一种乳液PCR体系制造技术

技术编号:11942433 阅读:746 留言:0更新日期:2015-08-26 13:36
本发明专利技术属于生物技术领域,具体涉及一种乳液PCR体系。该乳液PCR体系由水相、油相、表面活性剂与助表面活性剂组成。本发明专利技术提供的emPCR体系优化了核酸测序的体系环境,试剂的选取增加了乳液体系的稳定性,使测序结果更精确、均一和稳定。该方案制备的乳液体系热稳定性好,微球在液滴中分布均匀,单克隆比例高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
,具体涉及一种乳液PCR体系
技术介绍
乳液PCR(emulsion PCR)技术利用油包水结构作为PCR反应的微反应器,进行PCR 扩增。乳液PCR最大的特点是可以形成数目庞大的独立反应空间以进行PCR扩增。其关键 技术是"注水到油",基本过程是在PCR反应前,将包含PCR所有的反应成分的水溶液注入到 高速旋转的油相表面,水溶液瞬间形成数以万计个被油相包裹的小液滴。这些小液滴就形 成了 PCR反映空间。由于水相中的P2引物和磁珠表面的Pl引物所介导的PCR反应,这个 DNA模板的拷贝数量呈指数扩增,PCR反应结束后,Pl磁珠表面就固定有拷贝数目巨大的同 源DNA扩增产物,每个片段扩增后产生几百万个相同的拷贝,这些拷贝也结合在磁珠上。整 个文库的DNA。 基于油包水的乳液系统提出一个扩增复杂DNA混合物的方案,目标分子被分割在 微小的乳液液滴中并进行分别扩增,这种方法能够在低浓度目标DNA和大量的PCR循环条 件下进行。每个独立的片段在自己的微反应器里进行独立的扩增,而没有其他的竞争性或 污染性序列的影响。整个片段文库的扩增平行进行。随后,乳本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种乳液PCR体系,其特征在于,所述PCR体系为乳液体系,包括水相、油相、表面活性剂与助表面活性剂。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:蔡亦梅高静徐潇吴超张睿王者馥王绪敏殷金龙任鲁风
申请(专利权)人:北京中科紫鑫科技有限责任公司
类型:发明
国别省市:北京;11

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