一种红掌快繁方法技术

技术编号:12060246 阅读:111 留言:0更新日期:2015-09-17 10:35
本发明专利技术涉及一种红掌快繁方法,包括培养基制备,外植体的消毒,外植体的诱导,继代芽的分化,继代芽的生根,以及炼苗及移栽。经过上述培养的红掌的愈伤组织的诱导率达到95%,生根率达到90%,移栽成活率达到95%,变异率下降到2%。

【技术实现步骤摘要】
一种红掌快繁方法
本专利技术涉及一种植物组织培养方法,具体涉及一种红掌快繁方法。
技术介绍
红掌(Anthuriumadndraeanum)为天南星科花烛属多年生常绿草本植物,可作盆花和切花使用,是当今世界最受欢迎的名贵花卉之一,具有很高的观赏价值和经济价值。红掌是重要的热带切花,佛焰花序,其佛焰花苞硕大,肥厚具蜡质,色泽有红、粉、白、绿、双色等。其色泽鲜艳,造形奇特,应用范围广,经济价值高,是目前全球发展快、需求量较大的高档热带切花和盆栽花卉。在红掌原产地热带雨林,红掌可用种子繁殖,但进入开花时间长。分株繁殖是红掌以前繁殖的主要方式。红掌植株基部长出吸芽,产生根系后可分株,每年可分3-4株,繁殖系数较低,很难满足规模化生产所需的种苗。现在红掌种苗生产主要通过组织培养进行种苗的快速繁殖,也就是红掌的克隆技术。这样可以在比较短的时间内生产整齐一致的优质种苗,供应生产的需要。通过组织培养技术生产红掌种苗主要有再生体系的建立、增殖培养、壮苗生根、移栽和温室育苗等技术环节。目前国内外对红掌组织培养的研究报道主要是以叶片、叶柄、茎段等器官进行愈伤组织诱导,然后再诱导愈伤组织分化不定芽,通过这种途径获得的不定芽在增殖过程中由于培养基的配方缺陷,容易出现变异,影响了种苗原有的优良遗传性状,且成苗率低。
技术实现思路
本专利技术针对目前的问题,提供一种红掌快繁方法。为解决上述技术问题,本专利技术采用的一个技术方案是:一种红掌快繁方法,包括以下步骤:(1)培养基制备:选择WPM培养基作为基本培养基,6-苄氨基嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)、2.4-D、赤霉素、激动素(KT)和3-吲哚乙酸(IAA)作为调控激素分别制备三种培养基:愈伤诱导培养基A:WPM+6-BA0.2~0.4mg/L+2.4-D0.4~0.7mg/L+赤霉素2.2~2.5mg/L,继代培养基B:WPM+6-BA0.5~1.0mg/L+KT0.6~1mg/L,生根培养基C:WPM+NAA0.1~0.4mg/L+IAA0.2~0.4mg/L+活性炭质量比0.1%~0.3%,培养基A和B中均附加4%蔗糖和1%琼脂,培养基C附加6%蔗糖和1.5%琼脂,用1.2~1.5mol/L的NaOH和HCl调节pH值至6.0,并将培养基A、B和C在0.1~0.2MPa,130~135℃下灭菌15~20min;(2)外植体的消毒:选用红掌刚萌发的嫩叶作为外植体,在已经消毒的超净工作台上用无菌水冲洗3~4次,后用75%酒精浸泡60s,再用有效氯浓度为1%NaClO溶液浸泡材料10~20min,最后用无菌水清洗经过消毒处理的种子4~5次;(3)外植体的诱导:将步骤(2)消毒的红掌外植体接种在愈伤诱导培养基A上,接种瓶内每瓶放1~3个外植体;(4)继代芽的分化:将步骤(3)中初分化完成的外植体转接入继代培养基B中;(5)继代芽的生根:将高度为2.0cm左右、健壮的继代单芽转接入生根培养基C中。优选地,所述的愈伤诱导培养基A:WPM+6-BA0.3mg/L+2.4-D0.5mg/L+赤霉素2.4mg/L。优选地,所述的继代培养基B:WPM+6-BA0.8mg/L+KT0.8mg/L。优选地,所述的生根培养基C:WPM+NAA0.2mg/L+IAA0.3mg/L+活性炭质量比0.2%。优选地,还包括步骤(6)炼苗及移栽:把接种瓶瓶口打开在培养室内散射光下炼苗5~7天,光照时间为12h/d,光照强度为1500~1700Lux,培养室温度为25~27℃;之后取出瓶内的组培苗,用自来水洗净根部的琼脂,再用蒸馏水稀释成800倍的百菌清浸泡组培苗根部10~15min,移栽至以蛭石和珍珠岩为混合基质的培养皿中,将营养皿放到人工气候箱中,光照周期14h/d,光照强度为1700~1900Lux,白天25~27℃,晚上13~15℃,保持湿度50~60%,隔三天浇一次1/10~1/8WPM母液,20~30天后移栽到大棚中。本专利技术的有益效果是:本专利技术针对现有技术的缺点,改进了培养基配方,主要是将现有技术中的基础培养基修改为WPM,同时相应调整激素的浓度,上述改变,不仅降低了成本,最重要的是降低了变异率,提高了愈伤组织的诱导率和生根率,保证了最终的高成苗率。具体实施方式下面对本专利技术的较佳实施例进行详细阐述,以使本专利技术的优点和特征能更易于被本领域技术人员理解,从而对本专利技术的保护范围做出更为清楚明确的界定。本专利技术实施例包括:实施例1一种红掌快繁方法,包括以下步骤:(1)培养基制备:选择WPM培养基作为基本培养基,6-苄氨基嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)、2.4-D、赤霉素、激动素(KT)和3-吲哚乙酸(IAA)作为调控激素分别制备三种培养基:愈伤诱导培养基A:WPM+6-BA0.2mg/L+2.4-D0.4mg/L+赤霉素2.2mg/L,继代培养基B:WPM+6-BA0.5mg/L+KT0.6mg/L,生根培养基C:WPM+NAA0.1mg/L+IAA0.2mg/L+活性炭质量比0.1%,培养基A和B中均附加4%蔗糖和1%琼脂,培养基C附加6%蔗糖和1.5%琼脂,用1.2mol/L的NaOH和HCl调节pH值至6.0,并将培养基A、B和C在0.1MPa,130~135℃下灭菌15min;(2)外植体的消毒:选用红掌刚萌发的嫩叶作为外植体,在已经消毒的超净工作台上用无菌水冲洗3次,后用75%酒精浸泡60s,再用有效氯浓度为1%NaClO溶液浸泡材料10min,最后用无菌水清洗经过消毒处理的种子4次;(3)外植体的诱导:将步骤(2)消毒的红掌外植体接种在愈伤诱导培养基A上,接种瓶内每瓶放1个外植体;(4)继代芽的分化:将步骤(3)中初分化完成的外植体转接入继代培养基B中;(5)继代芽的生根:将高度为2.0cm左右、健壮的继代单芽转接入生根培养基C中;(6)炼苗及移栽:把接种瓶瓶口打开在培养室内散射光下炼苗5天,光照时间为12h/d,光照强度为1500Lux,培养室温度为25℃;之后取出瓶内的组培苗,用自来水洗净根部的琼脂,再用蒸馏水稀释成800倍的百菌清浸泡组培苗根部10min,移栽至以蛭石和珍珠岩为混合基质的培养皿中,将营养皿放到人工气候箱中,光照周期14h/d,光照强度为1700Lux,白天25℃,晚上1℃,保持湿度50%,隔三天浇一次1/10WPM母液,20天后移栽到大棚中。实施例2红掌快繁方法,包括以下步骤:(1)培养基制备:选择WPM培养基作为基本培养基,6-苄氨基嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)、2.4-D、赤霉素、激动素(KT)和3-吲哚乙酸(IAA)作为调控激素分别制备三种培养基:愈伤诱导培养基A:WPM+6-BA0.4mg/L+2.4-D0.7mg/L+赤霉素2.5mg/L,继代培养基B:WPM+6-BA1.0mg/L+KT1mg/L,生根培养基C:WPM+NAA0.4mg/L+IAA0.4mg/L+活性炭质量比0.3%,培养基A和B中均附加4%蔗糖和1%琼脂,培养基C附加6%蔗糖和1.5%琼脂,用1.5mol/L的NaOH和HCl调节pH值至6.0,并将培养基A、B和C在0.2MPa,135℃下灭菌20min;(2)外植体的消毒:选用红掌刚萌发的嫩叶作为外植体,在已经消毒的超净工作台上用本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种红掌快繁方法,其特征在于包括以下步骤:(1)培养基制备:选择WPM培养基作为基本培养基,6‑苄氨基嘌呤(6‑BA)、萘乙酸(NAA)、2.4‑D、赤霉素、激动素(KT)和3‑吲哚乙酸(IAA)作为调控激素分别制备三种培养基:愈伤诱导培养基A:WPM+6‑BA 0.2~0.4mg/L+2.4‑D 0.4~0.7mg/L+赤霉素2.2~2.5mg/L,继代培养基B:WPM+6‑BA 0.5~1.0mg/L+ KT 0.6~1mg/L,生根培养基C:WPM +NAA0.1~0.4mg/L+IAA0.2~0.4mg/L+活性炭质量比0.1%~0.3%,培养基A和B中均附加4%蔗糖和1%琼脂,培养基C附加6%蔗糖和1.5%琼脂,用1.2~1.5mol/L的NaOH和HCl调节pH值至6.0,并将培养基A、B和C在0.1~0.2MPa,130~135℃下灭菌15~20min;(2)外植体的消毒:选用红掌刚萌发的嫩叶作为外植体,在已经消毒的超净工作台上用无菌水冲洗3~4次,后用75%酒精浸泡60s,再用有效氯浓度为1%NaClO溶液浸泡材料10~20min,最后用无菌水清洗经过消毒处理的种子4~5次;(3)外植体的诱导:将步骤(2)消毒的红掌外植体接种在愈伤诱导培养基A上,接种瓶内每瓶放1~3个外植体;(4)继代芽的分化:将步骤(3)中初分化完成的外植体转接入继代培养基B中;(5)继代芽的生根:将高度为2.0cm左右、健壮的继代单芽转接入生根培养基C中。...

【技术特征摘要】
1.一种红掌快繁方法,其特征在于包括以下步骤:(1)培养基制备:选择WPM培养基作为基本培养基,6-苄氨基嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)、2.4-D、赤霉素、激动素(KT)和3-吲哚乙酸(IAA)作为调控激素分别制备三种培养基:愈伤诱导培养基A:WPM+6-BA0.3mg/L+2.4-D0.5mg/L+赤霉素2.4mg/L,继代培养基B:WPM+6-BA0.5~1.0mg/L+KT0.6~1mg/L,生根培养基C:WPM+NAA0.1~0.4mg/L+IAA0.2~0.4mg/L+质量比0.1%~0.3%的活性炭,培养基A和B中均附加4%蔗糖和1%琼脂,培养基C附加6%蔗糖和1.5%琼脂,用1.2~1.5mol/L的NaOH和1.2~1.5mol/L的HCl调节pH值至6.0,并将培养基A、B和C在0.1~0.2MPa,130~135℃下灭菌15~20min;(2)外植体的消毒:选用红掌刚萌发的种子作为外植体,在已经消毒的超净工作台上用无菌水冲洗3~4次,后用75%酒精浸泡60s,再用有效氯浓度为1%的NaClO溶液浸泡材料10~20min,最后用无菌水清洗经过消毒处理的种子4~5次;(3)外植体的诱导:将步骤(2)消毒的红掌...

【专利技术属性】
技术研发人员:于永军
申请(专利权)人:锡山区先锋家庭农场
类型:发明
国别省市:江苏;32

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