本发明专利技术公开了一种使用超声反相悬浮法制备高度交联均一粒径琼脂糖凝胶介质的方法，本发明专利技术的目的是提供一种提高了凝胶的回收率，实现了凝胶均一性控制的高度交联均一粒径琼脂糖凝胶介质的方法，本发明专利技术首先制备油相溶液通过超声混均然后制备2％～20％的琼脂糖溶液，再次将其上制备的溶液混合乳化，并通过筛网抽滤并通过反应制备出高度交联均一粒径琼脂糖的凝胶介质并将其保存在20-80％的乙醇中。本发明专利技术主要用于药品生产厂家。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种琼脂糖凝胶介质的制备工艺，尤其涉及一种使用超声反相悬浮法制备高度交联均一粒径琼脂糖凝胶介质。
技术介绍
琼脂糖凝胶基质在生物医学行业的应用可追溯到上个世纪六七十年代，由于琼脂糖的电中性，能与生物大分子良好相容而不发生特异性结合，容易被修饰和交联等特性使它迅速成为生物医学领域应用最为广泛的介质。经过近半个世纪的应用，琼脂糖凝胶其机械强度、多孔性、生物相容性、化学稳定性和衍生能力等方面得到了长足的发展。然而，目前琼脂糖凝胶介质的生产技术与市场仍然被国外企业所垄断。琼脂糖凝胶介质的销售价格正在以每年10%上涨。这也是以琼脂糖为基质的免疫吸附剂价格居高不下的原因之一。国内虽然也有一些科研单位和厂家在研发生产，但质量参差不齐，所制备的凝胶在百分比含量、纯度、均一性、机械性能、外观色泽等等方面存在问题。尤其是在机械性能差或是均一性上。原因主要是而按照国外传统的工艺，主要还是采用冷水液相的工艺，要做到高水平的琼脂糖凝胶介质，实施控制技术难度较高，符合质量的凝胶回收率低，成本高。
技术实现思路
本专利技术公开了一种使用超声反相悬浮法制备高度交联均一粒径琼脂糖凝胶介质，以解决凝胶颗粒均一性和机械性能问题，以期提高琼脂糖凝胶介质的质量同时降低其生产成本。本专利技术的技术解决方案是:一种使用超声反相悬浮法制备高度交联均一粒径琼脂糖凝胶介质的方法，其步骤是:a、准确量取2-20体积比例的油性液体与准确量取I体积比例的有机溶剂按2_20:I的比例混匀制成油相溶液；b、向油相溶液中加入非离子表面活性剂调节油相溶液的亲水亲油平衡值至3-20之间；C、将上述体系用100w-1000w超声5_30分钟，混均后预热至60_90°C ；d、准确称取重量分比为0.4?4的琼脂糖，重量分比为0.18的氯化钠使用超纯水定容至体积比例为20，加热融化，制成水相的2%?20%琼脂糖溶液；e、将2%?20%琼脂糖溶液加热至60_90°C加入60_90°C的油相中，恒温以转速10-1OOOrpm搅拌15-90分钟乳化；f、乳化完成之后以低速50-300rpm搅拌，3小时内缓慢降至室温，再继续降温至4-8 0C ；g、通过100-1000目筛网抽滤收集凝胶微球，并用有机溶剂和超净水洗涤微球，于20-80%乙醇中保存于4°C ;并在双蒸水中搅拌悬浮筛分，获得均一粒径琼脂糖凝胶微球；h、取5-50重量分比的琼脂糖微球抽干，悬浮于体积比例为5-200的丙酮中，加入1，4 丁二醇-二缩水甘油醚，在10-1OOOrpm常温下搅拌1_10小时后向反应体系中缓慢滴加入5-65%的NaOH溶液并在10rpm于常温下反应4小时，然后在将反应体系以0.5°C /min的升温速度缓慢升温至38 °C继续反应4小时；1、反应后向反应体系加入环氧氯丙烷，搅拌5-30分后向体系中缓慢滴入5-65%的NaOH溶液，升温至30-60°C继续反应2_24小时；然后在50-1000rpm缓慢冷却至室温，反复洗涤至中性，抽干；j、向反应得凝胶加入1-10倍体积0.05-5% NaBH4，于室温下以50_1000rpm反应2-24小时，反复洗涤至中性，抽干并将所得的琼脂糖凝胶介质保存在20-80%乙醇中。所述的步骤a中所述的油性液体是液体石蜡、大豆油、芝麻油或茶油中的1-2种，所述的有机溶剂是石油醚、丙酮、氯仿或苯中的1-2种。所述的步骤b中加入的非离子表面活性剂是Emcol、Atlas G、AtmuK PEG、Span、Tween 或 Brij 中的 1-3 种。所述的步骤g中选用的有机溶剂为丙酮、氯仿、石油醚、苯或无水乙醇等有机溶剂。所述的步骤h、i加入的5-65%的NaOH溶液内含0.05-5% NaBH4。本专利技术的有益效果是:使用本超声反相悬浮搅拌制备方法与现有的冷水相急速射入制备方法相比，在制备过程中步骤明确，条件温和，参数可控，故而提高了凝胶的回收率，实现了凝胶均一性控制，极大地降低了生产成本和凝胶的机械性能。【具体实施方式】下面对本专利技术的【具体实施方式】作进一步详细说明。本专利技术一种使用超声反相悬浮法制备高度交联均一粒径琼脂糖凝胶介质的方法，其步骤是:a、准确量取2-20体积比例的油性液体与准确量取I体积比例的有机溶剂按2_20:I的比例混匀制成油相溶液；b、向油相溶液中加入非离子表面活性剂调节油相溶液的亲水亲油平衡值至3-20之间；C、将上述体系用100w-1000w超声5_30分钟，混均后预热至60_90°C ；d、准确称取重量分比为0.4?4的琼脂糖，重量分比为0.18的氯化钠使用超纯水定容至体积比例为20，加热融化，制成水相的2%?20%琼脂糖溶液；e、将2%?20%琼脂糖溶液加热至60_90°C加入60_90°C的油相中，恒温以转速10-1OOOrpm搅拌15-90分钟乳化；f、乳化完成之后以低速50-300rpm搅拌，3小时内缓慢降至室温，再继续降温至4-8 0C ；g、通过100-1000目筛网抽滤收集凝胶微球，并用有机溶剂和超净水洗涤微球，于20-80%乙醇中保存于4°C ;并在双蒸水中搅拌悬浮筛分，获得均一粒径琼脂糖凝胶微球；h、取5-50重量分比的琼脂糖微球抽干，悬浮于体积比例为5-200的丙酮中，加入1，4 丁二醇-二缩水甘油醚，在10-1OOOrpm常温下搅拌1_10小时后向反应体系中缓慢滴加入5-65%的NaOH溶液并在10rpm于常温下反应4小时，然后在将反应体系以0.5°C /min的升温速度缓慢升温至38 °C继续反应4小时； 1、反应后向反应体系加入环氧氯丙烷，搅拌5-30分后向体系中缓慢滴入5-65 %的NaOH溶液，升温至30-60°C继续反应2_24小时；然后在50-1000rpm缓慢冷却至室温，反复洗涤至中性，抽干；j、向反应得凝胶加入1-10倍体积0.05-5% NaBH4，于室温下以50_1000rpm反应2-24小时，反复洗涤至中性，抽干并将所得的琼脂糖凝胶介质保存在20-80%乙醇中。所述的步骤a中所述的油性液体是液体石蜡、大豆油、芝麻油或茶油中的1-当前第1页1 2 本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种使用超声反相悬浮法制备高度交联均一粒径琼脂糖凝胶介质的方法，其步骤是：a、准确量取2‑20体积比例的油性液体与准确量取1体积比例的有机溶剂按2‑20：1的比例混匀制成油相溶液；b、向油相溶液中加入非离子表面活性剂调节油相溶液的亲水亲油平衡值至3‑20之间；c、将上述体系用100w‑1000w超声5‑30分钟，混均后预热至60‑90℃；d、准确称取重量分比为0.4～4的琼脂糖，重量分比为0.18的氯化钠使用超纯水定容至体积比例为20，加热融化，制成水相的2％～20％琼脂糖溶液；e、将2％～20％琼脂糖溶液加热至60‑90℃加入60‑90℃的油相中，恒温以转速100‑1000rpm搅拌15‑90分钟乳化；f、乳化完成之后以低速50‑300rpm搅拌，3小时内缓慢降至室温，再继续降温至4‑8℃；g、通过100‑1000目筛网抽滤收集凝胶微球，并用有机溶剂和超净水洗涤微球，于20‑80％乙醇中保存于4℃；并在双蒸水中搅拌悬浮筛分，获得均一粒径琼脂糖凝胶微球；h、取5‑50重量分比的琼脂糖微球抽干，悬浮于体积比例为5‑200的丙酮中，加入1，4丁二醇‑二缩水甘油醚，在100‑1000rpm常温下搅拌1‑10小时后向反应体系中缓慢滴加入5‑65％的NaOH溶液并在100rpm于常温下反应4小时，然后在将反应体系以0.5℃/min的升温速度缓慢升温至38℃继续反应4小时；i、反应后向反应体系加入环氧氯丙烷，搅拌5‑30分后向体系中缓慢滴入5‑65％的NaOH溶液，升温至30‑60℃继续反应2‑24小时；然后在50‑1000rpm缓慢冷却至室温，反复洗涤至中性，抽干；j、向反应得凝胶加入1‑10倍体积0.05‑5％NaBH4，于室温下以50‑1000rpm反应2‑24小时，反复洗涤至中性，抽干并将所得的琼脂糖凝胶介质保存在20‑80％乙醇中。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：陈江磊，潘恩山，潘奔前，那妹，
申请(专利权)人：广州极泰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44
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