一种山羊痘、绵羊痘二价细胞弱毒疫苗及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供一种山羊痘、绵羊痘二价细胞弱毒疫苗，有效成分包括山羊痘病毒细胞传代致弱毒以及绵羊痘病毒细胞传代致弱毒；其中，山羊痘病毒细胞传代致弱毒为山羊痘病毒细胞传代致弱疫苗株Goatpox Virus HN-XY2010F43株CCTCC  V201503，绵羊痘病毒细胞传代致弱毒为绵羊痘病毒细胞传代致弱疫苗株Sheeppox Virus GS-WW 2010 F44株CCTCC  V201504。本发明专利技术的山羊痘、羊口疮病毒二联细胞弱毒疫苗安全，且能够产生有效的免疫保护力。本发明专利技术对于研制安全高效的弱毒疫苗以及用本发明专利技术公开的弱毒株规模化生产山羊痘、绵羊痘病毒二价细胞弱毒疫苗来防控山羊痘和绵羊痘具有重要的现实意义。

【技术实现步骤摘要】
一种山羊痘、绵羊痘二价细胞弱毒疫苗及其制备方法和应用
本专利技术属于生物制品
，具体涉及一种山羊痘、绵羊痘二价细胞弱毒疫苗及其制备方法和应用。
技术介绍
羊痘病毒(Capripoxvirus,CPV)是最重要的动物痘病毒,在分类地位上属于痘病毒科(Poxviridae)脊椎动物痘病毒亚科(Chordopoxrinae)中的羊痘病毒属(Capripoxvirus)成员,包括山羊痘病毒(Goatpoxvirus,GTPV)、绵羊痘病毒(Sheeppoxvirus,SPPV)和牛结节疹病毒(Lumpyskindiseasevirus,LSDV)。羊痘是由羊痘病毒引起的一种急性、接触性传染病，被世界动物卫生组织(FAO/OIE)列为93种必须报告的动物疫病之一，我国将其列为一类传染病。其发病率可达75％以上，死亡率可达50％以上，羔羊死亡率可达100％，同时还可导致母羊流产。羊痘是古老的疾病之一，1879年Hansen首次报道了挪威的山羊痘。后来，陆续在世界其他地区报道了该病。广泛分布于非洲、中东、印度次大陆、北欧、地中海各国及德国、澳大利亚、美国等,特别是非洲北部、中东和亚洲的部分国本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种山羊痘、绵羊痘二价细胞弱毒疫苗，其特征在于：所述弱毒疫苗的有效成分包括山羊痘病毒细胞传代致弱毒以及绵羊痘病毒细胞传代致弱毒；其中，所述山羊痘病毒细胞传代致弱毒为山羊痘病毒细胞传代致弱疫苗株Goatpox Virus HN‑XY2010F43株CCTCC  V201503，所述绵羊痘病毒细胞传代致弱毒为绵羊痘病毒细胞传代致弱疫苗株Sheeppox Virus GS‑WW 2010 F44株CCTCC  V201504。

【技术特征摘要】
1.一种山羊痘、绵羊痘二价细胞弱毒疫苗，其特征在于：所述弱毒疫苗的有效成分包括山羊痘病毒细胞传代致弱毒以及绵羊痘病毒细胞传代致弱毒；其中，所述山羊痘病毒细胞传代致弱毒为山羊痘病毒细胞传代致弱疫苗株GoatpoxVirusHN-XY2010F43株CCTCCV201503，所述绵羊痘病毒细胞传代致弱毒为绵羊痘病毒细胞传代致弱疫苗株SheeppoxVirusGS-WW2010F44株CCTCCV201504。2.根据权利要求1所述的疫苗，其特征在于：所述山羊痘病毒细胞传代致弱疫苗株GoatpoxVirusHN-XY2010F43株CCTCCV201503与绵羊痘病毒细胞传代致弱疫苗株SheeppoxVirusGS-WW2010F44株CCTCCV201504的体积比为1:1。3.权利要求1所述的山羊痘、绵羊痘二价细胞弱毒疫苗的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）病毒抗原的制备选生长良好布满单层的新生羊睾丸原代细胞，倾去营养液，按原营养液体积的1-10%分别接种山羊痘病毒细胞传代致弱疫苗株GoatpoxVirusHN-XY2010F43株CCTCCV201503和绵羊痘病毒细胞传代致弱疫苗株SheeppoxVirusGS-WW2010F44株CCTCCV201504，吸附5-15分钟后加DMEM维持液，调pH至7.0～7.2，加青霉素、链霉素各100单位/ml，于37℃、5%CO2浓度培养箱中进行培养；培养40～72h，细胞病变达到75%以上时收获病毒，置-20℃冰箱反复冻融两次，检验合格且病毒滴度不低于103.5TCID50/0.1ml，得到山羊痘、绵羊痘病毒细胞传代致弱毒抗原；（2）疫苗的配制将步骤（1）制备的山羊痘、绵羊痘病毒细胞传代致弱毒抗原以体积比1：1混合，再与耐热冻干保护剂以体积比1︰1的比例混匀后，低温冷冻冻干，得到疫苗。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述耐热冻干保护剂的配方为：海藻糖30～70g/L，脱脂...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘相涛，王光祥，尚佑军，张志东，王艳华，吴锦艳，陈妍，田宏，栾志舫，逯忠新，
申请(专利权)人：中国农业科学院兰州兽医研究所，
类型：发明
国别省市：甘肃;62