一种铁皮石斛提取物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供一种铁皮石斛提取物，所述的提取物中铁皮石斛多糖的含量为70.0％～90.0％，总黄酮的含量为0.5～1.0％，其可用于制备预防、治疗栓塞性心脑血管疾病、肾性糖尿病的药物或保健食品。本发明专利技术还提供上述提取物的制备方法，具体包括以下四步骤：有机溶剂脱脂、乙醇溶液浸泡后闪提、Sevage试剂除蛋白和活性炭脱色，该制备方法不但能保护铁皮石斛有效成分不受热破坏，最大限度同时有效提取铁皮石斛多糖与黄酮，而且该制备方法溶剂用量小，提取时间短，提高产品质量，降低生产成本。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医药保健食品领域，具体涉及一种铁皮石斛提取物及其制备方法和应 用。
技术介绍
铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura. et Migo)是兰科石斛属多年生草本 植物，其主要药用部位是新鲜或干燥茎，主要分布于安徽、浙江、广西、湖南、云南、贵州等 地，是传统名贵中药材。铁皮石斛含有石斛多糖、黄酮、蛋白质、17种氨基酸及无机元素等， 具有益胃生津，滋阴清热之功效。《神农本草经》将其列为上品，道家养生经典《道藏》将它 誉为"中华九大仙草"之首。民间称铁皮石斛为"救命仙草"、"寸金草"，作为养生保健的极 品，历代医家推崇信至。 目前文献报道的铁皮石斛提取物的制备方法大多围绕多糖开展研宄，活性成分单 一，提取方式主要有加热浸提法、酶解法、超声辅助提取法、微波辅助提取法等，且都采用水 作为提取溶剂，存在有效成分利用不充分，提取效率低等弊端。 此外，铁皮石斛的成分研宄主要围绕多糖含量，并未对其组成成分开展深入研宄， 也显有对其它成分进行分析，存在物质基础不明确，质量不可控等弊端。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种铁皮石斛提取物，所述的提取物中铁皮石斛多糖的含 量为70. 0%~90. 0% (重量比），其中，铁皮石斛多糖中甘露糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖 的含量分别为40. 0%~50. 0%、15. 0%~25. 0%、L 5%~5. 0%、L 5%~5. 0% ;铁皮石 斛总黄酮的含量为0.5~1.0% (重量比），其中柚皮素的含量为0.05%~0.1%。另外， 铁皮石斛中总黄酮还含有3'，5, 5'，7-四羟基二氢黄酮。 作为优先的，进一步限定所述铁皮石斛提取物中铁皮石斛多糖含量为 80. 0% -90. 0% (重量比），其中，铁皮石斛多糖中甘露糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖的含 量分别为45. 0% -50. 0%、20. 0-25. 0%、3. 0% -5. 0%、3. 0-5. 0% ;铁皮石斛总黄酮含量为 0.8% -1.0% (重量比），其中柚皮素的含量为0.08-0. 1%。 更进一步限定所述铁皮石斛提取物中铁皮石斛多糖含量为85.0% -90.0% (重量比），其中，铁皮石斛多糖中甘露糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖的含量分别为 48. 0% -50. 0%、23. 0% -25. 0%、4. 0% -5. 0%、4. 5% -5. 0% ;铁皮石斛总黄酮含量为 0.9% -1.0% (重量比），其中柚皮素的含量为0.08% -0.09%。 本专利技术还提供了一种铁皮石斛提取物制备方法，其包括脱脂、闪提、除蛋白和脱色 四步骤，具体如下： (1)脱脂：取铁皮石斛饮片，加5~10倍体积量有机溶剂浸泡0. 5~2h，回流1~ 3次，每次2h，过滤，挥干有机溶剂得药渣； (2)闪提：取上述药渣，加5~20倍体积量5 %~30 %乙醇溶液浸泡0? 5~lh，闪 提时间1~3min，闪提转速3500~5000rpm，过滤，药澄再重复闪提1~2次，合并闪提所 得滤液，浓缩至无醇味，浓缩液每ml相当于含生药0. 5~1.0 g ; ⑶除蛋白：取上述浓缩液，加浓缩液1/5~1/3倍体积量的Sevage试剂，剧烈振 摇lOmin，静置lOmin，以4000~6000r/min离心10min，溶液分三层，收集上层溶液，上层溶 液再重复上述步骤除蛋白2~5次并收集上层溶液； (4)脱色：向上述除蛋白后的溶液中加入活性炭，搅拌，过滤，滤液减压浓缩得铁 皮石斛提取物。 其中，作为优选的，进一步限定步骤（1)中所述的有机溶剂选用石油醚、正己烷、 乙酸乙酯中的一种或两种混合物，更进一步限定步骤（1)中所述的有机溶剂为正己烷、乙 酸乙酯中的一种。 其中，作为优选的，进一步限定步骤（2)中所述闪提条件为6~10倍体积量8%~ 15 %乙醇溶液浸泡lh，闪提时间2~3min，闪提转速4500~5000rpm ;更进一步限定步 骤（2)中所述的闪提条件为8倍体积量10%乙醇溶液浸泡lh，闪提时间2min，闪提转速 5000rpm〇 其中，作为优选的，进一步限定步骤（3)中所述的Sevage试剂选用体积比为5:2 的氯仿：正丁醇。 其中，作为优选的，进一步限定步骤（4)中所述的活性炭用量为1~2% (g/ml)。 本专利技术的另一目的在于提供所述的铁皮石斛提取物的新应用，本专利技术人意外发 现，本专利技术所提供的铁皮石斛提取物具有明显的抗血小板凝集活性，可用于制备预防、治疗 栓塞性心脑血管疾病的药物或保健食品；还可明显降低血糖、升高肝糖原，可用于制备预 防、治疗肾性糖尿病的药物或保健食品。 相比现有技术，本专利技术取得如下有益效果： 1、相比现有技术，本专利技术提供的铁皮石斛提取物不仅含有丰富的多糖，而且还含 有柚皮素、3'，5, 5'，7-四羟基二氢黄酮类成分，其主要活性成分明确，铁皮石斛多糖的含量 为85. 0%~90. 0% (重量比），其中，铁皮石斛多糖中甘露糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖的 含量分别为 48.0% _50.0%、23.0% _25.0%、4.0% _5.0%、4.5% -5.0% ;铁皮石斛总黄 酮含量为0.9% -1.0% (重量比），其中柚皮素的含量为0.08% -0.09%。 2、本专利技术提供了一种铁皮石斛提取物的制备方法，其分离纯化工艺设计合理，尤 其是其提取过程采用8倍体积量10%乙醇溶液浸泡lh，闪提时间2min，闪提转速5000rpm， 该闪提方法不但能保护铁皮石斛有效成分不会受热破坏，最大限度同时有效提取铁皮石斛 多糖与黄酮，得率可达到35~40% ;而且该制备方法溶剂用量小，提取时间短，提高产品质 量，降低生产成本。 3、本专利技术提供的铁皮石斛提取物预防、治疗栓塞性心脑血管疾病、肾性糖尿病的 药理药效活性显著，与铁皮石斛多糖提取物（多糖含量达到95% )相比，其药效作用更快、 量效范围更大，效果更显著，为铁皮石斛的精深加工开拓了新的途径。【附图说明】： 图1 :为铁皮石斛提取物多糖标准曲线，横坐标为浓度ug/ml，纵坐标为吸光度，线 性方程为 Y = 0? 0687X+0. 0194, R2 = 0? 9990。图2:为铁皮石斛提取物多糖组成成分的液相色谱图，2为内标物质（盐酸氨基葡 萄糖），其保留时间为11. 242min ;1为甘露糖，相对保留时间为0. 67 ;3为葡萄糖，相对保留 时间为1. 19 ;4为半乳糖，相对保留时间为1. 59 ;5为阿拉伯糖，其相对保留时间为1. 88。 图3 :为铁皮石斛提取物总黄酮标准曲线，横坐标为浓度ug/ml，纵坐标为吸光度， 线性方程为 Y = 0? 0187X+0. 0066, R2 = 0? 9995。图4 :为铁皮石斛提取物柚皮素成分的液相色谱图，1为柚皮素，其保留时间为 40. 750min〇【具体实施方式】 实施例1含量测定方法 (1)多糖的含量测定 对照品溶液的制备取无水葡萄糖对照品适量，精密称定，加水制成每Iml含90yg 的溶液，即得。 标准曲线的制备精密量取对照品溶液0. 2ml、0. 4ml、0. 6ml、0. 8ml、l. 0ml，分别置 10ml具塞试管中，各加水补至L 〇ml，精密加入本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种铁皮石斛提取物，其含有多糖和总黄酮，其特征在于，所述铁皮石斛提取物中铁皮石斛多糖的含量为70.0％～90.0％(重量比)，其中，铁皮石斛多糖中甘露糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖的含量分别为40.0％～50.0％(重量比)、15.0％～25.0％(重量比)、1.5％～5.0％(重量比)、1.5％～5.0％(重量比)；铁皮石斛总黄酮的含量为0.5～1.0％(重量比)，其中柚皮素的含量为0.05％～0.1％(重量比)。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王建方，吴健，印晓红，陈琳，虞利东，朱明旺，李立雷，汤郑静，曹晓铃，
申请(专利权)人：浙江济公缘药业有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33