DREB基因转化红掌的遗传转化方法技术

技术编号:6982040 阅读:428 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术属于分子育种领域,公开了DREB基因转化红掌的遗传转化方法。该方法是将红掌无菌愈伤组织切开后用含有重组质粒pCAMBIA1301-DREBa的农杆菌液侵染10min,共培养3d、抑菌培养5d、筛选培养获得具潮霉素抗性的生根苗。经PCR检测证实外源基因已转入红掌基因组DNA中。本发明专利技术首次针对红掌建立了其遗传转化体系,为红掌分子育种工作提供了理论基础和实验依据,将有效推动其分子育种进程。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子育种领域,涉及DREB基因转化红掌的遗传转化方法
技术介绍
红掌为天南星科花烛属多年生草本植物,原产哥伦比亚南部,是世界名贵花卉。红掌具有艳丽的佛艳苞,花期长、周年开花、叶片蜡质,是观叶观花俱佳的室内观赏植物。红掌夜间生长适温在18-20°C,白天为25°C左右。在夏季,如夜间室温度超过25°C或白天室内温度超过30°C时,而在冬季,如夜间室温度低于12°C或白天室温度低于18°C时,则会出现叶片失去光泽、发黄,佛艳苞花期变短,易枯萎,还会引起叶腐病,严重影响其生长和观赏价值。为此,在夏季期必须采取人为降温措施,而在冬季则必须人为进行加温,使得室内温度适宜红掌的生长,然而降温和加温都显著地增加了红掌生产成本。因此,筛选、培育耐高温和低温的红掌新品种有着巨大的实用价值和经济意义。近年来,随着植物基因工程的发展,分子育种克服了常规育种的种种限制,为利用新的基因资源改良红掌品种提供了新的手段和途径。农杆菌介导法以其操作简单,费用低, 效率高,插入DNA片段大,稳定性好,转基因拷贝数低等优点,已成为转基因策略中的首选方法。DREB转录因子作为一类在植物抵抗非生物胁迫中本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.DREB基因转化红掌的遗传转化方法,其特征在于包括如下步骤:1)无菌愈伤组织的获得:取红掌组培苗,切取带有一对叶的红掌茎尖,在继代培养基1/2MS+6-BA 1.0mg/L+IBA0.1mg/L上诱导愈伤组织,40天后挑选大小一致的愈伤组织,将愈伤组织表层去掉后切割成片状,接种于MS+6-BA 1.0mg/L+IBA 0.1mg/L诱导培养基;2)农杆菌悬浮液制备中:将插入目的基因DREB的重组质粒pCAMBIA1301-DREBa采用液氮冷冻法转化农杆菌LBA4404感受态细胞,取经酶切验证含有所述重组质粒pCAMBIA1301-DREBa的农杆菌LBA4404-DREBa菌液制备农杆菌...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:滕年军陶清良陈发棣陈琳房伟民蒋甲福陈素梅刘兆磊
申请(专利权)人:南京农业大学
类型:发明
国别省市:84

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1