系列指标，从而间接粗略笼统推算各营养素代谢率的方法，灵敏精确。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及水生动物营养
，具体涉及一种体外注射标记营养素代谢率的测定方法及测定装置。
技术介绍
自然状态下，水生动物经常会受到饥饿、缺氧或药物等外界因素的胁迫，而机体为了面对各种有利或不利的环境条件，必然采取相应的代谢策略给予应对。代谢的改变通常伴随营养素代谢选择的改变，对于营养素代谢是如何选择从而产生不同的代谢效率？传统营养研宄，通常从计算总代谢率方法入手。通过对耗氧率、排氨率、二氧化碳产生率等系列指标的测定，来推算机体对营养素代谢偏好的选择。其方法粗略笼统，并且不能对不同处理间动物特定某种营养素的代谢速率进行比较，此外，通过长期投喂一种营养素的方式来评判机体对特定营养素的利用速率并不可行。因为在其它营养素缺失的情况下无法保证机体生长、存活和繁殖，而且极不科学。更无法客观反应机体对特定营养素的代谢速率。现有技术中存在的问题，例如，传统使用装置虽然设计精密，并有一定使用基础，但是其大多是通过计算耗氧率、排氨率等推算三大营养物质总代谢率，方法粗略而装置配套复杂庞大；对于能够测定体外注射标记营养物质代谢率的装置，因其易产生放射性污染的特点，国内鲜有见到，而国外常见于使用价格昂贵的电脑操作装置结合个体较大的虹鳟鱼手术套管注射防止污染。在适用性上受鱼个体大小限制，技术要求强，污染成本高。而现有的代谢率测定装置，对代谢二氧化碳的含量测定也不能达到实时收集测定。因此，现在市场上亟需一种新的代谢率测定装置来克服上述缺陷。
技术实现思路
本专利技术提出的体外注射标记营养素代谢率的测定方法及测定装置，可以灵敏精确地测定机体对特定营养素的代谢率。通过代谢率变化差异直接评测机体应对环境条件的代谢选择，从而为生产实践中饲料营养配方调整提供理论指导。本专利技术提出了一种体外注射标记营养素代谢率的测定方法，包括如下步骤:步骤一:真空干燥器盛放曝气自来水，三角烧瓶盛放氢氧化钾溶液。步骤二:对鱼麻醉后进行腹腔注射，待鱼在清水中游动，取水样测定，用于计算注射入鱼体内的放射度，步骤三:将鱼放入所述真空干燥器中；步骤四:抽取氢氧化钾溶液，加入液闪液，放入液闪仪测定其放射性强度。本专利技术体外注射标记营养素代谢率的测定方法，进行腹腔注射所用的待注射液是按10尾50g体重鱼用量进行计算，500 μ I14C棕榈酸与62.5 μ I未标记棕榈酸相混合，经过N2吹干，加入200 μ IDMSO助溶剂，充分溶解后配成待注射液。本专利技术体外注射标记营养素代谢率的测定方法，需在步骤一之前进行预实验，所述预实验包括如下步骤:步骤a:根据鱼的体重配备对应浓度及放射强度的标记脂肪酸；步骤b:对鱼进行麻醉，注射所述标记脂肪酸；步骤c:分别在 2min, 1min, 25min, 40min, 55min, 70min, 130min, 190min 之后对回收标记0)2的氢氧化钾溶液进行采样测定，从而确定正式实验的采样时间点。本专利技术体外注射标记营养素代谢率的测定方法，通过直接检测标记0)2量反映机体对特定某一营养素的精确代谢率，并达到实时收集检测。避免了传统测定代谢率装置以测定耗氧率、排氨率和CO2产生率等系列指标推算各营养素代谢率的方法，灵敏精确。本专利技术体外注射标记营养素代谢率的测定方法中，所述氢氧化钾溶液浓度为45% -80% ο本专利技术体外注射标记营养素代谢率的测定方法中，24cm直径大小真空干燥器的加水量为6-7L，鱼体大小可为20-100g本专利技术提出了一种体外注射标记营养素代谢率的测定装置，其包括:真空干燥器、三角烧瓶、第一导管、第二导管和注射器；所述真空干燥器的内部盛放经曝气的自来水，所述第一导管为L形导管，所述第一导管设置在所述真空干燥器的瓶口中，一端位于所述瓶口的外部，另一端伸入所述自来水中；所述三角烧瓶内部盛放氢氧化钾溶液，所述三角烧瓶的瓶口与所述真空干燥器的瓶口之间设置所述第二导管，所述第二导管的一端位于所述自来水的上部，另一端伸入所述氢氧化钾溶液中；所述注射器的针头插入所述三角烧瓶的瓶口中。本专利技术的体外注射标记营养素代谢率的测定装置中，所述第二导管包括短L形导管、乳胶管和长L形导管，所述短L形导管设置在所述真空干燥器的瓶口，一端位于所述自来水的上方，另一端与所述长L形导管通过所述乳胶管连通，所述长L形导管设置在所述三角烧瓶的瓶口，一端伸入所述氢氧化钾溶液中。本专利技术的体外注射标记营养素代谢率的测定装置中，所述真空干燥器的瓶口设置有双孔胶塞，双孔分别用于设置所述第一导管和所述第二导管。本专利技术的体外注射标记营养素代谢率的测定装置中，所述三角烧瓶的瓶口设置有单孔胶塞，单孔用于设置所述第二导管。本专利技术有益效果包括:实施本专利技术时，可保证水生动物生活环境的相对密闭性及维持其有氧呼吸的正常进行。本专利技术实施操作简便，主要采用真空干燥器、乳胶管、三角烧瓶、注射器、玻璃导管、单双孔塞。只需将真空干燥器，三角烧瓶通过玻璃导管和乳胶管进行连接并且确保胶塞的封闭性，将注射器插入胶塞采集水样即可。本专利技术使用实验室常见的真空干燥器和三角烧瓶即可开展实验，生产实践中易于推广实施，应用前景广泛。本专利技术中采用静水装置，避免了流水装置中曝气时空气中带入的二氧化碳所导致的测定误差。现有的传统营养研宄技术无法直接测定特定某一营养素的代谢速率，而本专利技术方法通过14C营养素在体内代谢产生的140)2量，进而精确反应机体对某种特定营养素的代谢速率。可以作为评判机体代谢选择、代谢状态的一个灵敏指标。现有技术中略有国外报道涉及主要针对三文鱼、虹鳟等个体较大的水生动物的体外注射标记营养素代谢速率的精密装置。对于个体偏小的相关鱼类、尤其是国内大宗经济鱼类，并未见有任何报道公开相关配套且经济的适用装置，也没有任何报道涉及有关检测的实验材料、条件摸索等相关信息。本专利技术首次创新提出的检测方法和装置对研宄人员进tx相关研宄具有极尚的参考价值。本专利技术通过直接检测标记CO2量反映机体对特定某一营养素的精确代谢率，同时达到实时收集检测。避免了传统测定代谢率装置以测定耗氧率、排氨率和CO2产生率等系列指标，从而间接粗略笼统推算各营养素代谢率的方法，灵敏精确。【附图说明】图1为本专利技术体外注射标记营养素代谢率测定装置的结构示意图。图2为实施例中体外注射标记营养素代谢率测定方法预实验的实验结果示意图。图3为实施例中体外注射标记营养素代谢率测定装置的结构示意图。图4为实施例中体外注射标记营养素代谢率测定方法放射度的测定结果示意图。图5a为实施例中20分钟时的放射度测定结果示意图。图5b为实施例中40分钟时的放射度测定结果示意图。图5c为实施例中60分钟时的放射度测定结果示意图。【具体实施方式】结合以下具体实施例和附图，对本专利技术作进一步的详细说明，本专利技术的保护内容不局限于以下实施例。在不背离专利技术构思的精神和范围下，本领域技术人员能够想到的变化和优点都被包括在本专利技术中，并且以所附的权利要求书为保护范围。实施本专利技术的过程、条件、试剂、实验方法等，除以下专门提及的内容之外，均为本领域的普遍知识和公知常识，本专利技术没有特别限制内容。如图1所示，本专利技术体外注射标记营养素代谢率的测定装置，其包括:真空干燥器1、三角烧瓶2、第一导管3、第二导管和注射器7 ;真空干燥器I的内部盛放经曝气的自来水，第一导管3为L形导管，第一导本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种体外注射标记营养素代谢率的测定方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一：真空干燥器(1)盛放曝气自来水，三角烧瓶(2)盛放氢氧化钾溶液；步骤二：对鱼麻醉后进行腹腔注射，待鱼在清水中游动，取水样测定，用于计算注射入鱼体内的放射度；步骤三：将鱼放入所述真空干燥器(1)中；步骤四：抽取氢氧化钾溶液，加入液闪液，放入液闪仪测定其放射性强度。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杜震宇，宁丽军，李加敏，李玲玉，何安元，张美玲，陈立侨，
申请(专利权)人：华东师范大学，
类型：发明
国别省市：上海;31